本文關(guān)鍵詞：硫化氫通過抑制p38MAPK通路和壞死性凋亡的相互作用對(duì)抗高糖引起的H9C2心肌細(xì)胞損傷和炎癥

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【摘要】：【目的】探討外源性硫化氫(H2S)能否通過抑制p38絲裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)通路和壞死性凋亡的相互作用對(duì)抗高糖引起的H9C2心肌細(xì)胞損傷和炎癥�！痉椒ā坎捎眉�(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒8(CCK-8)檢測(cè)心肌細(xì)胞的存活率;ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中白介素-1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的水平;蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western Blot)測(cè)定p38MAPK和RIP3蛋白(反映壞死性凋亡的指標(biāo))的蛋白水平;雙氯熒光素染色熒光顯微鏡照相測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平;羅丹明123染色熒光顯微鏡照相測(cè)定線粒體膜電位(MMP)�！窘Y(jié)果】H9C2心肌細(xì)胞經(jīng)35 mmol/L葡萄糖(高糖,HG)作用24 h,胞內(nèi)RIP3的蛋白水平明顯增加,應(yīng)用3μmol/L SB203580(p38 MAPK抑制劑)預(yù)處理心肌細(xì)胞60 min能明顯地抑制HG對(duì)RIP3蛋白水平的上調(diào)作用;另一方面,HG可上調(diào)磷酸化(p)p38 MAPK的蛋白水平,應(yīng)用100μmol/L necrostatin-1(Nec-1,壞死性凋亡的特異性抑制劑)共處理心肌細(xì)胞24 h能阻斷HG對(duì)p-p38 MAPK蛋白水平的上調(diào)作用;而400μmol/L Na HS(為H2S的供體)預(yù)處理心肌細(xì)胞30 min能同時(shí)抑制HG對(duì)RIP3和p-p38 MAPK蛋白水平的上調(diào)作用。此外,400μmol/L Na HS、3μmol/L SB203580預(yù)處理或100μmol/L Nec-1共處理心肌細(xì)胞均可抑制HG引起的心肌細(xì)胞毒性、氧化應(yīng)激、線粒體損傷和炎癥反應(yīng),使細(xì)胞存活率升高,ROS生成、MMP丟失及IL-1β和TNF-ɑ的分泌水平減少。【結(jié)論】抑制p38 MAPK通路和壞死性凋亡的相互作用可能是外源性H2S對(duì)抗高糖引起的H9c2心肌細(xì)胞損傷和炎癥的重要作用機(jī)制之一。
【作者單位】： 廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院心血管內(nèi)科//廣州市番禺區(qū)心血管疾病研究所;中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院黃埔院區(qū)兒科;中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院黃埔院區(qū)心血管內(nèi)科;中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 硫化氫 p絲裂原激活蛋白激酶 壞死性凋亡 相互作用 高糖 心肌細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81270296) 番禺區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015-Z03-57)
【分類號(hào)】：R587.2;R542.2
【正文快照】： 細(xì)胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)是一個(gè)主動(dòng)的、由基因決定的自動(dòng)結(jié)束生命的過程。PCD在糖尿病的心血管并發(fā)癥如糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)的發(fā)生和發(fā)展中起關(guān)鍵性啟動(dòng)作用[1]。壞死性凋亡(necroptosis)有獨(dú)特的信號(hào)通路,由死亡誘導(dǎo)因子如腫瘤壞死

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本文編號(hào)：1066165