發(fā)布時間：2017-11-29 07:21

  本文關(guān)鍵詞：抗冷凍蛋白Ⅲ對家兔卵巢組織冷凍效果的影響

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【摘要】：目的：卵巢組織冷凍和移植在保存女性生育力,恢復(fù)生殖內(nèi)分泌功能方面具有重要作用,已成為生殖醫(yī)學研究的重要課題。但是卵巢組織的冷凍損傷和移植后缺血損傷是制約卵巢組織冷凍移植技術(shù)發(fā)展的瓶頸。研究發(fā)現(xiàn)抗冷凍蛋白在組織和細胞的冷凍保存中取得了較好效果。本研究旨在評價抗冷凍蛋白Ⅲ(AFPⅢ)在家兔卵巢組織冷凍保存中的效果。方法：本研究選用家兔卵巢為研究對象,分別采用玻璃化冷凍技術(shù)冷凍家兔卵巢皮質(zhì)片段,慢速冷凍和玻璃化冷凍技術(shù)冷凍家兔全卵巢,并在常規(guī)保護劑方案中添加AFPⅢ.將凍融后的卵巢行光學顯微鏡組織學特性分析,透射電子顯微鏡觀察超微結(jié)構(gòu)變化,TUNEL法檢測卵巢組織間質(zhì)細胞、顆粒細胞和卵母細胞的凋亡情況；共聚焦顯微鏡下檢測卵泡存活情況。結(jié)果：采用玻璃化冷凍法冷凍卵巢家兔皮質(zhì)片段,解凍復(fù)蘇后,新鮮卵巢組的卵泡形態(tài)正常率顯著高于兩冷凍組(P0.05),卵母細胞凋亡率顯著低于兩冷凍組(P0.05)；在冷凍保護劑中添加AFPⅢ后卵泡形態(tài)正常率顯著高于未添加AFPⅢ的常規(guī)玻璃化冷凍組(P0.05),卵母細胞凋亡率顯著低于常規(guī)玻璃化冷凍組。采用慢速冷凍和玻璃化冷凍家兔全卵巢,解凍復(fù)蘇后,新鮮組卵泡形態(tài)正常率、間質(zhì)細胞密度、卵泡存活率顯著高于4組凍融組(P0.05)；新鮮組卵母細胞凋亡率顯著低于4組凍融組。慢速冷凍法冷凍家兔全卵巢時,在冷凍保護劑中添加AFPⅢ后卵泡形態(tài)正常率、間質(zhì)細胞密度和卵泡存活率較未添加AFPⅢ明顯升高(P0.05)；而其卵母細胞凋亡率顯著低于未添加AFPⅢ組(P0.05)。玻璃化冷凍家兔全卵巢時,在冷凍保護劑中添加AFPⅢ后卵泡形態(tài)正常率和間質(zhì)細胞密度較未添加AFPⅢ明顯升高(P0.05)；卵母細胞凋亡率顯著低于未添加AFPⅢ組(P0.05)；而兩組間卵泡存活率無明顯差異(P0.05)。采用玻璃化冷凍法冷凍家兔全卵巢的卵泡形態(tài)正常率、卵泡存活率和卵母細胞凋亡率,與慢速冷凍法相比無顯著差異(P0.05),但其間質(zhì)細胞密度顯著高于慢速冷凍(P0.05)。結(jié)論：采用玻璃化冷凍技術(shù)冷凍家兔卵巢組織片段,新鮮卵巢組的卵泡形態(tài)正常率顯著高于凍融后卵巢組織,而卵母細胞凋亡率明顯低于凍融卵巢,說明卵巢皮質(zhì)玻璃化冷凍過程中存在冷凍損傷；而冷凍保護劑中加入AFPⅢ可減少家兔卵巢皮質(zhì)玻璃化冷凍損傷,提高卵泡形態(tài)正常率減低卵母細胞凋亡率。采用慢速冷凍和玻璃化兩種方法冷凍家兔全卵巢,兩種冷凍方法的效果相當,但玻璃化冷凍對全卵巢的間質(zhì)細胞冷凍保存效果優(yōu)于慢速冷凍。在慢速冷凍和玻璃化冷凍保護劑中添加AFPⅢ均能提高卵泡形態(tài)正常率,增加間質(zhì)細胞密度；減少卵巢組織內(nèi)顆粒細胞、間質(zhì)細胞凋亡,減低卵母細胞凋亡率；提高卵泡存活率,并對卵泡超微結(jié)構(gòu)有較好的保護作用,這種保護作用在慢速冷凍中更加明顯。
【學位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R711.75

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1 婁長春;;導致卵巢癌的危險因素[J];婚育與健康;1997年03期

2 李梅,李媛;卵巢組織冷凍保存及其應(yīng)用的研究進展[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展;2001年04期

