誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞體外向胰島素分泌細(xì)胞分化及對(duì)血糖的調(diào)控
發(fā)布時(shí)間:2017-12-16 11:23
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【摘要】:背景:誘導(dǎo)小鼠多潛能性干細(xì)胞定向分化為胰島素分泌細(xì)胞能有效改善糖尿病小鼠血糖水平。目的:在體外將誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞定向分化的胰島樣細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行相關(guān)分子及蛋白水平檢測(cè),并觀察其在體外和體內(nèi)胰島素分泌情況。方法:將體外培養(yǎng)的小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞采用聯(lián)合誘導(dǎo)劑分3個(gè)階段對(duì)其進(jìn)行誘導(dǎo)分化,并對(duì)每個(gè)誘導(dǎo)階段形成的內(nèi)胚層細(xì)胞、胰島前體細(xì)胞和成熟胰島細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和PCR檢測(cè)相關(guān)基因的表達(dá)水平。對(duì)成熟的胰島樣細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行雙硫腙染色,ELISA檢測(cè)體外釋放胰島素功能。將獲得的胰島素分泌細(xì)胞移植到糖尿病小鼠腎包膜下,觀察其血糖水平變化。結(jié)果與結(jié)論:(1)體外成功獲得的小鼠胰島樣細(xì)胞團(tuán),其結(jié)構(gòu)呈球形,雙硫腙染色呈鐵紅色,PCR檢測(cè)到在m RNA水平上表達(dá)胰島素基因;(2)ELISA檢測(cè)到胰島樣細(xì)胞團(tuán)在受到葡萄糖刺激時(shí)能夠分泌胰島素;(3)通過腎包膜方法將細(xì)胞團(tuán)移植到1型糖尿病小鼠體內(nèi),對(duì)小鼠高血糖有明顯的調(diào)控作用。
【作者單位】: 解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形外科;
【基金】:西京醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究項(xiàng)目(XJZT13z03)~~
【分類號(hào)】:R587.1
【正文快照】: 文章快速閱讀:利用化學(xué)抑制劑通過三步法將小鼠多潛能性干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為具有功能的胰島素分泌細(xì)胞小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞體外定向胰島誘導(dǎo)步驟1內(nèi)胚層PCR檢測(cè)Sox17,FoxA 2 mR NA表達(dá)步驟2PCR檢測(cè)NGN3,EUROD1,PDX1,胰島前體細(xì)胞SOX9 mR NA表達(dá),
本文編號(hào):1295850
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