本文關(guān)鍵詞：經(jīng)尿道灌注干細(xì)胞白血病基因慢病毒轉(zhuǎn)染豚鼠糖尿病膀胱病變的效果研究

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【摘要】：目的制備糖尿病膀胱病變(DCP)豚鼠模型,經(jīng)尿道灌注干細(xì)胞白血病(SCL)基因慢病毒,觀察其轉(zhuǎn)染效果及穩(wěn)定性。方法 2014年11月—2015年6月,采用隨機(jī)數(shù)字表法在75只普通級荷蘭種雄性豚鼠中選取60只單次腹腔注射鏈脲佐菌素(200 mg/kg),常規(guī)飼養(yǎng)6周后按血糖水平11.1 mmol/L篩選糖尿病模型,再常規(guī)飼養(yǎng)4周后通過尿流動力學(xué)檢測儀篩選DCP模型;另15只作為對照組,單次注射配制的鏈脲佐菌素緩沖液,飼養(yǎng)時間相同。采用隨機(jī)數(shù)字表法從成功造模的DCP模型中選取15只后,再采用隨機(jī)數(shù)字表法分為Ⅰ組(3只)和實(shí)驗(yàn)組(12只),Ⅰ組不予處理,實(shí)驗(yàn)組經(jīng)尿道分2次灌注SCL基因慢病毒(1.6×10~7TU),于2次灌注結(jié)束后第2、7、14、28天分別采用頸椎脫臼法處死實(shí)驗(yàn)組豚鼠3只,記為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組,Ⅰ組與Ⅱ組一同處死,取膀胱組織冷凍于液氮中,甘油封固后激光共聚焦顯微鏡下觀察組織中綠色熒光分布情況。采用qRT-PCR檢測SCL mRNA表達(dá)水平。結(jié)果 DCP模型造模過程中,糖尿病模型篩選時棄去18只,尿流動力學(xué)檢測儀篩選時棄去19只,最終得到DCP模型豚鼠23只,記為DCP模型組。DCP模型組豚鼠最大逼尿肌壓低于對照組,最大膀胱容量大于對照組(P0.01)。Ⅰ組豚鼠膀胱組織未見綠色熒光分布,Ⅱ組豚鼠膀胱組織綠色熒光不明顯,Ⅲ組豚鼠膀胱組織可見全層遍布極強(qiáng)綠色熒光,Ⅳ組豚鼠膀胱組織可見全層強(qiáng)綠色熒光,Ⅴ組豚鼠膀胱組織仍可見綠色熒光存在。Ⅰ組豚鼠膀胱組織SCL mRNA表達(dá)水平為(1.00±0.00),Ⅱ組豚鼠膀胱組織SCL mRNA表達(dá)水平是Ⅰ組的(1.22±0.06)倍,Ⅲ組豚鼠膀胱組織SCL mRNA表達(dá)水平是Ⅰ組的(50.45±3.17)倍,Ⅳ組豚鼠膀胱組織SCL mRNA表達(dá)水平是Ⅰ組的(24.75±6.49)倍,Ⅴ組豚鼠膀胱組織SCL mRNA表達(dá)水平是Ⅰ組的(3.27±1.00)倍。結(jié)論 SCL基因慢病毒載體轉(zhuǎn)染豚鼠DCP膀胱成功,并能穩(wěn)定表達(dá),有可能為DCP的臨床治療帶來新的研究方式。
【作者單位】： 河南省南陽市第二人民醫(yī)院小兒外科;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】： 糖尿病并發(fā)癥 膀胱疾病 慢病毒感染 干細(xì)胞白血病
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81360120)
【分類號】：R587.2;R694
【正文快照】： Effect of SCL Lentivirus Transfection Through Perfusing Diabetic Cystopathy of Bladder in Guinea Pig Models WEIYan-qing,MA Lu-ping,WANG Jiang-ping,QIAN Biao,WANG Qin-zhang.Department of Pediatric Surgery,NanyangSecond People's Hospital,Nanyang 473000,Chi

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本文編號：1062868