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沉默TREM-2對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞遷移和侵襲的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-11-27 18:33

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【摘要】:目的:應(yīng)用RNA干擾(RNAi)技術(shù)沉默類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞(RA-FLS)髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體2(TREM-2)的表達(dá),探討TREM-2基因沉默對RA-FLS遷移和侵襲能力的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法:向RAFLS轉(zhuǎn)染特異性的TREM-2 siRNA,利用RT-PCR法和Western blot法檢測沉默效果;CCK-8法檢測各組細(xì)胞生長情況;Transwell小室測定細(xì)胞的遷移和侵襲能力;ELISA法檢測細(xì)胞MMP-2和MMP-9的分泌水平;Western blot法分析沉默TREM-2基因?qū)?xì)胞PI3K/AKT通路的影響。結(jié)果:TREM-2 siRNA能顯著降低RA-FLS中TREM2 mRNA和蛋白的表達(dá)(P0.05)。沉默TREM-2基因后,各時(shí)點(diǎn)各組細(xì)胞的活力未見明顯差異;特異性干擾組RA-FLS的遷移細(xì)胞數(shù)目與空白組和control siRNA組相比明顯增多(P0.05);TREM-2 siRNA組侵襲細(xì)胞數(shù)目相比空白組和control siRNA組明顯增多(P0.05);TREM-2 siRNA干擾后RA-FLS分泌的MMP-2顯著增加(P0.05)而MMP-9未見明顯變化;特異性轉(zhuǎn)染后的RA-FLS相對于對照組PI3K/AKT的磷酸化水平顯著增強(qiáng)(P0.05)。結(jié)論:TREM-2可能通過調(diào)節(jié)PI3K/AKT通路的活化對RA-FLS的遷移和侵襲能力發(fā)揮著重要作用。
【作者單位】: 中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院骨科;廣州醫(yī)科大學(xué)生理教研室;增城市人民醫(yī)院骨科;
【基金】:廣東省科技基金資助項(xiàng)目(No.2010B031600184) 廣州市科技和信息化局重點(diǎn)項(xiàng)目(No.11C31120789) 廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.S2012010010629,No.S2013010013768)
【分類號】:R593.22
【正文快照】: regulating the activation of PI3K/AKT signal pathway.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種進(jìn)展性自身免疫性疾病,主要累及關(guān)節(jié),以滑膜增殖以及炎癥細(xì)胞浸潤為特征,最終導(dǎo)致組織破壞與殘疾;こ衫w維細(xì)胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs)在RA的發(fā)生、發(fā)展中

本文編號:1232706

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