本文關(guān)鍵詞：ERβ真核表達(dá)質(zhì)粒對(duì)前列腺癌LNCaP細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及p38信號(hào)通路的作用

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【摘要】：目的 探討雌激素受體β(ERβ)真核表達(dá)質(zhì)粒對(duì)前列腺癌LNCa P細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,以及p38信號(hào)通路在其中的作用。方法 實(shí)驗(yàn)分為4組:空白對(duì)照組,未加入任何處理因素;陰性對(duì)照組,轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒p CDNA-3.1;p CDNA-3.1-ERβ組(ERβ組),轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒p CDNA-3.1-ERβ;p CDNA-3.1-ERβ+p38抑制劑SB203580組(ERβ+SB203580組),轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒p CDNA-3.1-ERβ的LNCa P細(xì)胞中加入10μmol/L的p38信號(hào)通路抑制劑SB203580,作用48 h。Western blot檢測(cè)各組p38蛋白活化以及cyclin D1、Bcl-2和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表達(dá);應(yīng)用流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡;應(yīng)用軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的集落形成能力和細(xì)胞遷移能力;應(yīng)用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力。結(jié)果 酶切鑒定和測(cè)序分析表明完成了ERβ的擴(kuò)增和p CDNA-3.1-ERβ重組質(zhì)粒的構(gòu)建。Real-time PCR及Western blot結(jié)果顯示成功轉(zhuǎn)染并篩選出穩(wěn)定高表達(dá)ERβ的LNCa P細(xì)胞系。Western blot結(jié)果顯示4組p38總蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。磷酸化p38表達(dá)ERβ組最高、ERβ+SB203580組最低。ERβ+SB203580組cyclin D1、Bcl-2和MMP-2蛋白表達(dá)明顯高于其他3組,ERβ組最低。流式細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果顯示G0/G1期細(xì)胞比例ERβ組最高、ERβ+SB203580組最低。流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞凋亡率ERβ組最高、ERβ+SB203580組最低。軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示集落數(shù)ERβ+SB203580組最多,ERβ組最少。劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示細(xì)胞遷移率ERβ+SB203580組最高,ERβ組最低。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示穿膜細(xì)胞數(shù)ERβ+SB203580組最多,ERβ組最少。結(jié)論 ERβ可通過(guò)激活p38信號(hào)通路抑制前列腺癌LNCa P細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。
【作者單位】： 三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院湖北省宜昌市中心人民醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】： 前列腺癌 雌激素受體β 真核表達(dá) 生物學(xué)行為
【正文快照】： 前列腺癌(prostate cancer,PCa)是中老年男性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在西方國(guó)家PCa是男性第二大惡性腫瘤,在中國(guó)PCa的發(fā)病率低于西方國(guó)家。然而,近20年來(lái),我國(guó)人民生活水平的提高、平均壽命的延長(zhǎng)以及人口老齡化,PCa的發(fā)病率也呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)[1]。目前對(duì)于侵襲性PCa以及復(fù)發(fā)P

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10 李林;;利用小分子探針研究經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告七[C];2014年

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2 記者 劉海英;英發(fā)現(xiàn)細(xì)胞信號(hào)通路新“剎車”蛋白[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

3 衣曉峰　陳英云 記者 李麗云;結(jié)腸癌發(fā)生中新的信號(hào)通路找到[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

4 記者 許琦敏;減肥信號(hào)受控于腦中“通訊員”[N];文匯報(bào);2008年

5 記者 劉海英;一種蛋白決定人的抗壓能力[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

6 通訊員 喬蕤琳 記者 衣曉峰 聶松義;癌癥中小分子和微小核苷酸有關(guān)聯(lián)[N];健康報(bào);2012年

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7 路康;STAT3信號(hào)通路介導(dǎo)CLL和MCL發(fā)生組蛋白去乙�；敢种苿┠退幍臋C(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

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4 努爾古麗·蘇里坦;mir-260和mir-240調(diào)控錢蟲壽命的研究[D];華中師范大學(xué);2015年

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6 楊瑩瑩;microRNA-203通過(guò)APC介導(dǎo)活化Wnt/β-catenin信號(hào)通路在佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞中的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

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