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系統(tǒng)性紅斑狼瘡自噬相關(guān)miR-125b-5p下游靶基因研究與驗證

發(fā)布時間:2017-11-02 07:04

  本文關(guān)鍵詞:系統(tǒng)性紅斑狼瘡自噬相關(guān)miR-125b-5p下游靶基因研究與驗證


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【摘要】:[目的]研究擬驗證系統(tǒng)性紅斑狼瘡自噬相關(guān)miR-125b-5p下游靶基因UVRAG,為進(jìn)一步從自噬角度探討UVB照射誘發(fā)SLE的病理機制奠定基礎(chǔ)。[方法]首先采用化學(xué)合成的miR-125b-5p模擬物miR-mimic及競爭性抑制分子miR-inhibitor (miR-control)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,qRT-PCR和Western-Blot方法驗證miR-125b-5p對待測靶基因UVRAG轉(zhuǎn)錄及翻譯水平影響。其次采用3'UTR報告基因方法,構(gòu)建雙熒光素酶報告基因質(zhì)粒以及靶位點突變質(zhì)粒,與miR-mimic共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,通過螢火蟲/海腎螢光素酶的活性分析,驗證miR-125b-5p對疑似靶基因UVRAG 3' UTR的調(diào)控作用。[結(jié)果]qRT-PCR顯示:miR-125b-5p模擬物組中UVRAG mRNA的水平較抑制劑組明顯下降(P0.05); Western blotting顯示:miR-125b-5p模擬物組UVRAG蛋白的表達(dá)較抑制劑組下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);雙熒光素酶報告載體實驗顯示:模擬物組的相對熒光比值較抑制物組下調(diào),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]UVRAG為系統(tǒng)性紅斑狼瘡自噬相關(guān)miR-125b-5p的下游靶基因,miR-125b-5p可能與UVB誘發(fā)SLE的異常自噬相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:系統(tǒng)性紅斑狼瘡 miRNAs miR-125b-5p 自噬
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R593.241
【目錄】:
  • 縮略詞表(以字母順序排列)5-6
  • 中文摘要6-7
  • 英文摘要7-9
  • 前言9-14
  • 材料與方法14-23
  • 結(jié)果23-30
  • 討論30-34
  • 結(jié)論34-35
  • 展望35-36
  • 參考文獻(xiàn)36-40
  • 綜述40-47
  • 參考文獻(xiàn)44-47
  • 攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果47-48
  • 致謝48

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本文編號:1130460

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