本文關(guān)鍵詞：前列環(huán)素衍生物對慢性腎衰大鼠腎臟局部RAS系統(tǒng)關(guān)鍵因子表達的影響

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【摘要】：目的:建立慢性腎衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠模型,研究前列環(huán)素(Prostacyclin,PGI2)衍生物對CRF大鼠腎臟局部腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system,RAS)系統(tǒng)關(guān)鍵因子血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)、血管緊張素(1-7)[Ang-(1-7)]、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)、血管緊張素Ⅱ 1型受體(AT1R)表達的影響,研究前列環(huán)素衍生物對CRF的可能保護機制。方法:行5/6腎切除建立大鼠CRF模型。將大鼠隨機分為假手術(shù)組即對照組、CRF模型組和前列環(huán)素衍生物治療組,每組均10只。5周后檢測各組大鼠血清肌酐(Serum creatinine,Scr)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN),并隨機取各組大鼠一只行腎臟組織病理切片染色觀察腎組織病理改變,判斷大鼠模型是否建立成功。治療組第5周開始給予前列環(huán)素衍生物貝前列腺素鈉(Beraprost sodium,BPS)0.6mg/kg/d,分兩次灌入,共4周。模型組和對照組大鼠給予等量蒸餾水。第9周時對全部大鼠進行處死。觀察以下指標:1.藥物干預(yù)前后大鼠24h尿蛋白總量、血肌酐、尿素氮值變化;2.三組大鼠腎組織蘇木精-伊紅(HE)染色法和馬松三色染色法(Masson)的病理表現(xiàn);3.實時熒光定量PCR(real-time RT-PCR,q RT-PCR)、.Western blot、免疫熒光檢測第9周時腎組織中ACE2、AT1m RNA及蛋白濃度變化;4.酶聯(lián)免疫法吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分別檢測第9周腎組織中Ang Ⅱ、Ang-(1-7)濃度及血清中5周、9周時ACE2、Ang Ⅱ、Ang(1-7)、AT1的濃度變化;結(jié)果:(1)動物模型的驗證:腎功能:模型組Scr、BUN顯著上升;24小時尿蛋白排泄量明顯升高;腎臟病理組織變化:腎小球系膜細胞肥厚,小管-間質(zhì)明顯纖維化伴炎癥細胞浸潤,可見蛋白管型。這些生化及腎臟病理均提示建模成功。經(jīng)過BPS治療4周后,治療組腎小球系膜細胞增生、腎小管-間質(zhì)纖維化、炎癥細胞浸潤程度較模型組均明顯減輕。(2)整個實驗期間,對照組24h尿蛋白、Scr、BUN均無明顯變化;與對照組相比,5周時模型組、治療組24h尿蛋白、Scr、BUN均增加(P0.05);與模型組(5周時)相比,9周時模型組Scr、BUN下降(P0.05),24小時尿蛋白總量上升(P0.05);治療組經(jīng)過BPS灌胃4周后(9周),與5周時治療組相比,24h尿蛋白下降(P0.05),而Scr、BUN水平未見明顯變化。(3)9周時腎組織實時熒光定量PCR(Real time RT-PCR,q RT-PCR)、Western blot,免疫熒光結(jié)果顯示:與對照組相比,模型組大鼠腎組織ACE2表達下調(diào)(P0.05),AT1表達上調(diào)(P0.05);與模型組相比,治療組ACE2表達上調(diào)(P0.05),AT1表達下調(diào)(P0.05)。(4)ELISA結(jié)果顯示:腎臟:與對照組相比,9周時模型組大鼠Ang Ⅱ濃度明顯增加(P0.01),Ang(1-7)濃度顯著下降(P0.01);與9周時模型組相比,9周時治療組Ang Ⅱ濃度減少(P0.05),Ang(1-7)濃度顯著增加(P0.01);血清:對照組、模型組5周、9周時組內(nèi)Ang Ⅱ、Ang(1-7)、ACE2、AT1濃度均無明顯變化(P0.05)。與對照組相比,5周時模型組、治療組大鼠Ang Ⅱ、AT1濃度增加(P0.05),Ang(1-7)、ACE2濃度下降(P0.05),其中模型組、治療組相比無明顯差異(P0.05);與5周時治療組相比,經(jīng)過BPS干預(yù)4周后(9周)治療組,Ang Ⅱ濃度減少(P0.05)、Ang(1-7)濃度增加(P0.05),而AT1、ACE2濃度未見明顯變化(P0.05);結(jié)論:前列環(huán)素衍生物能延緩CRF大鼠模型的病情進展,其機制可能通過調(diào)控腎臟局部RAS系統(tǒng)關(guān)鍵因子Ang Ⅱ、ACE2、Ang(1-7)、AT1起作用外,還可能通過減少尿蛋白來實現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：慢性腎衰竭 前列環(huán)素 AngⅡ Ang(1-7) ACE2 AT1
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R692.5
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-11
• 第1章 引言11-15
• 第2章 材料與方法15-28
• 2.1 材料15-17
• 2.1.1 實驗動物及飼養(yǎng)條件15
• 2.1.2 主要試劑和材料15-16
• 2.1.3 主要設(shè)備和儀器16-17
• 2.2 實驗方法17-27
• 2.2.1 慢性腎衰大鼠模型的建立及分組17
• 2.2.2 慢性腎衰大鼠模型成功標準及標本的收集與處理17-18
• 2.2.3 腎組織病理檢測18-19
• 2.2.4 免疫熒光檢測ACE2、AT1的表達19-20
• 2.2.5 實時熒光定量PCR檢測ACE2、AT1mRNA水平的表達20-22
• 2.2.6 Western Blot檢測ACE2、AT1蛋白表達22-26
• 2.2.7 酶聯(lián)免疫吸附檢測腎組織Ang Ⅱ、Ang（1-7）濃度及血清中ACE2、AT1、Ang（1-7）、AT1的濃度26-27
• 2.3 統(tǒng)計學處理27-28
• 第3章 結(jié)果28-38
• 3.1 生化指標檢測28-29
• 3.2 腎臟病理學改變29-30
• 3.3 免疫熒光檢測9周時腎組織ACE2、AT1蛋白的表達30-32
• 3.3.1 免疫熒光檢測9周時腎組織ACE2蛋白的表達30-31
• 3.3.2 免疫熒光檢測9周時腎組織AT1蛋白的表達31-32
• 3.4 Western-Blot檢測腎臟ACE2、AT1濃度的表達32-33
• 3.5 實時熒光定量PCR檢測腎臟ACE2、AT1mRNA表達的變化33-35
• 3.6 雙抗夾心ELISA法檢測腎組織Ang Ⅱ、Ang(1-7)的濃度和血清中Ang Ⅱ、Ang(1-7)、ACE2、AT1的濃度變化35-38
• 3.6.1 腎臟組織中Ang Ⅱ、Ang(1-7)的濃度變化35
• 3.6.2 血清中Ang Ⅱ、Ang(1-7)、ACE2、AT1的濃度變化35-38
• 第4章 討論38-43
• 第5章 結(jié)論與展望43-44
• 5.1 結(jié)論43
• 5.2 展望43-44
• 致謝44-45
• 參考文獻45-49
• 綜述49-55
• 參考文獻54-55

