本文關(guān)鍵詞：hTERT基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)在腎癌中的研究

  更多相關(guān)文章： 腎癌 人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶 甲基化 尿沉渣 焦磷酸測序

【摘要】：背景人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶活化過程中的限速酶,而端粒酶的活性與大多數(shù)惡性腫瘤的發(fā)生有關(guān),這其中也包括腎癌。相關(guān)文獻(xiàn)證明在多種惡性腫瘤中hTERT基因啟動子區(qū)的高甲基化與端粒酶的表達(dá)有密切關(guān)系。腎癌的發(fā)生也與hTERT基因啟動子區(qū)異常甲基化有關(guān)。腎癌是成人中常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率呈逐年上升趨勢。早期局限于腎包膜的腎癌手術(shù)治療預(yù)后較好,但腎癌缺乏明確的腫瘤特異性標(biāo)志物來早期診斷,因此研究新型無創(chuàng)性診斷方法從而及早進(jìn)行診療具有較高的臨床意義。許多腫瘤相關(guān)基因在腎癌患者組織細(xì)胞以及尿沉渣中的甲基化已被證實有意義,這對于腎癌的診斷與發(fā)生機制有重要意義。目的研究腎癌組織和尿沉渣中hTERT啟動子區(qū)甲基化位點,尋找對于腎癌診斷有意義的高甲基化位點,并探究檢測腎癌患者尿沉渣中hTERT啟動子區(qū)甲基化對于腎癌診斷的可行性。方法查找文獻(xiàn)尋找腫瘤相關(guān)hTERT啟動子區(qū)高甲基化可疑位點,已知文獻(xiàn)甲基化引物兩組(M-250、U-250及M-600、U-600)以及應(yīng)用甲基化引物設(shè)計軟件設(shè)計甲基化引物1組(M-300、U-300)。收集76位腎癌患者(腎癌組)手術(shù)前晨尿標(biāo)本及其中28例腎癌腫瘤組織、28例腎癌癌旁正常組織,38例非腎癌患者(對照組)術(shù)前晨尿標(biāo)本。應(yīng)用甲基化特異性PCR (methylation specific PCR, MSP)檢測尿沉渣中hTERT基因甲基化狀態(tài),分析證明對于腎癌診斷有意義的hTERT啟動子區(qū)高甲基化位點及其甲基化結(jié)果與臨床指標(biāo)相關(guān)性；應(yīng)用焦磷酸測序法檢測腎癌組織與腎癌癌旁正常組織中hTERT基因啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài),尋找有意義的甲基化位點。結(jié)果1.hTERT啟動子區(qū)引物M-250、U-250及M-600、U-600在腎癌組與對照組尿沉渣中甲基化率無統(tǒng)計學(xué)差異。引物M-300、U-300在腎癌組與對照組的尿沉渣中甲基化率有統(tǒng)計學(xué)差異。2.通過腎癌組尿沉渣的甲基化狀態(tài)與臨床資料分析,得出性別、年齡、腫瘤TNM分期以及腫瘤的大小與hTERT基因甲基化無統(tǒng)計學(xué)意義,即上述各因素與hTERT基因高甲基化無關(guān)。3.焦磷酸測序定量的證明腎癌組織中hTERT甲基化率高于癌旁正常組織,甲基化特異性PCR定性的證明腎癌組尿沉渣中hTERT高甲基化率高于對照組尿沉渣,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論1.明確了hTERT啟動子區(qū)高甲基化在腎癌患者的術(shù)前尿沉渣及腎癌組織中存在,其甲基化狀態(tài)與年齡、性別、腫瘤TNM分期以及腫瘤的大小無關(guān)；2.證明尿沉渣中hTERT甲基化檢測作為一種無創(chuàng)性檢測方法有助于腎癌臨床標(biāo)志物的研究。
【關(guān)鍵詞】：腎癌 人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶 甲基化 尿沉渣 焦磷酸測序
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號說明11-12
• 前言12-15
• 實驗材料與方法15-25
• 結(jié)果25-27
• 討論27-30
• 結(jié)論30-31
• 附圖表31-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 綜述37-51
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文52-53
• 學(xué)位論文評閱及答辯情況表53

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：721556