本文關(guān)鍵詞：利用偽無菌小鼠研究腸道菌群在茶多酚減肥中的作用

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【摘要】：腸道菌群與宿主肥胖密切相關(guān),宿主肥胖又會引起低度慢性炎癥、引發(fā)高血壓、高血脂等相關(guān)心腦血管疾病。偽無菌小鼠動物模型是研究腸道菌群與肥胖及其他相關(guān)疾病關(guān)系的有利“工具”。20只8周齡C57BL/6J雄性小鼠給予抗生素混合物飲水,剔除大部分腸道微生物模擬無菌動物。隨機分成兩組:對照組(pgf CK)和高脂組(pgf HF),分別飼喂常規(guī)純化飼料與高脂純化飼料8周。以20只SPF級小鼠作對照,分為spf CK和spf HF組,分別飼喂常規(guī)純化飼料與高脂純化飼料8周。常規(guī)方法測定小鼠體重、血清中血糖、血脂指標(biāo)、胰島素水平,HE染色做小鼠附睪脂肪切片,利用Image-Pro Plus 6.0圖像處理軟件計算脂肪細(xì)胞面積、長徑、短徑。結(jié)果表明,與spf HF組小鼠相比,pgf HF組偽無菌小鼠的體重、脂肪墊、腎周脂重量顯著低于spf HF組小鼠(P0.001);胰島素水平、脂肪細(xì)胞大小也顯著低于spf HF組小鼠(P0.01),pgf HF組偽無菌小鼠出現(xiàn)低體重低脂肪的表型,與無菌小鼠動物模型特征一致。因此本課題采用抗生素處理建立偽無菌小鼠動物模型來預(yù)示無菌小鼠試驗的結(jié)果,進(jìn)一步研究偽無菌小鼠和SPF小鼠對茶多酚減肥作用的響應(yīng)差異。利用茶多酚飼喂肥胖的SPF級小鼠和偽無菌小鼠,常規(guī)方法測定小鼠體重、血糖。采集小鼠的血清用放射性免疫技術(shù)和酶聯(lián)免疫法測定血脂指標(biāo)、胰島素水平、炎癥水平;HE染色做小鼠附睪脂肪切片,利用Image-Pro Plus 6.0圖像處理軟件計算脂肪細(xì)胞面積、長徑、短徑。結(jié)果顯示,0.8%茶多酚對SPF與偽無菌小鼠體重分別減輕7.7%和7.6%,1.6%茶多酚可減輕SPF與偽無菌小鼠體重分別達(dá)8.6%和10.8%。茶多酚干預(yù)后,肥胖的SPF小鼠與偽無菌小鼠空腹血糖極顯著下降(P0.01),SPF級肥胖小鼠總膽固醇降低7.7%、甘油三酯含量降低26.51%,高密度脂蛋白膽固醇升高10.08%,而茶多酚對偽無菌小鼠甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇含量無顯著影響。茶多酚顯著抑制SPF級小鼠的脂肪細(xì)胞膨大(P0.01),脂肪組織形態(tài)接近于對照組。偽無菌小鼠的脂肪細(xì)胞面積、長徑、短徑均極顯著大于SPF級小鼠(P0.001),脂肪細(xì)胞膨大現(xiàn)象未得到改善。高脂飲食誘導(dǎo)SPF與偽無菌小鼠體內(nèi)促炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α水平升高、抗炎癥因子IL-10水平下降;茶多酚干預(yù)后,SPF與偽無菌小鼠體內(nèi)炎癥得到改善,與茶多酚有劑量依賴關(guān)系。炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α水平下降、IL-10水平上升;并且偽無菌小鼠體內(nèi)IL-1、IL-6水平略低于SPF小鼠,IL-10水平較SPF小鼠略高。高脂飲食后,SPF小鼠腸道厚壁菌門、放線菌門、變形菌門的細(xì)菌豐度顯著高于spf CK組。茶多酚干預(yù)后,放線菌門細(xì)菌豐度下降,厚壁菌門/擬桿菌門的細(xì)菌豐度比值降低�？股靥幚砗�,偽無菌小鼠腸道菌群多樣性降低,并且大量定植了疣微菌門的細(xì)菌,高脂飲食還引起腸桿菌、普氏菌的豐度提高、乳桿菌豐度下降等;經(jīng)過茶多酚調(diào)控,菌群結(jié)構(gòu)得到調(diào)整,阿克曼菌、乳桿菌豐度上升,腸桿菌、普氏菌豐度下降甚至消失。本研究結(jié)果表明,茶多酚可以控制SPF小鼠與偽無菌小鼠的體重增加、降低空腹血糖水平、提高胰島素敏感性、抑制脂肪累積還可以降低體內(nèi)炎癥水平;但是偽無菌小鼠與SPF小鼠對茶多酚減肥作用的響應(yīng)具有明顯差異。高脂飲食導(dǎo)致小鼠腸道菌群紊亂,茶多酚調(diào)控后得到改善。即便偽無菌小鼠減肥效果不及SPF小鼠,但是經(jīng)過茶多酚調(diào)控的偽無菌小鼠較單純攝取高脂飲食的偽無菌小鼠體重、炎癥水平等均有所改善。說明腸道菌群是茶多酚發(fā)揮減肥作用的關(guān)鍵因素。
【關(guān)鍵詞】：肥胖 腸道菌群 抗生素 茶多酚 炎癥水平
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R589.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-12
• 1 前言12-19
• 1.1 腸道菌群與肥胖13-16
