本文關(guān)鍵詞：高糖通過下調(diào)腎小管上皮細(xì)胞PTEN表達(dá)促進(jìn)纖維化病變的機(jī)制及藥物干預(yù)研究

  更多相關(guān)文章： 腎小管上皮細(xì)胞 高糖 洛伐他汀 第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源基因(PTEN) p-Akt(Ser473) α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA) E-鈣黏素(E-cadherin)

【摘要】：目的:本研究旨在觀察高糖對(duì)腎小管上皮細(xì)胞PTEN和PI3K/Akt信號(hào)通路以及EMT相關(guān)指標(biāo)蛋白的表達(dá)變化的影響,同時(shí)進(jìn)一步探討洛伐他汀對(duì)高糖培養(yǎng)的腎小管上皮細(xì)胞中PTEN和PI3K/Akt信號(hào)通路表達(dá)變化的影響及在腎小管纖維化病變中的作用及可能機(jī)制。方法:培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK52E),應(yīng)用免疫酶細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)上皮細(xì)胞標(biāo)志性蛋白角蛋白CK-18、鈣黏蛋白(E-cadherin)和間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志性蛋白α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)鑒定所培養(yǎng)細(xì)胞;MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)洛伐他汀對(duì)NRK52E生長活性的影響。細(xì)胞傳代后隨機(jī)分三組:(1)正常糖(NG)對(duì)照組:2%FBS+DMEM(含糖5.5mmol/L)培養(yǎng);(2)高糖(HG)組:2%FBS+19.5mmol/L D-glucose+DMEM(含糖5.5mmol/L)培養(yǎng);(3)高糖+洛伐他汀(HR)組:2%FBS++19.5mmol/L D-glucose+DMEM(含糖5.5 mmol/L)+洛伐他汀(10u M)培養(yǎng),各組細(xì)胞分別培養(yǎng)2h,12h,24h和48h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)后收集蛋白和RNA進(jìn)行觀察;Western blotting檢測(cè)各組腎小管上皮細(xì)胞中PTEN、p-Akt(ser473)、E-cadherin、α-SMA和膠原蛋白Ⅳ(CollagenⅣ,Col-Ⅳ)蛋白表達(dá);Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)PTEN m RNA的表達(dá)。結(jié)果:(1)細(xì)胞鑒定結(jié)果顯示為腎小管上皮細(xì)。(2)MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示0-50u M濃度的洛伐他汀對(duì)細(xì)胞生長無明顯影響,根據(jù)參考文獻(xiàn)及MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果選定適合濃度(10u M)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)。(3)與NG組比較,HG處理12h、24h和48h時(shí)PTEN m RNA及蛋白表達(dá)明顯減少(P0.05),并隨HG處理時(shí)間的延長為進(jìn)行性減少,p-Akt(ser473)蛋白表達(dá)明顯增多(P0.05),E-cadherin蛋白表達(dá)減少(P0.05),α-SMA蛋白表達(dá)顯著增多(P0.05),Col-Ⅳ沉積增多;予以洛伐他汀干預(yù)后,與高糖組比較,洛伐他汀可上調(diào)PTEN m RNA及蛋白表達(dá)水平(P0.05),可下調(diào)p-Akt(ser473)、α-SMA、Col-Ⅳ蛋白表達(dá)水平(P0.05)。結(jié)論:高糖可誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生EMT,洛伐他汀對(duì)高糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞的EMT過程有明顯抑制作用,其作用機(jī)制可能與上調(diào)PTEN表達(dá),抑制Akt的活化,進(jìn)而阻斷PI3K/Akt信號(hào)通路有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：腎小管上皮細(xì)胞 高糖 洛伐他汀 第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源基因(PTEN) p-Akt(Ser473) α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA) E-鈣黏素(E-cadherin)
【學(xué)位授予單位】：貴陽醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 略縮詞表9-11
• 引言11-13
• 材料與方法13-24
• 結(jié)果24-33
• 討論33-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 綜述44-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 作者簡(jiǎn)歷52-53
• 致謝53-54
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集54

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 程悅;李芙蓉;袁發(fā)煥;;PTEN對(duì)大鼠腎成纖維細(xì)胞增殖能力的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2006年04期

2 方開云;石明雋;肖瑛;桂華珍;郭兵;張國忠;;小干擾RNA對(duì)高糖誘導(dǎo)大鼠腎小管上皮細(xì)胞Snail 1表達(dá)的抑制作用[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年02期

3 李霜;王圓圓;文箐潁;蘇博;肖瑛;石明雋;郭兵;;控制血糖對(duì)糖尿病大鼠腎PTEN表達(dá)及纖維化病變的影響[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年01期

4 程悅;李芙蓉;袁發(fā)煥;;PTEN編碼蛋白對(duì)TGF-β_1刺激大鼠腎成纖維細(xì)胞增殖的抑制作用[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年05期

5 王圓圓;劉瑞霞;郭兵;肖瑛;石明雋;皮明婧;文箐潁;張國忠;;丹芪合劑和依那普利對(duì)糖尿病大鼠腎組織PTEN的影響[J];時(shí)珍國醫(yī)國藥;2012年03期

6 姚穎;位紅蘭;劉麗麗;劉琳;白壽軍;李彩霞;羅云;曾銳;韓敏;葛樹旺;徐鋼;;Upregulated DJ-1 Promotes Renal Tubular EMT by Suppressing Cytoplasmic PTEN Expression and Akt Activation[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2011年04期

7 王圓圓;李霜;劉麗榮;蘇博;石磊;石明雋;肖瑛;張國忠;郭兵;;胰島素控制血糖對(duì)糖尿病大鼠腎組織Smad7表達(dá)及纖維化病變的影響[J];中國病理生理雜志;2013年01期

，

本文編號(hào)：843088