發(fā)布時間：2017-09-26 23:28

  本文關鍵詞：血管緊張素Ⅱ誘導腎小管上皮細胞Nlrp3活化與內質網應激的關系研究

  更多相關文章： Ang Ⅱ Nlrp3 炎性體 內質網應激

【摘要】：目的：腎小管間質炎癥(tubulointerstitial inflammation, TⅡ)貫穿于整個腎臟纖維化過程,同時也是導致腎臟纖維化形成的關鍵因素。近年來研究證實,血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)在腎小管間質炎癥中發(fā)揮著重要作用,但其具體機制尚未闡明。本實驗旨在探討AngⅡ對腎小管上皮細胞炎性體Nlrp3活化的影響以及其與內質網應激的關系,以進一步闡明AngⅡ在腎小管間質炎癥形成中的作用機制。方法：體外細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)人腎近端小管上皮細胞(human proximal tubular epithelial cell line,HK-2),并用不同濃度(OnM、1000nM、100nM、10nM)血管緊張素Ⅱ予以刺激,于不同時間點(0,6,12,24hr)收集細胞,通過real time RT-PCR、Western blotting檢測炎性體相關標志物Nlrp3,ASC, caspase-1, IL-lbeta,IL-18及內質網應激相關標志物GRP78、p-eIF2α的基因和蛋白水平表達；激光共聚焦顯微鏡檢測HK-2胞漿內的Nlrp3、ASC表達及其共定位；使用血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB),觀察AngⅡ刺激后HK-2細胞中炎性體和內質網應激相關標志物的基因和蛋白表達情況；使用內質網應激抑制劑(4-PBA),觀察AngⅡ刺激后HK-2細胞中炎性體和內質網應激相關標志物的基因和蛋白表達情況。結果：血管緊張素Ⅱ刺激HK-2細胞后,發(fā)現(xiàn)不同濃度(OnM、1000nM、100nM、10nM)和不同時間(0,6,12,24hr)刺激下,Nlrp3,ASC,caspase-1,IL-lbeta, IL-18,GRP78, p-eIF2a基因和蛋白表達水平均顯著升高(p0.05),且在100nM AngⅡ刺激12h時達到高峰。而使用ARB干預后,Nlrp3,ASC,caspase-1,IL-lbeta, IL-18,GRP78,p-eIF2a基因和蛋白表達水平較AngⅡ干預組顯著下降(p分別0.05),激光共聚焦顯微鏡結果顯示,100nMAngII刺激12h時HK-2胞漿內的Nlrp3、ASC表達上調,并在胞膜周圍共表達,而ARB干預后兩者的表達水平減弱。最后使用4-PBA干預后,Nlrp3,ASC, caspase-1,IL-1beta,IL-18,GRP78,p-eIF2a基因和蛋白表達水平較AngⅡ干預組顯著下降(p分別0.05)。結論：本研究表明, AngⅡ能夠通過引起內質網應激而誘導腎小管上皮細胞炎性體Nlrp3活化,從而介導腎小管間質炎癥的發(fā)生。
【關鍵詞】：Ang Ⅱ Nlrp3 炎性體 內質網應激
【學位授予單位】：東南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R692
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 主要縮略語注釋表(Abbreviations)9-13
• 前言13-15
• 文獻綜述15-24
• 實驗材料與方法24-40
• 1 實驗材料24-26
• 2 實驗方法26-39
• 3 統(tǒng)計學方法39-40
• 研究結果40-49
• 討論49-51
• 結論51-52
• 參考文獻52-58
• 致謝58-59
• 作者簡介59

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3 朱加明;丁小強;張曉麗;劉春鳳;;己糖胺通路活化介導腎小管上皮細胞表型和功能的改變[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術年會論文集[C];2006年

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本文編號：926367