本文關(guān)鍵詞：miR-33b在前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用

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【摘要】：在世界范圍內(nèi),前列腺癌(PCa)是男性第二高發(fā)癌癥,也是男性第五大致死癌癥。約90%的腫瘤致死病例都是由于腫瘤轉(zhuǎn)移造成的,而轉(zhuǎn)移也是前列腺癌的主要致死原因,一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移預(yù)后很差。盡管很多研究都成功地揭示了一些特異性調(diào)控因子在前列腺癌細(xì)胞遷移和侵襲過(guò)程中的作用,但前列腺癌轉(zhuǎn)移發(fā)生的原因和機(jī)制至今仍然不是很清楚。據(jù)報(bào)道,除了一些經(jīng)典的調(diào)控因子,micro RNA(miRNA)能夠在表觀水平調(diào)控前列腺癌的轉(zhuǎn)移過(guò)程。MiRNA是一類(lèi)內(nèi)生的含有19至25個(gè)核苷酸的非編碼RNA,能夠在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn),在人類(lèi)全基因組中,miRNA所調(diào)控的編碼基因大約占總數(shù)的1/3,并且已發(fā)現(xiàn)的miRNA中有大約一半定位在腫瘤相關(guān)的基因脆性位點(diǎn),表明miRNA在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。本課題探討了miR-33b對(duì)前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響。通過(guò)檢測(cè)不同遷移能力的前列腺癌2B4和IE8細(xì)胞中miR-33b雙臂表達(dá)水平,我們發(fā)現(xiàn)miR-33b的表達(dá)水平與前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力負(fù)相關(guān),提示miR-33b可能抑制前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。體外劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)證明,過(guò)表達(dá)miR-33b對(duì)前列腺癌細(xì)胞遷移和侵襲具有抑制作用。此外,本研究還發(fā)現(xiàn)在前列腺癌LNCap、2B4和IE8細(xì)胞中,miR-33b-3p的表達(dá)遠(yuǎn)高于miR-33b-5p,表明在前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中miR-33b-3p可能發(fā)揮作用。本研究利用生物信息學(xué)方法分別預(yù)測(cè)并篩選出miR-33b-5p和miR-33b-3p與轉(zhuǎn)移相關(guān)的靶基因。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR確認(rèn)過(guò)表達(dá)miR-33b能夠下調(diào)SALL4、DOCK4的表達(dá),雙熒光素酶報(bào)告分析證實(shí)miR-33b-5p靶向SALL4而miR-33b-3p靶向DOCK4。以上結(jié)果說(shuō)明miR-33b可能是通過(guò)調(diào)控SALL4和DOCK4的表達(dá)來(lái)抑制前列腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。因此,本研究發(fā)現(xiàn)miR-33b抑制前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。在前列腺癌細(xì)胞中,以miR-33b-3p表達(dá)為主,miR-33b-3p的抗轉(zhuǎn)移作用可能為前列腺癌的臨床治療提供新的方案。
【關(guān)鍵詞】：miR-33b 前列腺癌 轉(zhuǎn)移 侵襲
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.25
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-22
• 1.1 課題背景及研究的目的和意義9
• 1.2 前列腺癌9-14
• 1.2.1 前列腺癌的發(fā)展現(xiàn)狀及趨勢(shì)9-12
• 1.2.2 前列腺癌的診斷與治療12-14
• 1.3 腫瘤轉(zhuǎn)移14-16
• 1.3.1 腫瘤轉(zhuǎn)移簡(jiǎn)介14-15
• 1.3.2 惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的研究現(xiàn)狀15-16
• 1.4 MiRNA16-20
• 1.4.1 MiRNA簡(jiǎn)介16-18
• 1.4.2 MiRNA與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展18-19
• 1.4.3 MiR-33研究進(jìn)展19-20
• 1.5 本課題的主要研究?jī)?nèi)容和意義20-22
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法22-38
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料22-23
• 2.1.1 細(xì)胞系22
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑22-23
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器23-24
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法24-38
• 2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理24-26
• 2.3.2 實(shí)時(shí)定量PCR26-29
• 2.3.3 重組質(zhì)粒構(gòu)建相關(guān)操作29-36
• 2.3.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)移相關(guān)實(shí)驗(yàn)36-37
• 2.3.5 生物信息分析方法37-38
• 第3章 MiR-33b對(duì)前列腺癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響38-48
• 3.1 引言38
• 3.2 前列腺癌細(xì)胞中miR-33b雙臂表達(dá)水平38-40
• 3.3 不同轉(zhuǎn)移能力的前列腺癌細(xì)胞中miR-33b的相對(duì)表達(dá)水平40
• 3.4 構(gòu)建miR-33b過(guò)表達(dá)載體40-42
• 3.5 過(guò)表達(dá)miR-33b對(duì)轉(zhuǎn)移性前列腺癌細(xì)胞系轉(zhuǎn)移能力的影響42-46
• 3.5.1 劃痕實(shí)驗(yàn)42-44
• 3.5.2 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)44-45
• 3.5.3 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)45-46
• 3.6 本章小結(jié)46-48
• 第4章 MiR-33b靶基因預(yù)測(cè)和驗(yàn)證48-56
• 4.1 引言48-49
• 4.2 MiR-33b靶基因預(yù)測(cè)49-51
• 4.3 MiR-33b靶基因驗(yàn)證51-55
• 4.3.1 MiR-33b-5p靶向SALL451-53
• 4.3.2 MiR-33b-3p靶向DOCK453-54
• 4.3.3 MiR-33b-3p可能靶向AR54-55
• 4.4 本章小結(jié)55-56
• 結(jié)論56
• 展望56-57
• 參考文獻(xiàn)57-62
• 英文縮略語(yǔ)對(duì)照62-64
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及其它成果64-66
• 致謝66

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本文編號(hào)：947320