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MiR-210-3p在SLE、RA患者PBMCs中的表達(dá)及其與Th17細(xì)胞相關(guān)因子的關(guān)聯(lián)性研究

發(fā)布時(shí)間:2017-11-05 20:04

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【摘要】:研究背景微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)是一類由內(nèi)源性基因編碼的單鏈小分子RNA,通過降解靶m RNA或抑制蛋白質(zhì)的翻譯而調(diào)控基因表達(dá),從而參與個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞分化、凋亡等病理生理過程。在龐大的mi RNA家族中,mi RNA-210因其在低氧環(huán)境下的穩(wěn)定性和功能的多樣性,近年來引起了人們的廣泛關(guān)注。有研究表明,在缺氧的條件下,mi RNA-210在調(diào)節(jié)低氧誘導(dǎo)因子-1a(hypoxia inducing factor-1α,HIF-1α)的表達(dá)以及輔助性T細(xì)胞17(T helper cell 17,Th17)細(xì)胞的分化方面起著重要的作用,可能參與了免疫系統(tǒng)的發(fā)育以及功能。系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種多因素共同作用引起的自身免疫性炎癥性結(jié)締組織病,多發(fā)于育齡期女性,以大量自身抗體產(chǎn)生、補(bǔ)體激活、T細(xì)胞和B細(xì)胞功能紊亂以及導(dǎo)致組織和器官損傷的免疫復(fù)合物形成為特征。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)也是一種全身性自身免疫疾病,以慢性關(guān)節(jié)病變?yōu)橹?患者T細(xì)胞的活化在關(guān)節(jié)局部炎癥的發(fā)展和全身免疫反應(yīng)中起著很重要的作用。SLE、RA的發(fā)病機(jī)制尚不明了,但學(xué)術(shù)界一致認(rèn)為Th17與這兩種疾病之間有著密切的關(guān)系,而且在患者的相應(yīng)炎性部位都發(fā)現(xiàn)了低氧環(huán)境和低氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)的激活。之前的研究表明,Th17細(xì)胞通過其分泌的細(xì)胞因子以及與其他CD4+T細(xì)胞間相互調(diào)節(jié),影響著SLE和RA的發(fā)生、發(fā)展。機(jī)體發(fā)生炎癥時(shí),會(huì)出現(xiàn)低氧環(huán)境,此時(shí)HIF-1α常被“激活”以應(yīng)對(duì)低氧,而且HIF-1α自身也能調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞參與炎癥反應(yīng)。正常情況下,機(jī)體Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞處于一種平衡狀態(tài),而Th17/Treg平衡的失調(diào)在炎癥反應(yīng)和自身免疫性疾病等的過程中有重要的作用。已有證據(jù)顯示,HIF-1α是Th17細(xì)胞形成的重要參與者,并參與調(diào)節(jié)Th17/Treg的平衡。因此mi RNA-210可能通過調(diào)節(jié)HIF-1α的表達(dá)以及Th17細(xì)胞的分化參與SLE和RA的發(fā)病。目的通過比較SLE患者與對(duì)照、RA患者與對(duì)照的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中mi RNA-210-3p的表達(dá)量的差異,并分析患者mi RNA-210-3p表達(dá)量與其血漿中細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(interleukin,IL)17、IL-21、IL-22和HIF-1α表達(dá)量的相關(guān)性,來探索mi RNA-210-3p在SLE、RA中的可能發(fā)病機(jī)制,為SLE、RA等Th17相關(guān)自身免疫性疾病的治療提供可能的靶點(diǎn)。方法本研究采用實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-q PCR)方法檢測了35例SLE患者、38例RA患者和35例健康對(duì)照PBMCs中mi R-210-3p表達(dá)水平,用酶聯(lián)免疫吸附測定試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法測定了這些患者與對(duì)照血漿中IL-17、IL-21、IL-22和HIF-1α的水平。SLE和RA患者均選自安徽省立醫(yī)院風(fēng)濕免疫科和安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科門診和住院患者。健康對(duì)照均選自安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科健康體檢中心。SLE患者均符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(American College Rheumatology,ACR)修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)。RA患者均符合1987年ACR修訂的RA分類標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)研究對(duì)象知情同意后,用EDTA抗凝管抽取5 ml外周靜脈血的同時(shí),收集其一般情況資料和臨床實(shí)驗(yàn)室資料。資料的錄入使用Excel 2003,數(shù)據(jù)的分析使用SPSS 17.0。對(duì)正態(tài)分布資料使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)描述,對(duì)非正態(tài)分布資料使用中位數(shù)和四分位間距(Median(P25,P75))描述。兩組定量資料比較時(shí),正態(tài)分布資料使用t檢驗(yàn),非正態(tài)分布資料使用非參數(shù)Wilcoxon秩和檢驗(yàn),兩組定性資料比較時(shí),使用c2檢驗(yàn)。兩組間相關(guān)性分析時(shí),兩樣本均符合正態(tài)分布時(shí)使用Pearson相關(guān)性分析,至少有一組樣本為非正態(tài)分布時(shí)懫用Spearman,s相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果研究結(jié)果顯示mi R-210-3p在SLE患者PBMCs中表達(dá)水平高于健康對(duì)照組(Z=-3.377,P=0.001),在SLE患者胸膜炎陽性組的表達(dá)量高于胸膜炎陰性組(P=0.019)、抗SSB/La抗體陽性組的表達(dá)量低于抗SSB/La抗體陰性組(P=0.038)。RA患者組PBMCs中mi R-210-3p的相對(duì)表達(dá)量高于對(duì)照組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.226,P=0.220),在RA患者疾病活動(dòng)組的表達(dá)水平高于緩解組(Z=-3.116,P=0.002),且在RA患者中mi R-210-3p表達(dá)與IL-17(r=0.357,P=0.028)、IL-21(r=0.334,P=0.041)水平呈正相關(guān)。未發(fā)現(xiàn)SLE、RA患者mi R-210-3p表達(dá)與HIF-1α水平的相關(guān)性。結(jié)論本研究發(fā)現(xiàn)mi R-210-3p在SLE患者PBMCs中表達(dá)升高,提示mi R-210-3p可能與SLE發(fā)病有關(guān)。此外,mi R-210-3p在RA患者疾病活動(dòng)組的表達(dá)升高,且mi R-210-3p表達(dá)與IL-17、IL-21水平呈正相關(guān),提示mi R-210可能與RA疾病嚴(yán)重程度有關(guān),且可能通過調(diào)節(jié)某些Th17相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),參與RA的發(fā)病。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R593.241

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