本文關(guān)鍵詞：不同前列腺癌細(xì)胞株Talin-1表達(dá)情況和侵襲能力關(guān)系研究

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【摘要】：第一部分不同前列腺癌細(xì)胞株之間Talin-1表達(dá)情況和侵襲能力關(guān)系目的:通過體外培養(yǎng)不同來源人前列腺癌細(xì)胞株(DU-145、PC-3、LNCa P)及人正常前列腺細(xì)胞株,檢測Talin-1在各細(xì)胞株中的表達(dá)差異及各細(xì)胞株侵襲和遷移能力,探討Talin-1與不同來源人前列腺癌細(xì)胞侵襲及遷移的關(guān)系。方法:體外培養(yǎng)人前列腺癌細(xì)胞株(DU-145、PC-3、LNCa P細(xì)胞株)及人正常前列腺細(xì)胞株,傳代培養(yǎng)至對數(shù)生長期,利用RT-PCR技術(shù)檢測各細(xì)胞株中Talin-1的m RNA表達(dá)水平,Western-blot技術(shù)檢測各細(xì)胞株中Talin-1的蛋白表達(dá)水平,Transwell侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測各細(xì)胞株侵襲及遷移能力,MTT法檢測各細(xì)胞株增殖能力。結(jié)果:與正常人前列腺細(xì)胞株相比,在前列腺癌LNCa P細(xì)胞株、PC-3細(xì)胞株、DU145細(xì)胞株中的Talin-1m RNA、蛋白表達(dá)水平有差異(P0.05);其中DU-145、PC-3、LNCa P細(xì)胞株中的Talin-1m RNA以及蛋白表達(dá)水平依次遞減,組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與正常人前列腺細(xì)胞株相比,在LNCa P細(xì)胞株、PC-3細(xì)胞株、DU145細(xì)胞株的侵襲和遷移能力明顯增高(P0.05),其中DU-145、PC-3、LNCa P細(xì)胞株中的遷移、增殖以及侵襲能力依次遞減,組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1、不同來源的人前列腺癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力不同;2、不同來源的人前列腺癌細(xì)胞株中的Talin-1的表達(dá)水平不同;3、Talin-1與前列腺癌的侵襲和遷移能力相關(guān);4、低表達(dá)Talin-1的前列腺癌的侵襲和遷移能力低,惡性度低,高表達(dá)Talin-1的前列腺癌的侵襲和遷移強(qiáng),惡性度高;5、Talin-1可作為前列腺癌惡性度的預(yù)測指標(biāo)之一。第二部分沉默Talin-1基因?qū)η傲邢侔㏄C-3細(xì)胞株表達(dá)和侵襲能力的影響目的:針對前列腺癌PC-3細(xì)胞中異常表達(dá)的Talin-1基因進(jìn)行沉默,探討沉默Talin-1基因后前列腺癌細(xì)胞株的侵襲及遷移能力變化,探討Talin-1作為靶基因進(jìn)行特異性干擾的可行性。方法:利用RNAi方法,以Talin-1基因?yàn)橹委煱悬c(diǎn)針對前列腺癌PC-3細(xì)胞中的Talin-1基因進(jìn)行基因沉默,同時(shí)選取PC-3空白對照組,基因沉默組、基因沉默后加入轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)組,PC-3加入TGF-β組,利用Western-blot技術(shù)檢測各細(xì)胞株中E-cadherin以及Vimentin的蛋白表達(dá)水平,Transwell侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測各細(xì)胞株侵襲及遷移能力,MTT法檢測各細(xì)胞株增殖能力。結(jié)果:基因沉默后,PC-3+TGF-β、PC-3、PC-3+TGF-β+RNAi、PC-3+RNAi 4組中E-cadherin蛋白表達(dá)水平依次遞增,Vimentin蛋白表達(dá)水平依次遞減以及侵襲、增殖和遷移能力依次遞減,4組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:沉默Talin-1基因后前列腺癌PC-3細(xì)胞系的增長速度減慢,腫瘤的侵襲和遷移能力下降,其可能機(jī)制是通過升高E-cadherin蛋白表達(dá)以及降低Vimentin蛋白表達(dá)從而誘發(fā)EMT表型轉(zhuǎn)化而實(shí)現(xiàn)的,本試驗(yàn)可能為后續(xù)的以Talin-1為靶點(diǎn)的前列腺癌基因治療體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-15
• 參考文獻(xiàn)12-15
• 第一部分 不同前列腺癌細(xì)胞株Talin-1 表達(dá)情況和侵襲能力關(guān)系15-36
• 1 材料和方法15-28
• 2 結(jié)果28-33
• 3 討論33-35
• 4 參考文獻(xiàn)35-36
• 第二部分 沉默Talin-1 基因?qū)η傲邢侔㏄C-3 細(xì)胞株表達(dá)和侵襲能力的影響36-47
• 1 材料和方法37-38
• 2 結(jié)果38-43
• 3 討論43-46
• 4 參考文獻(xiàn)46-47
• 全文小結(jié)47-48
• 綜述48-55
• 參考文獻(xiàn)53-55
• 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 陳衛(wèi);蘇踴躍;梁光萍;陳建;張曼輝;羅向東;;人β1整合素近端和遠(yuǎn)端啟動(dòng)子報(bào)告基因載體的構(gòu)建和鑒定及啟動(dòng)活性分析[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2007年02期

2 祁靜;朱人敏;周航波;張敏;;Ezrin和CD44v6在胃癌中的表達(dá)及臨床意義[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2008年07期

3 羅勇;賀大林;寧亮;;多種轉(zhuǎn)移潛能不同的人前列腺癌細(xì)胞“上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化態(tài)”特性鑒定及其意義[J];中華男科學(xué)雜志;2006年08期

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本文編號：951136