本文關(guān)鍵詞：凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1通過c-Jun氨基末端激酶通路調(diào)控高糖誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷

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【摘要】：目的研究細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1(apoptosis signal-regulating kinase1,ASK1)對高糖誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cell,RGC)損傷的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。方法建立大鼠RGC細(xì)胞的分離培養(yǎng)和體外高糖(50 mmol/L葡萄糖)損傷模型。轉(zhuǎn)染ASK1 siRNA沉默ASK1的表達(dá)。實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測ASK1 mRNA表達(dá)水平;Western blot檢測ASK1、JNK蛋白表達(dá)量和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平;MTT和CCK-8方法、Ki67染色分別檢測RGC生長活力和增殖情況;Annexin-V FITC/PI方法和TUNEL檢測RGC凋亡情況;試劑盒方法檢測Caspase-3活性。結(jié)果 RGC高糖環(huán)境下培養(yǎng)4d,細(xì)胞生長活力降低明顯(P0.05);ASK1表達(dá)水平在高糖損傷的RGC中明顯上升(P0.05);ASK1 siRNA的轉(zhuǎn)染實驗結(jié)果顯示:ASK1的表達(dá)水平明顯下降(P0.05),說明沉默表達(dá)實驗成功;ASK1表達(dá)被抑制后RGC的生長活力(P0.05)和增殖能力(P0.05)明顯上升,RGC的凋亡(P0.01)和Caspase-3的活力(P0.01)明顯降低。沉默ASK1的表達(dá)有效地降低JNK蛋白的磷酸化水平。結(jié)論抑制ASK1的表達(dá)對RGC的高糖損傷有保護(hù)作用,其機(jī)制可能與抑制JNK通路有關(guān)。
【作者單位】： 西安市第四醫(yī)院眼科 陜西省眼科診療中心;
【分類號】：R587.2;R774.1
【正文快照】： 糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)是引起視力損傷和失明的主要因素,而糖尿病被認(rèn)為是引起DR的主要致病因素,這與引起的視網(wǎng)膜氧化應(yīng)激導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡有關(guān)[1]。作為糖尿病的最主要并發(fā)癥,目前尚沒有非常有效的治療方法。雖然對DR發(fā)病機(jī)制的研究主要集中于視網(wǎng)膜毛細(xì)

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