本文關(guān)鍵詞：MiR-429及其目標(biāo)基因HSPA4L在弱精癥低活力精子中的表達(dá)

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【摘要】：目的探討miR-429及其目標(biāo)基因熱休克蛋白A4L(HSPA4L)在弱精癥患者低活力精子中的表達(dá)。方法收集20份成年健康生育能力的精液標(biāo)本和20份弱精癥患者精液標(biāo)本,按照WHO第五版規(guī)定的精液分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),對(duì)液化后的精液進(jìn)行常規(guī)參數(shù)分析;利用qRT-PCR檢測(cè)精子中miR-429的表達(dá)水平;通過(guò)生物信息學(xué)手法預(yù)測(cè)miR-429的靶點(diǎn);構(gòu)建HSPA4L3′UTR雙螢光素酶報(bào)告載體,采用雙螢光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-429的靶基因;利用qRT-PCR和Western blot分別檢測(cè)HSPA4L mRNA和蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果弱精癥精子活力低于健康對(duì)照組,同時(shí)miR-429在弱精癥精子中表達(dá)上調(diào)。通過(guò)生物信息學(xué)手法、雙螢光素酶報(bào)告基因基檢測(cè)以及轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)miR-429通過(guò)作用于HSPA4L3′UTR來(lái)抑制HSPA4L mRNA和蛋白的表達(dá)。進(jìn)一步的qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)弱精癥組的HSPA4L mRNA和蛋白的表達(dá)水平下調(diào),并且HSPA4L mRNA表達(dá)水平與miR-429的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.725,P0.05)。結(jié)論 MiR-429在低活力精子中的表達(dá)上調(diào),可能通過(guò)調(diào)控HSPA4L基因來(lái)影響精子的活力。
【作者單位】： 桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： MiR- HSPAL 弱精癥 精子 精子活力 精子活性
【分類號(hào)】：R698.2
【正文快照】： 弱精癥是指精液中前向運(yùn)動(dòng)(PR)的精子百分率低于32%的病癥,這種病癥是男子不育的主要原因之一[1-4]。精子是高度分化的細(xì)胞,但是近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)精子中含有一定量的非編碼RNA,這些RNA在精子的運(yùn)動(dòng)、獲能、受精和胚胎發(fā)育等過(guò)程中起著非常重要的作用[5-6]。微小RNA(microRNA,miR

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本文編號(hào)：924005