本文關鍵詞：CIDE-B基因啟動子甲基化及mRNA表達水平與超重肥胖的關系

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【摘要】：目的:檢測超重肥胖者和正常對照者外周血CIDE-B基因啟動子序列甲基化水平及皮下和大網膜脂肪組織mRNA表達水平,探討CIDE-B基因啟動子區(qū)域甲基化程度及mRNA表達水平與超重肥胖的關系。方法:納入患者均來自于醫(yī)院腹部手術患者,手術前測定身高、體重、腰圍、臀圍及基本的生化指標。排除孕婦、殘障或精神障礙者、繼發(fā)性肥胖者、惡性腫瘤患者及乙肝、艾滋病、結核等傳染性疾病患者。采用2007年中國成人肥胖診斷標準,將研究對象分為超重肥胖組(BMI?24.0kg/m2)和正常組(18.5kg/m2?BMI24 kg/m2)。采用質譜法檢測啟動子甲基化,研究對象共116例,其中超重肥胖組66例,正常組50例,均于手術前抽取清晨空腹外周靜脈血2ml,用EDTA-K2抗凝,經3000rpm離心10min分離血漿和細胞后于-80攝氏度冰箱保存待測;采用熒光定量PCR檢測mRNA表達水平,納入研究對象106例,其中超重肥胖組60例,正常組46例,研究對象在全麻情況下施行手術,打開腹膜分別取2g皮下和大網膜組織,并立即用無菌的生理鹽水進行沖洗,裝在2ml的凍存管內,置液氮中保存。用IBM SPSS Statistics 21.0軟件進行數據分析,組間差異采用兩獨立樣本的t檢驗或Mann-Whitney U檢驗,計數資料采用?2檢驗,CpG位點甲基化水平對BMI的影響程度分析采用多重線性回歸,皮下和大網膜脂肪組織目的基因表達量差異采用配對t檢驗或Wilcoxon符號秩和檢驗,檢驗水準α=0.05。結果:1、本次sequenom質譜法共檢測出CIDE-B基因啟動子序列21個CpG位點存在甲基化。兩獨立樣本t檢驗結果顯示,正常組與超重肥胖組間該基因各CpG位點甲基化水平差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);甲基化水平最高的是CpG4.5(0.65±0.06),最低的是CpG15(0.04±0.05);多重線性回歸結果顯示,超重肥胖組BMI受CIDE-B基因CpG14位點甲基化水平(?=-51.60,P0.05)影響,腰臀比受性別(?=-0.05,P0.05)和CpG30位點甲基化水平(?=-1.15,P0.05)影響。2、皮下脂肪組織CIDE-B基因mRNA的相對表達量是大網膜脂肪組織的1.93倍(皮下脂肪組織△Ct=2.34±1.80,大網膜脂肪組織△Ct=1.40±1.04),配對t檢驗結果顯示,差異有統(tǒng)計學意義(t=4.52,P0.05);皮下脂肪組織中,60例超重肥胖者CIDE-B基因mRNA的相對表達量是46例正常者的0.84倍(正常組△Ct=0.88±1.48,超重肥胖組△Ct=1.14±1.16),兩獨立樣本t檢驗結果顯示差異無統(tǒng)計學意義(t=1.54,P0.05);大網膜脂肪組織中,60例超重肥胖者CIDE-B基因mRNA的相對表達量是46例正常者的1.72倍(正常組△Ct=2.22±1.55,超重肥胖組△Ct=1.44±0.99),兩獨立樣本t檢驗結果顯示差異有統(tǒng)計學意義(t=-2.38,P0.05)。3、大網膜脂肪組織中,舒張壓大于80mmHg的研究對象該基因的相對表達量是舒張壓小于80mmHg的1.01倍,且差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);皮下脂肪組織中,TG含量高的研究對象目的基因相對表達量是TG含量低的1.20倍,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);高HDL目的基因相對表達量是低HDL的0.76倍,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);高LDL目的基因相對表達量是低LDL的1.11倍,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4、多重線性回歸結果顯示,CpG19位點甲基化水平對目的基因mRNA在大網膜脂肪組織中表達的影響有統(tǒng)計學意義(?=-14.82,P0.05),皮下脂肪組織中,CpG2位點甲基化水平對目的基因mRNA表達的影響有統(tǒng)計學意(?=-12.40,P0.05)。結論:CIDE-B基因啟動子序列存在異常甲基化狀態(tài),且甲基化程度越高,BMI和腰臀比越小;CIDE-B基因的高表達可能導致TG含量升高,HDL水平降低,LDL水平升高;大網膜脂肪組織中超重肥胖者CIDE-B基因mRNA表達量高于正常組,提示內臟大網膜脂肪蓄積與肥胖關系更加密切;CIDE-B啟動子甲基化水平越低,mRNA的表達量越高。
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R589.2

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