本文關(guān)鍵詞：ERβ真核表達(dá)質(zhì)粒對前列腺癌LNCaP細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及p38信號通路的作用

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【摘要】：目的 探討雌激素受體β(ERβ)真核表達(dá)質(zhì)粒對前列腺癌LNCa P細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,以及p38信號通路在其中的作用。方法 實驗分為4組:空白對照組,未加入任何處理因素;陰性對照組,轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒p CDNA-3.1;p CDNA-3.1-ERβ組(ERβ組),轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒p CDNA-3.1-ERβ;p CDNA-3.1-ERβ+p38抑制劑SB203580組(ERβ+SB203580組),轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒p CDNA-3.1-ERβ的LNCa P細(xì)胞中加入10μmol/L的p38信號通路抑制劑SB203580,作用48 h。Western blot檢測各組p38蛋白活化以及cyclin D1、Bcl-2和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞檢測細(xì)胞周期和凋亡;應(yīng)用軟瓊脂集落形成實驗和細(xì)胞劃痕實驗檢測細(xì)胞的集落形成能力和細(xì)胞遷移能力;應(yīng)用Transwell侵襲實驗檢測細(xì)胞的侵襲能力。結(jié)果 酶切鑒定和測序分析表明完成了ERβ的擴(kuò)增和p CDNA-3.1-ERβ重組質(zhì)粒的構(gòu)建。Real-time PCR及Western blot結(jié)果顯示成功轉(zhuǎn)染并篩選出穩(wěn)定高表達(dá)ERβ的LNCa P細(xì)胞系。Western blot結(jié)果顯示4組p38總蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。磷酸化p38表達(dá)ERβ組最高、ERβ+SB203580組最低。ERβ+SB203580組cyclin D1、Bcl-2和MMP-2蛋白表達(dá)明顯高于其他3組,ERβ組最低。流式細(xì)胞周期檢測結(jié)果顯示G0/G1期細(xì)胞比例ERβ組最高、ERβ+SB203580組最低。流式細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果顯示細(xì)胞凋亡率ERβ組最高、ERβ+SB203580組最低。軟瓊脂集落形成實驗結(jié)果顯示集落數(shù)ERβ+SB203580組最多,ERβ組最少。劃痕實驗結(jié)果顯示細(xì)胞遷移率ERβ+SB203580組最高,ERβ組最低。Transwell侵襲實驗結(jié)果顯示穿膜細(xì)胞數(shù)ERβ+SB203580組最多,ERβ組最少。結(jié)論 ERβ可通過激活p38信號通路抑制前列腺癌LNCa P細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。
【作者單位】： 三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院湖北省宜昌市中心人民醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】： 前列腺癌 雌激素受體β 真核表達(dá) 生物學(xué)行為
【正文快照】： 前列腺癌(prostate cancer,PCa)是中老年男性最常見的惡性腫瘤之一,在西方國家PCa是男性第二大惡性腫瘤,在中國PCa的發(fā)病率低于西方國家。然而,近20年來,我國人民生活水平的提高、平均壽命的延長以及人口老齡化,PCa的發(fā)病率也呈現(xiàn)逐年上升趨勢[1]。目前對于侵襲性PCa以及復(fù)發(fā)P

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本文編號：879457