本文關(guān)鍵詞：巨噬細(xì)胞對(duì)腎小管上皮細(xì)胞—磷酸鈣晶體體系中Fetuin A表達(dá)的調(diào)控作用

  更多相關(guān)文章： 腎小管上皮細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 磷酸鈣晶體 共培養(yǎng) 胎球蛋白A 炎癥反應(yīng)

【摘要】：目的：探討巨噬細(xì)胞對(duì)腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)-磷酸鈣晶體體系中胎球蛋白A表達(dá)的調(diào)控作用及體系中胎球蛋白A-高遷移率族蛋白B1(HMGB1)間的關(guān)系。方法：實(shí)驗(yàn)分為兩部分,第一部分,細(xì)胞分為A、B、C、三組,A組：?jiǎn)为?dú)培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞；B組：腎小管上皮細(xì)胞+磷酸鈣晶體(100ug/ml);C組：腎小管上皮細(xì)胞+磷酸鈣晶體(100ug/ml)+巨噬細(xì)胞；C組利用Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)建立巨噬細(xì)胞-磷酸鈣晶體-腎小管上皮細(xì)胞體外共培養(yǎng)體系。各組分別于6h、9h、12h后,在相差顯微鏡下對(duì)各組腎小管上皮細(xì)胞的形態(tài)變化進(jìn)行觀察；隨后收集腎小管上皮細(xì)胞,將所收集的腎小管上皮細(xì)胞用于提取總RNA,分別檢測(cè)各組細(xì)胞中的胎球蛋白A的表達(dá)水平；將各組細(xì)胞培養(yǎng)液離心后收集上清,檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中的MCP-1水平。第二部分實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞分為D、E、F、三組,D組：?jiǎn)为?dú)培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)；E組：腎小管上皮細(xì)胞+磷酸鈣晶體(HK-2+CaP);F組：腎小管上皮細(xì)胞+磷酸鈣晶體(100ug/ml)+HMGBl (HK-2+CaP+HMGB1), F組中,將不同濃度的IHMGB1 (Ong/ml、500ng/ml、1000ng/ml、2000ng/ml)對(duì)腎小管上皮細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)刺激,24h后通過(guò)RT-PCR技術(shù)檢測(cè)腎小管上皮細(xì)胞中胎球蛋白A的表達(dá)水平。結(jié)果：各組中,經(jīng)過(guò)磷酸鈣刺激后的腎小管上皮細(xì)胞較正常對(duì)照組的腎小管上皮細(xì)胞在形態(tài)學(xué)上未見(jiàn)明顯差別。胎球蛋白A在A、B、C三組中的表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中B、C組中腎小管上皮細(xì)胞的胎球蛋白A表達(dá)量較A組中的低,C組的表達(dá)量較B組低；另外,腎小管上皮細(xì)胞-磷酸鈣晶體-巨噬細(xì)胞組中的MCP-1濃度明顯高于其他組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HMGB1刺激腎小管上皮細(xì)胞后,細(xì)胞中的胎球蛋白A表達(dá)上調(diào),且隨著所添加的HMGB1濃度的增加而呈現(xiàn)出增高的趨勢(shì),加入1000ng/ml及2000ng/ml組的胎球蛋白A表達(dá)量明顯高于對(duì)照組及500ng/ml組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),2000ng/ml組的表達(dá)量明顯高于其他組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：1.在共培養(yǎng)體系所模擬的體內(nèi)腎小管腔內(nèi)環(huán)境中,磷酸鈣晶體與腎小管上皮細(xì)胞的相互作用能夠誘使腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)炎癥反應(yīng)并釋放炎癥因子,使細(xì)胞內(nèi)的Fetuin-A表達(dá)下調(diào),這可能與其中的炎癥因子的調(diào)控相關(guān)；2.在共培養(yǎng)體系所模擬的體內(nèi)腎小管腔內(nèi)環(huán)境中,巨噬細(xì)胞對(duì)腎小管上皮細(xì)胞-磷酸鈣晶體體系中的細(xì)胞炎癥因子有顯著的調(diào)控作用,其調(diào)控的效果是使MCP-1等炎癥因子明顯上調(diào)表達(dá),胎球蛋白A下調(diào)表達(dá)；3.腎小管上皮細(xì)胞中胎球蛋白A的表達(dá)受到晚期炎癥因子HMGB1的調(diào)控,胎球蛋白A的表達(dá)可能在不同的炎癥反應(yīng)階段因炎癥因子的不同而有不同的調(diào)控機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：腎小管上皮細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 磷酸鈣晶體 共培養(yǎng) 胎球蛋白A 炎癥反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R692.4
【目錄】：

• 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
• 部分中英文對(duì)照表5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 一、實(shí)驗(yàn)對(duì)象、材料12-15
• 二、實(shí)驗(yàn)方法15-23
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-31
• 四、討論31-40
• 全文小結(jié)40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 綜述45-61
• 參考文獻(xiàn)55-61
• 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 鄧耀良;Randall斑的歷史、現(xiàn)狀和未來(lái)[J];廣西醫(yī)學(xué);2005年01期

2 歐陽(yáng)春,寧建平,周巧玲;單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎小管間質(zhì)MCP-1的表達(dá)及其意義[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年05期

3 李成文;孫光;鄧耀良;李盛寬;米華;劉德云;;草酸鈣晶體對(duì)大鼠腎小管上皮細(xì)胞損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2006年02期

4 王曉青;羅吉;陶婷;;老年男性血清胎球蛋白A水平及其影響因素[J];內(nèi)科理論與實(shí)踐;2009年05期

5 黎承楊;鄧耀良;孫丙華;關(guān)曉峰;;�；撬釋�(duì)大鼠草酸鈣結(jié)石腎臟的保護(hù)作用[J];中國(guó)病理生理雜志;2009年04期

6 孫麗娜;;VEGF、MCP-1、CTGF與糖尿病腎病關(guān)系的研究進(jìn)展[J];慢性病學(xué)雜志;2013年02期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 吳博;利用顯微技術(shù)對(duì)體外誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞與腎結(jié)石晶體相互作用的形態(tài)學(xué)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

2 黃鵬;磷酸鈣晶體誘導(dǎo)人巨噬細(xì)胞HMGB1表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

3 奉有才;探討胎球蛋白-A對(duì)磷酸鈣晶體誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)及釋放HMGB1的抑制作用[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：847832