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應(yīng)用甲基化基因檢測技術(shù)分析前列腺癌中HIC1的甲基化狀態(tài)

發(fā)布時間:2017-09-25 07:16

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【摘要】:背景與目的:癌高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)因表觀遺傳甲基化修飾導致其在多種癌細胞和組織中表達沉默,可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。而這一現(xiàn)象在前列腺癌研究中的報道甚少。該研究采用甲基化基因檢測技術(shù)對前列腺癌中HIC1啟動子進行甲基化狀態(tài)分析。方法:采用甲基化特異性聚合酶鏈式反應(yīng)(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)和亞硫酸鹽測序PCR(bisulfate sequencing PCR,BSP)技術(shù),對前列腺癌細胞PC3、C4-2B和正常前列腺上皮細胞Pr EC,以及前列腺癌組織標本和正常前列腺穿刺標本,進行HIC1啟動子甲基化分析;并使用去DNA甲基化酶5-Aza-Cd R處理PC3、C4-2B和Pr EC,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)分析HIC1在基因水平和蛋白質(zhì)水平上的變化。結(jié)果:MSP分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),在PC3、C4-2B和Pr EC中HIC1甲基化率分別為78.23%、72.15%和10.63%,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。對36例人前列腺癌實體瘤和36例人前列腺正常穿刺組織進行BSP測序,統(tǒng)計顯示,甲基化率分別是80.30%和31.56%。5-Aza-Cd R處理后的PC3、C4-2B和Pr EC經(jīng)RT-PCR和Western blot分析發(fā)現(xiàn),與未處理對照相比,HIC1轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平表達均顯著上調(diào)。結(jié)論:在前列腺癌中,抑癌基因HIC1啟動子呈高度甲基化狀態(tài)并出現(xiàn)表達沉默或下調(diào),可作為前列腺癌的早期預測指標和潛在的治療靶點。
【作者單位】: 復旦大學附屬公共衛(wèi)生臨床中心醫(yī)學檢驗科;上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院南院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】甲基化特異性PCR 亞硫酸鹽測序PCR 前列腺癌 癌高甲基化基因 甲基化
【基金】:上海市自然科學基金面上項目(13ZR1435000) 上海市科委2014年“科技創(chuàng)新行動計劃”實驗動物研究領(lǐng)域科技支撐重點項目(14140901400) 國家自然科學基金面上項目(81372318) 上海市教委科研創(chuàng)新項目(13YZ049) 上海市衛(wèi)生局科研課題項目(20124309)
【分類號】:R737.25;R730.43
【正文快照】: 近年來,我國前列腺癌的發(fā)病率逐年上升,已躍居男性泌尿生殖系腫瘤的第3位[1],但前列腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的作用機制尚不清楚[2-3]。癌高甲基化基因1(hypermethylatedin cancer 1,HIC1)是一種抑癌基因[4]。目前研究表明,在多數(shù)腫瘤中,HIC1經(jīng)常高甲基化,提高了甲基化轉(zhuǎn)移酶的活性,以至

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;研究人員發(fā)現(xiàn)抑癌基因HIC1調(diào)控前列腺癌的作用機制[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2013年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鄭江花;王景龍;郝e,

本文編號:916066


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