低強(qiáng)度超聲波對糖尿病大鼠難愈性創(chuàng)面愈合的影響及機(jī)制研究
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【摘要】:目的:本次實驗通過低強(qiáng)度超聲波輻照治療糖尿病大鼠創(chuàng)面,觀察創(chuàng)面愈合情況及創(chuàng)面愈合過程中相關(guān)細(xì)胞因子的變化水平。從創(chuàng)面愈合、細(xì)胞增殖、血管再生及細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等多個不同層面探討低強(qiáng)度超聲波治療糖尿病難愈性創(chuàng)面的可行性,為進(jìn)一步探討糖尿病創(chuàng)面治療的新方法提供科學(xué)有效的依據(jù)。方法:選擇健康雄性Wistar大鼠60只,隨機(jī)分為4組,A組:健康對照組、B組:糖尿病大鼠空白對照組、C組:糖尿病大鼠低強(qiáng)度超聲波治療組、D組:糖尿病大鼠常規(guī)換藥組。以鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)建立糖尿病大鼠模型,然后構(gòu)建糖尿病大鼠全層皮膚缺損創(chuàng)面模型,分別于治療前(第1天)及治療后第7天、14天及21天觀察記錄創(chuàng)面愈合情況,并切取創(chuàng)面組織行HE染色后觀察肉芽創(chuàng)面組織生長情況及成纖維細(xì)胞增殖狀態(tài);免疫組化檢測局部創(chuàng)面組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)及堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)不同時間段的含量變化;Real-Time PCR法檢測創(chuàng)面組織TGF-β1mRNA、Smad3mRNA表達(dá)。采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果:1.一般情況:糖尿病大鼠自模型構(gòu)建成功后,出現(xiàn)多飲、多食、多尿等癥狀,毛發(fā)無光澤,體重明顯下降,皮下脂肪相對減少,正常組大鼠則反應(yīng)靈敏,飲食正常,體重增長。2.HE染色顯示,經(jīng)低強(qiáng)度超聲波輻照治療后,糖尿病大鼠潰瘍創(chuàng)面成纖維細(xì)胞較其他組增生更明顯,纖維組織增多,新生血管更加豐富。3.免疫組織化學(xué)染色顯示,各組大鼠VEGF、bFGF從創(chuàng)傷形成的第1天開始表達(dá)。第1天取材,各組表達(dá)無明顯差異(P㧐0.05);第7天取材,A組明顯高于B組、D組(P㩳0.05),A組也高于C組(P㧐0.05);第14天取材,C組表達(dá)達(dá)到高峰,明顯高于B組、D組(P㩳0.05);第21天取材,VEGF、bFGF表達(dá)量較前有所下降,C組表達(dá)量仍明顯高于其他三組(p㩳0.05)。4.Real-Time PCR檢測顯示,第1天取材時,各組相對表達(dá)量均較低,組間無明顯差異(p㧐0.05);第7天取材時,A組相對表達(dá)量較前增加,C組相對表達(dá)量最高,與A組比較無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(p㧐0.05);第14天取材時,各組TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的相對表達(dá)量達(dá)到最高,其中C組明顯高于其他各組(p㩳0.05);第21天取材時,各組相對表達(dá)量降低,C組仍明顯高于其他各組(p㩳0.05)。結(jié)論:1.低強(qiáng)度超聲波輻照治療糖尿病大鼠創(chuàng)面能促進(jìn)局部創(chuàng)面組織中血管形成、肉芽組織及成纖維細(xì)胞增殖,提高創(chuàng)面愈合率,促進(jìn)創(chuàng)面愈合。2.低強(qiáng)度超聲波輻照治療糖尿病大鼠潰瘍創(chuàng)面能促進(jìn)局部血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)及堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)表達(dá)。3.低強(qiáng)度超聲波能促進(jìn)糖尿病大鼠創(chuàng)面局部轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、信號傳遞分子Smad3的表達(dá)。4.低強(qiáng)度超聲波具有無直接損害、非侵入性等特點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】:川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R587.2
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,本文編號:1249153
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