3 吳郁;化療及放療對卵巢的影響及預(yù)防[J];國外醫(yī)學.婦產(chǎn)科學分冊;2003年03期

4 張佳榮,萬小平,陳建利,劉玲,楊懿霞;卵巢組織超速冷凍的初步探討[J];中華婦產(chǎn)科雜志;2004年07期

5 李玉艷,王鳳英,俞熾陽;人卵巢組織冷凍研究進展[J];重慶醫(yī)學;2004年12期

6 韓海艷;周穎;;冷凍卵巢組織應(yīng)用的研究進展[J];國外醫(yī)學(計劃生育/生殖健康分冊);2006年03期

7 牛曉明;吳興國;;超速冷凍法冷凍保存大鼠卵巢組織的實驗研究[J];泰山醫(yī)學院學報;2008年01期

8 陳二花;章曉梅;;人類卵巢組織的冷凍保存[J];昆明醫(yī)學院學報;2008年S1期

9 馮鈺婷;金帆;金杭美;;人類卵巢組織冷凍與移植的研究進展[J];國際生殖健康/計劃生育雜志;2008年05期

10 馮翠娥;叢林;;卵巢組織的冷凍及其應(yīng)用的研究進展[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 邢衛(wèi)杰;李予;王文軍;麥美琪;楊冬梓;張清學;;血管內(nèi)皮生長因子對大鼠卵巢組織自體移植后的形態(tài)與功能的影響[A];第二屆全國不育癥研討會論文匯編[C];2007年

2 向東方;曹倩;;卵巢內(nèi)膜異位囊腫剔除術(shù)對卵巢功能影響的研究進展[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學會圍手術(shù)期專業(yè)委員會成立大會暨第二屆全國中西醫(yī)結(jié)合圍手術(shù)期醫(yī)學專題研討會論文集[C];2007年

3 于璇;鄧曉;晁嵐;于紅玲;;玻璃化冷凍卵巢組織自體移植后卵巢功能觀察[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產(chǎn)科學術(shù)會議婦科內(nèi)分泌會場（婦科內(nèi)分泌學組、絕經(jīng)學組、計劃生育學組）論文匯編[C];2012年

4 邢衛(wèi)杰;李予;王文軍;麥美琪;楊冬梓;張清學;;血管內(nèi)皮生長因子對大鼠卵巢組織自體移植后的形態(tài)與功能的影響[A];第一屆中華醫(yī)學會生殖醫(yī)學分會、中國動物學會生殖生物學分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

5 沈薇;羅愛月;榮方方;王世宣;;IGF家族在卵巢生理功能中的重要地位[A];中華醫(yī)學會第三次全國絕經(jīng)學術(shù)會議暨絕經(jīng)相關(guān)問題學習班論文匯編[C];2011年

6 羅文奇;吳長初;李雙容;屈麗華;;一氧化氮對大鼠卵巢中BMP-4表達的影響[A];第三屆全國解剖學技術(shù)會議論文集[C];2011年

7 趙碩;趙淑琴;時慶;秦曉敏;韓亦龍;晁嵐;鄧曉惠;;兩種冷凍方法對人大塊卵巢組織卵泡活性的影響[A];中華醫(yī)學會第十次全國婦產(chǎn)科學術(shù)會議婦科內(nèi)分泌會場（婦科內(nèi)分泌學組、絕經(jīng)學組、計劃生育學組）論文匯編[C];2012年

8 周穎;;人卵巢組織冷凍保存和體外發(fā)育的實驗研究[A];第二屆全國不育癥研討會論文匯編[C];2007年

9 池海虹;周穎;;激活素A對凍融人胎兒卵巢組織原始卵泡體外發(fā)育的影響[A];2008年浙江省婦產(chǎn)科學學術(shù)年會暨浙江省醫(yī)師協(xié)會婦產(chǎn)科醫(yī)師分會成立大會論文匯編[C];2008年

10 呂曉君;;卵巢癌患者的護理[A];2013年河南省腫瘤護理新進展及腫瘤�？谱o士培訓班論文集[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙成;凍存卵巢 解凍希望[N];人民日報;2013年

2 聞聲;智利：首次實施卵巢組織冷凍技術(shù)[N];中國醫(yī)藥報;2007年

3 紫藤;移植孿生姐卵巢組織的婦女生育[N];中國醫(yī)藥報;2005年

4 記者 曹麗君;美科學家利用冷凍人類卵巢組織首次培育出胚胎[N];新華每日電訊;2004年

5 曹麗君;冷凍卵巢組織可培育出胚胎[N];中國醫(yī)藥報;2004年

6 記者 藍建中;日本:對食蟹猴實施卵巢組織異位移植[N];新華每日電訊;2010年

7 毛磊;卵巢凍存為癌癥患者提供生育希望[N];中國醫(yī)藥報;2003年

8 記者 胡蔓 實習生 昕蕾 通訊員 柏春;協(xié)和醫(yī)生破解一醫(yī)學難題[N];湖北日報;2003年

9 安康 周應(yīng)芳 曉明 應(yīng)蕓 李曉宏 文佩;您對卵巢癌了解多少[N];衛(wèi)生與生活報;2003年

10 楊鋒;“卵巢保養(yǎng)”能葆青春嗎[N];中國醫(yī)藥報;2003年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姬萌霞;以細胞篩為載體的玻璃化冷凍和慢速程序化冷凍保存人卵巢組織的效果比較[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2016年

2 王興玲;家兔和人卵巢組織冷凍復(fù)蘇及異種移植的實驗研究[D];鄭州大學;2013年

3 周新惠;大鼠卵巢組織直接覆蓋式玻璃化冷凍保存和自體移植的研究[D];浙江大學;2009年

4 王利紅;人卵巢組織冷凍保存的實驗研究[D];山東大學;2005年

5 孫麗君;家兔卵巢組織冷凍保存、體外培養(yǎng)及移植的研究[D];華中科技大學;2007年

6 王寧玲;大鼠卵巢原始卵泡形成和發(fā)育相關(guān)蛋白譜系的構(gòu)建及功能研究[D];南京醫(yī)科大學;2010年

7 李s，

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