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CIDE-B基因啟動(dòng)子甲基化及mRNA表達(dá)水平與超重肥胖的關(guān)系

發(fā)布時(shí)間:2017-12-10 19:30

  本文關(guān)鍵詞:CIDE-B基因啟動(dòng)子甲基化及mRNA表達(dá)水平與超重肥胖的關(guān)系


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【摘要】:目的:檢測(cè)超重肥胖者和正常對(duì)照者外周血CIDE-B基因啟動(dòng)子序列甲基化水平及皮下和大網(wǎng)膜脂肪組織mRNA表達(dá)水平,探討CIDE-B基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化程度及mRNA表達(dá)水平與超重肥胖的關(guān)系。方法:納入患者均來自于醫(yī)院腹部手術(shù)患者,手術(shù)前測(cè)定身高、體重、腰圍、臀圍及基本的生化指標(biāo)。排除孕婦、殘障或精神障礙者、繼發(fā)性肥胖者、惡性腫瘤患者及乙肝、艾滋病、結(jié)核等傳染性疾病患者。采用2007年中國成人肥胖診斷標(biāo)準(zhǔn),將研究對(duì)象分為超重肥胖組(BMI?24.0kg/m2)和正常組(18.5kg/m2?BMI24 kg/m2)。采用質(zhì)譜法檢測(cè)啟動(dòng)子甲基化,研究對(duì)象共116例,其中超重肥胖組66例,正常組50例,均于手術(shù)前抽取清晨空腹外周靜脈血2ml,用EDTA-K2抗凝,經(jīng)3000rpm離心10min分離血漿和細(xì)胞后于-80攝氏度冰箱保存待測(cè);采用熒光定量PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)水平,納入研究對(duì)象106例,其中超重肥胖組60例,正常組46例,研究對(duì)象在全麻情況下施行手術(shù),打開腹膜分別取2g皮下和大網(wǎng)膜組織,并立即用無菌的生理鹽水進(jìn)行沖洗,裝在2ml的凍存管內(nèi),置液氮中保存。用IBM SPSS Statistics 21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,組間差異采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)或Mann-Whitney U檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用?2檢驗(yàn),CpG位點(diǎn)甲基化水平對(duì)BMI的影響程度分析采用多重線性回歸,皮下和大網(wǎng)膜脂肪組織目的基因表達(dá)量差異采用配對(duì)t檢驗(yàn)或Wilcoxon符號(hào)秩和檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果:1、本次sequenom質(zhì)譜法共檢測(cè)出CIDE-B基因啟動(dòng)子序列21個(gè)CpG位點(diǎn)存在甲基化。兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,正常組與超重肥胖組間該基因各CpG位點(diǎn)甲基化水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);甲基化水平最高的是CpG4.5(0.65±0.06),最低的是CpG15(0.04±0.05);多重線性回歸結(jié)果顯示,超重肥胖組BMI受CIDE-B基因CpG14位點(diǎn)甲基化水平(?=-51.60,P0.05)影響,腰臀比受性別(?=-0.05,P0.05)和CpG30位點(diǎn)甲基化水平(?=-1.15,P0.05)影響。2、皮下脂肪組織CIDE-B基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量是大網(wǎng)膜脂肪組織的1.93倍(皮下脂肪組織△Ct=2.34±1.80,大網(wǎng)膜脂肪組織△Ct=1.40±1.04),配對(duì)t檢驗(yàn)結(jié)果顯示,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.52,P0.05);皮下脂肪組織中,60例超重肥胖者CIDE-B基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量是46例正常者的0.84倍(正常組△Ct=0.88±1.48,超重肥胖組△Ct=1.14±1.16),兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.54,P0.05);大網(wǎng)膜脂肪組織中,60例超重肥胖者CIDE-B基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量是46例正常者的1.72倍(正常組△Ct=2.22±1.55,超重肥胖組△Ct=1.44±0.99),兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)結(jié)果顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-2.38,P0.05)。3、大網(wǎng)膜脂肪組織中,舒張壓大于80mmHg的研究對(duì)象該基因的相對(duì)表達(dá)量是舒張壓小于80mmHg的1.01倍,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);皮下脂肪組織中,TG含量高的研究對(duì)象目的基因相對(duì)表達(dá)量是TG含量低的1.20倍,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);高HDL目的基因相對(duì)表達(dá)量是低HDL的0.76倍,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);高LDL目的基因相對(duì)表達(dá)量是低LDL的1.11倍,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、多重線性回歸結(jié)果顯示,CpG19位點(diǎn)甲基化水平對(duì)目的基因mRNA在大網(wǎng)膜脂肪組織中表達(dá)的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(?=-14.82,P0.05),皮下脂肪組織中,CpG2位點(diǎn)甲基化水平對(duì)目的基因mRNA表達(dá)的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(?=-12.40,P0.05)。結(jié)論:CIDE-B基因啟動(dòng)子序列存在異常甲基化狀態(tài),且甲基化程度越高,BMI和腰臀比越小;CIDE-B基因的高表達(dá)可能導(dǎo)致TG含量升高,HDL水平降低,LDL水平升高;大網(wǎng)膜脂肪組織中超重肥胖者CIDE-B基因mRNA表達(dá)量高于正常組,提示內(nèi)臟大網(wǎng)膜脂肪蓄積與肥胖關(guān)系更加密切;CIDE-B啟動(dòng)子甲基化水平越低,mRNA的表達(dá)量越高。
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R589.2

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本文編號(hào):1275637

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