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1 肖衛(wèi)兵;吸入前列環(huán)素治療足月嬰兒難治性持續(xù)性肺動脈高壓[J];心血管病學進展;2003年05期

2 張孝亮;;前列環(huán)素對慢性阻塞性肺疾病患者療效的初步觀察[J];中國呼吸與危重監(jiān)護雜志;2009年05期

3 房文通;李宏建;周聊生;蘇樂群;;前列環(huán)素信號通路的研究進展[J];國際藥學研究雜志;2010年04期

4 Moncada S ,Vane JR ,段民江;前列環(huán)素與血凝[J];國外醫(yī)學.輸血及血液學分冊;1982年02期

5 可君;前列環(huán)素的作用及應(yīng)用[J];河南醫(yī)學院學報;1984年02期

6 郭忠武;;前列環(huán)素的研究進展[J];藥學情報通訊;1985年02期

7 周永昌;楊士紅;邱鶴庚;;前列環(huán)素的生理與臨床[J];北京第二醫(yī)學院學報;1986年03期

8 周喜民;;簡評《前列環(huán)素與臨床》[J];中國應(yīng)用生理學雜志;1987年02期

9 周喜民;;簡評《前列環(huán)素與臨床》[J];中國應(yīng)用生理學雜志;1987年03期

10 黃躍生;黎鰲;楊宗城;;血檢素和前列環(huán)素在肺疾病中的作用[J];國外醫(yī)學.呼吸系統(tǒng)分冊;1987年01期

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1 陳瑞蓮;劉健;黃傳兵;婗曦;汪元;張皖東;;新風膠囊對膝骨關(guān)節(jié)炎患者血流變指標及血栓素、前列環(huán)素的影響[A];中華中醫(yī)藥學會第十六屆全國風濕病學術(shù)大會論文集[C];2012年

2 安冬青;施建明;姚海洪;;天香丹對冠心病血管調(diào)節(jié)肽、血栓素A_2/前列環(huán)素影響的臨床與實驗研究[A];第三屆心臟學會、第六屆心功能學會及心功能雜志創(chuàng)刊10周年學術(shù)會議論文摘要[C];1996年

3 衛(wèi)路奎;高應(yīng);;沙棘油對大鼠體內(nèi)血栓素和前列環(huán)素代謝影響[A];中國營養(yǎng)學會第三屆老年營養(yǎng)暨第二屆營養(yǎng)與腫瘤學術(shù)會議論文摘要匯編[C];1994年

4 廖偉;廖永玲;施守義;;血脂康對血脂及血漿內(nèi)皮素、血栓烷B_2、6-酮前列環(huán)素水平的影響[A];江西省第三次中西醫(yī)結(jié)合心血管學術(shù)交流會論文集[C];2006年

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1 蔣鑫;吸入伊洛前列環(huán)素在先天性心臟病合并肺動脈高壓患者術(shù)中的應(yīng)用研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

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1 周紅霞;前列環(huán)素衍生物對慢性腎衰大鼠腎臟局部RAS系統(tǒng)關(guān)鍵因子表達的影響[D];南昌大學;2016年

2 孟濤;益心膠囊對實驗性大鼠慢性心肌缺血模型血漿及心肌組織前列環(huán)素含量的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學;2004年

3 劉賓;前列環(huán)素對原代培養(yǎng)的背根神經(jīng)節(jié)細胞作用的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學;2014年

4 沈芹;前列環(huán)素在慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中的表達及其在香煙提取物誘導的內(nèi)皮細胞凋亡中的保護作用[D];中南大學;2009年

5 劉志武;霧化吸入前列環(huán)素治療犬油酸型ARDS的研究[D];青島大學;2005年

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本文編號：782354