本文關(guān)鍵詞：糖尿病機(jī)械痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)中Nav1.7，Nav1.8和Cav3.2的表達(dá)與痛覺變化的關(guān)系

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【摘要】：目的本研究以背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglia,DRG)中離子通道為切入點(diǎn),以鏈脲佐菌素制備的糖尿病機(jī)械痛(diabetic mechanical allodynia,DMA)模型大鼠為基礎(chǔ),運(yùn)用分子生物學(xué)方法檢測DMA大鼠模型DRGs中電壓門控性鈉離子通道Nav1.7、Nav1.8和電壓依賴性T型鈣離子通道Cav3.2隨疼痛發(fā)生發(fā)展的表達(dá)變化,研究糖尿病痛性神經(jīng)病變大鼠背根神經(jīng)節(jié)中鈉、鈣離子通道表達(dá)水平變化及其與痛覺變化的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)旨在揭示糖尿病痛性神經(jīng)病變發(fā)病的分子機(jī)理,為臨床治療提供新思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法(1)使用鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,對(duì)照組予以相同劑量的檸檬酸緩沖液;(2)分別于造模前及造模后第3d,7d,14d,21d,28d測定大鼠血糖和體重;(3)應(yīng)用von Frey hairs法測定大鼠機(jī)械性后爪回縮閾值的變化,篩選DMA模型大鼠并將造模成功大鼠隨機(jī)分為四組(7d組、14d組、21d組、28d組);(4)運(yùn)用Western blot技術(shù)檢測各DMA模型組及對(duì)照組大鼠背根神經(jīng)節(jié)中Nav1.7、Nav1.8蛋白表達(dá)變化;(5)分別運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)和Western blot技術(shù)檢測各DMA模型組及對(duì)照組大鼠背根神經(jīng)節(jié)中Cav3.2 mRNA和蛋白表達(dá)變化。結(jié)果(1)糖尿病模型組大鼠造模后3 d血糖水平顯著升高(血糖濃度16.7mmol/L),與對(duì)照組相比,具有明顯的多飲、多食、多尿且體重增長緩慢;(2)造模后7 d,約50%的糖尿病模型大鼠雙側(cè)后爪出現(xiàn)明顯的機(jī)械性觸誘發(fā)痛(DMA模型大鼠),機(jī)械痛閾值較正常對(duì)照組明顯下降(P0.01),持續(xù)降低至21d并維持痛閾低值至28d(P0.01);(3)與對(duì)照組相比,DMA模型組大鼠DRGs中Nav1.7蛋白表達(dá)水平上調(diào)且存在長時(shí)程增強(qiáng)的趨勢,而Nav1.8蛋白表達(dá)水平除7d組上調(diào)外其余各組均下調(diào)且存在長時(shí)程減弱的趨勢;(4)DMA模型組大鼠DRGs中Cav3.2mRNA與蛋白質(zhì)的表達(dá)變化基本一致,表現(xiàn)為7d及14d組較對(duì)照組顯著上調(diào)而21d及28d組較對(duì)照組無顯著差異。結(jié)論(1)DMA模型組大鼠DRGs中Nav1.7、Nav1.8、Cav3.2在實(shí)驗(yàn)早期表達(dá)均上調(diào),并與疼痛相關(guān),提示電壓門控性鈉離子通道Nav1.7、Nav1.8和電壓依賴性T型鈣離子通道Cav3.2共同參與了糖尿病大鼠周圍神經(jīng)疼痛的發(fā)生。(2)DMA模型組大鼠疼痛發(fā)展過程中以電壓門控性鈉離子通道表達(dá)變化為主,表現(xiàn)為Nav1.7持續(xù)上調(diào)而Nav1.8持續(xù)下調(diào),且與疼痛變化明顯相關(guān),提示電壓門控性鈉離子通道Nav1.7、Nav1.8在糖尿病大鼠機(jī)械痛敏的維持階段起重要作用。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R587.2

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本文編號(hào)：1277864