• 1.1.1 飲食改變腸道菌群結(jié)構(gòu)13-14
• 1.1.2 腸道菌群影響肥胖14-15
• 1.1.3 腸道菌群引發(fā)炎癥反應(yīng)15-16
• 1.2 偽無菌小鼠動物模型16
• 1.3 茶多酚干預(yù)肥胖16-17
• 1.4 實驗主要內(nèi)容與技術(shù)路線17-19
• 2 材料與方法19-23
• 2.1 材料19-20
• 2.1.1 實驗動物19
• 2.1.2 動物飼料19
• 2.1.3 主要試劑與藥品19-20
• 2.1.4 主要儀器與設(shè)備20
• 2.2 實驗方法20-23
• 2.2.1 偽無菌肥胖小鼠模型構(gòu)建與分組20-21
• 2.2.2 SPF級肥胖小鼠模型構(gòu)建與分組21
• 2.2.3 空腹血糖檢測21
• 2.2.4 口服葡萄糖耐量實驗21
• 2.2.5 胰島素、血脂指標(biāo)檢測21
• 2.2.6 病理切片的制備和脂肪細(xì)胞面積測量21-22
• 2.2.7 小鼠腸道微生物多樣性分析22-23
• 2.2.7.1 小鼠糞便DNA提取22
• 2.2.7.2 小鼠糞便DNA的干燥22-23
• 2.2.7.3 小鼠糞便DNA宏基因組測序23
• 2.2.8 統(tǒng)計學(xué)分析23
• 3 結(jié)果與分析23-54
• 3.1 肥胖小鼠模型建立23-27
• 3.1.1 高脂飲食誘導(dǎo)小鼠體重增加23-24
• 3.1.2 高脂飲食誘導(dǎo)小鼠脂肪累積24-25
• 3.1.3 高脂飲食誘導(dǎo)小鼠血糖、血脂變化25-26
• 3.1.4 高脂飲食誘導(dǎo)小鼠胰島素變化26
• 3.1.5 高脂飲食誘導(dǎo)小鼠脂肪組織形態(tài)變化26-27
• 3.1.5.1 高脂飲食對偽無菌與SPF級小鼠脂肪組織形態(tài)的影響26
• 3.1.5.2 高脂飲食對偽無菌與SPF級小鼠脂肪細(xì)胞大小的影響26-27
• 3.2 茶多酚對SPF級小鼠的減肥效果27-36
• 3.2.1 茶多酚控制SPF小鼠體重27-29
• 3.2.2 茶多酚改善SPF小鼠糖耐量29
• 3.2.3 茶多酚改善SPF小鼠血脂水平29-30
• 3.2.4 茶多酚提高SPF小鼠胰島素敏感性30-31
• 3.2.5 茶多酚抑制SPF小鼠脂肪累積31-32
• 3.2.5.1 茶多酚對SPF小鼠脂肪重量的影響31-32
• 3.2.5.2 茶多酚對SPF小鼠脂肪細(xì)胞形態(tài)的影響32
• 3.2.6 茶多酚對SPF小鼠結(jié)腸盲腸發(fā)育的影響32-34
• 3.2.7 茶多酚對SPF小鼠肝臟細(xì)胞形態(tài)的影響34-35
• 3.2.8 茶多酚降低SPF小鼠炎癥水平35-36
• 3.3 茶多酚對偽無菌小鼠的減肥效果36-44
• 3.3.1 茶多酚控制偽無菌小鼠體重36
• 3.3.2 茶多酚改善偽無菌小鼠糖耐量36-37
• 3.3.3 茶多酚改善偽無菌小鼠血脂水平37
• 3.3.4 茶多酚提高偽無菌小鼠胰島素敏感性37-38
• 3.3.5 茶多酚抑制偽無菌小鼠脂肪累積38-40
• 3.3.5.1 茶多酚對偽無菌小鼠脂肪重量的影響38-39
• 3.3.5.2 茶多酚對偽無菌小鼠脂肪細(xì)胞形態(tài)的影響39-40
• 3.3.6 茶多酚對偽無菌小鼠結(jié)腸盲腸發(fā)育的影響40-42
• 3.3.7 茶多酚對偽無菌小鼠肝臟細(xì)胞形態(tài)的影響42
• 3.3.8 茶多酚降低偽無菌小鼠炎癥水平42-44
• 3.4 偽無菌小鼠和SPF小鼠對茶多酚的響應(yīng)差異44-54
• 3.4.1 脂肪重量差異44
• 3.4.2 肝臟重量差異44-45
• 3.4.3 結(jié)腸、盲腸重量差異45-46
• 3.4.4 脂肪細(xì)胞長徑、短徑、面積大小差異46-47
• 3.4.5 偽無菌和SPF小鼠炎癥水平差異47-49
• 3.4.6 SPF小鼠腸道菌群門水平豐度變化49-50
• 3.4.7 偽無菌小鼠腸道菌群門水平豐度變化50
• 3.4.8 SPF小鼠腸道菌群屬水平豐度變化50-52
• 3.4.9 偽無菌小鼠腸道菌群屬水平豐度變化52-54
• 4 討論與結(jié)論54-65
• 4.1 討論54-63
• 4.1.1 SPF小鼠肥胖模型建立54-55
• 4.1.2 偽無菌小鼠肥胖模型建立55-57
• 4.1.3 偽無菌與SPF小鼠對茶多酚的響應(yīng)差異57-59
• 4.1.4 茶多酚干預(yù)對小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響59-63
• 4.2 結(jié)論63-64
• 4.3 創(chuàng)新之處64
• 4.4 展望64-65
• 致謝65-66
• 參考文獻(xiàn)66-75
• 附錄75-76

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：1125358