誘導型多能干細胞體外向胰島素分泌細胞分化及對血糖的調(diào)控
發(fā)布時間:2017-12-16 11:23
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【摘要】:背景:誘導小鼠多潛能性干細胞定向分化為胰島素分泌細胞能有效改善糖尿病小鼠血糖水平。目的:在體外將誘導型多能干細胞定向分化的胰島樣細胞團進行相關(guān)分子及蛋白水平檢測,并觀察其在體外和體內(nèi)胰島素分泌情況。方法:將體外培養(yǎng)的小鼠誘導型多能干細胞采用聯(lián)合誘導劑分3個階段對其進行誘導分化,并對每個誘導階段形成的內(nèi)胚層細胞、胰島前體細胞和成熟胰島細胞進行形態(tài)學觀察和PCR檢測相關(guān)基因的表達水平。對成熟的胰島樣細胞團進行雙硫腙染色,ELISA檢測體外釋放胰島素功能。將獲得的胰島素分泌細胞移植到糖尿病小鼠腎包膜下,觀察其血糖水平變化。結(jié)果與結(jié)論:(1)體外成功獲得的小鼠胰島樣細胞團,其結(jié)構(gòu)呈球形,雙硫腙染色呈鐵紅色,PCR檢測到在m RNA水平上表達胰島素基因;(2)ELISA檢測到胰島樣細胞團在受到葡萄糖刺激時能夠分泌胰島素;(3)通過腎包膜方法將細胞團移植到1型糖尿病小鼠體內(nèi),對小鼠高血糖有明顯的調(diào)控作用。
【作者單位】: 解放軍第四軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院整形外科;
【基金】:西京醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究項目(XJZT13z03)~~
【分類號】:R587.1
【正文快照】: 文章快速閱讀:利用化學抑制劑通過三步法將小鼠多潛能性干細胞定向誘導分化為具有功能的胰島素分泌細胞小鼠誘導型多能干細胞體外培養(yǎng)小鼠誘導型多能干細胞體外定向胰島誘導步驟1內(nèi)胚層PCR檢測Sox17,FoxA 2 mR NA表達步驟2PCR檢測NGN3,EUROD1,PDX1,胰島前體細胞SOX9 mR NA表達,
本文編號:1295850
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