本文關(guān)鍵詞：miR-214在狼瘡性腎炎小鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖中的作用及其機制

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【摘要】：目的探討微小RNA-214(miR-214)在狼瘡性腎炎(LN)小鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖中的作用及其相關(guān)機制。方法將MRL-Faslpr/JNju小鼠(簡稱LN小鼠,20只)和野生型小鼠(20只)處死,分離、培養(yǎng)其腎小球系膜細(xì)胞;將LN小鼠腎小球系膜細(xì)胞隨機分為兩組,分別轉(zhuǎn)染miR-214 mimics(觀察組)和NC mimics control(對照組)。采用實時熒光定量PCR法檢測兩種小鼠及兩組腎小球系膜細(xì)胞miR-214相對表達量,采用MTT法檢測兩組轉(zhuǎn)染1、2、3天的細(xì)胞增殖抑制率。采用生物信息學(xué)方法預(yù)測細(xì)胞中miR-214的靶基因,并經(jīng)雙熒光素酶報告基因試驗驗證,YKL-40是miR-214的靶基因。采用實時熒光定量PCR法和Western blotting法檢測兩組YKL-40 mRNA及蛋白相對表達量。取對數(shù)生長期的LN小鼠腎小球系膜細(xì)胞,分別轉(zhuǎn)染si YKL-40和negative control,采用MTT法檢測轉(zhuǎn)染1、2、3天的細(xì)胞增殖抑制率。結(jié)果 LN小鼠和野生型小鼠腎小球系膜細(xì)胞miR-214相對表達量分別為0.35±0.09、1,兩者比較P0.01。觀察組和對照組miR-214相對表達量分別為85.54±12.07、1,兩組比較P0.01。觀察組轉(zhuǎn)染1、2、3天的細(xì)胞增殖抑制率均高于對照組(P0.05或0.01)。與對照組比較,觀察組YKL-40 mRNA及蛋白相對表達量均降低(P均0.05)。與轉(zhuǎn)染negative control比較,轉(zhuǎn)染si YKL-40的LN小鼠腎小球系膜細(xì)胞轉(zhuǎn)染1、2、3天的細(xì)胞增殖抑制率均升高(P0.05或0.01)。結(jié)論 LN小鼠腎小球系膜細(xì)胞中miR-214表達降低,上調(diào)miR-214表達可抑制其增殖;下調(diào)YKL-40表達可能是miR-214的作用機制。
【作者單位】： 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院;
【基金】：黑龍江省青年科學(xué)基金資助項目(QC2010094)
【分類號】：R593.242
【正文快照】： 腎小球系膜細(xì)胞過度增殖是狼瘡性腎炎(LN)的主要病變特點,過度增殖的系膜細(xì)胞可以釋放更多的炎癥因子,分泌細(xì)胞外基質(zhì),加劇炎癥和引起腎小球硬化。微小RNA分子(microRNAs)簡稱miRNAs,廣泛參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、腫瘤形成及損傷修復(fù)等生理病理過程[1,2]。研究發(fā)現(xiàn),LN組織中有

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本文編號：1172368