本文關鍵詞：hTERT基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)在腎癌中的研究

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【摘要】：背景人端粒酶逆轉錄酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶活化過程中的限速酶,而端粒酶的活性與大多數惡性腫瘤的發(fā)生有關,這其中也包括腎癌。相關文獻證明在多種惡性腫瘤中hTERT基因啟動子區(qū)的高甲基化與端粒酶的表達有密切關系。腎癌的發(fā)生也與hTERT基因啟動子區(qū)異常甲基化有關。腎癌是成人中常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率呈逐年上升趨勢。早期局限于腎包膜的腎癌手術治療預后較好,但腎癌缺乏明確的腫瘤特異性標志物來早期診斷,因此研究新型無創(chuàng)性診斷方法從而及早進行診療具有較高的臨床意義。許多腫瘤相關基因在腎癌患者組織細胞以及尿沉渣中的甲基化已被證實有意義,這對于腎癌的診斷與發(fā)生機制有重要意義。目的研究腎癌組織和尿沉渣中hTERT啟動子區(qū)甲基化位點,尋找對于腎癌診斷有意義的高甲基化位點,并探究檢測腎癌患者尿沉渣中hTERT啟動子區(qū)甲基化對于腎癌診斷的可行性。方法查找文獻尋找腫瘤相關hTERT啟動子區(qū)高甲基化可疑位點,已知文獻甲基化引物兩組(M-250、U-250及M-600、U-600)以及應用甲基化引物設計軟件設計甲基化引物1組(M-300、U-300)。收集76位腎癌患者(腎癌組)手術前晨尿標本及其中28例腎癌腫瘤組織、28例腎癌癌旁正常組織,38例非腎癌患者(對照組)術前晨尿標本。應用甲基化特異性PCR (methylation specific PCR, MSP)檢測尿沉渣中hTERT基因甲基化狀態(tài),分析證明對于腎癌診斷有意義的hTERT啟動子區(qū)高甲基化位點及其甲基化結果與臨床指標相關性；應用焦磷酸測序法檢測腎癌組織與腎癌癌旁正常組織中hTERT基因啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài),尋找有意義的甲基化位點。結果1.hTERT啟動子區(qū)引物M-250、U-250及M-600、U-600在腎癌組與對照組尿沉渣中甲基化率無統(tǒng)計學差異。引物M-300、U-300在腎癌組與對照組的尿沉渣中甲基化率有統(tǒng)計學差異。2.通過腎癌組尿沉渣的甲基化狀態(tài)與臨床資料分析,得出性別、年齡、腫瘤TNM分期以及腫瘤的大小與hTERT基因甲基化無統(tǒng)計學意義,即上述各因素與hTERT基因高甲基化無關。3.焦磷酸測序定量的證明腎癌組織中hTERT甲基化率高于癌旁正常組織,甲基化特異性PCR定性的證明腎癌組尿沉渣中hTERT高甲基化率高于對照組尿沉渣,差異有統(tǒng)計學意義。結論1.明確了hTERT啟動子區(qū)高甲基化在腎癌患者的術前尿沉渣及腎癌組織中存在,其甲基化狀態(tài)與年齡、性別、腫瘤TNM分期以及腫瘤的大小無關；2.證明尿沉渣中hTERT甲基化檢測作為一種無創(chuàng)性檢測方法有助于腎癌臨床標志物的研究。
【關鍵詞】：腎癌 人端粒酶逆轉錄酶 甲基化 尿沉渣 焦磷酸測序
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號說明11-12
• 前言12-15
• 實驗材料與方法15-25
• 結果25-27
• 討論27-30
• 結論30-31
• 附圖表31-34
• 參考文獻34-37
• 綜述37-51
• 參考文獻45-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文52-53
• 學位論文評閱及答辯情況表53

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1 程永波;房殿春;;hTERT基因啟動子區(qū)甲基化的研究進展[J];臨床腫瘤學雜志;2012年04期

2 石東文;代飛;池君;陳希煒;賀偉峰;胡曉紅;羅高興;吳軍;;hTERT基因轉染顯著延長人骨髓間充質干細胞增殖能力的實驗研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2007年16期

3 李熙鴻;王曉陽;熊珍玉;劉柏林;張燕;;hTERT基因表達上調與兒童急性淋巴細胞白血病髓系抗原表達的關系[J];四川大學學報(醫(yī)學版);2006年03期

4 馬剛,高勁松,仝明,熊金光,何蘊韶,戎鐵華;支氣管肺泡灌洗液脫落細胞端粒酶hTERT基因表達的檢測[J];癌癥;2002年05期

5 謝金衛(wèi);周俊梅;杜貽鵬;陳展輝;盧長娣;陶莎;周俊宜;;端粒酶活性及其hTERT基因在增生性組織中的表達[J];實用醫(yī)學雜志;2006年07期

6 張青峰;張芳婷;申慧芳;高書穎;;攜帶hTERT基因的重組慢病毒載體的構建及鑒定[J];遵義醫(yī)學院學報;2014年02期

7 陳宇;張禪那;范婧堯;米雪楠;劉繼斌;惠汝太;張偉麗;;hTERT基因啟動子區(qū)單體型遺傳變異對轉錄活性影響的研究[J];中國分子心臟病學雜志;2012年03期

8 梁光萍,羅向東,楊宗城,陳建,蘇踴躍,劉月明;hTERT基因轉染對人胚胎成纖維細胞表型的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2003年19期

9 伍冬梅;李春鳴;張峗;;胃癌組織中hTERT基因表達及意義[J];山東醫(yī)藥;2011年07期

10 劉官智;伍津津;朱堂友;;hTERT基因永生化人毛乳頭細胞系的生物學特征[J];中國皮膚性病學雜志;2009年08期

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1 高書穎;于潔;;攜帶hTERT基因的重組慢病毒載體的構建及鑒定[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術大會論文摘要集[C];2011年

2 李恭會;成晟;周酉楓;陳昭典;;RNA干擾技術靶向hTERT基因抗前列腺癌的研究[A];2005年浙江省男科學學術會議論文匯編[C];2005年

3 梁光萍;羅向東;陳渝;齊潔;楊宗城;;hTERT基因熒光真核表達載體的構建及在人成纖維細胞中的表達[A];全國燒傷早期處理專題研討會論文集[C];2002年

4 卞卡;成詩銀;崔鵬程;;hTERT基因啟動子調控靶向自殺基因治療喉癌的研究[A];中華醫(yī)學會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學術會議論文匯編（上）[C];2007年

5 徐偉來;金潔;錢文斌;陸瀅;佟紅艷;;hTERT基因在骨髓增生異常綜合征中的表達及其在As_2O_3誘導MUTZ-1細胞凋亡中的作用研究[A];第10屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2005年

6 劉官智;伍津津;朱堂友;魯元剛;楊亞東;楊桂紅;;hTERT基因轉染致人毛乳頭細胞永生化的研究[A];第六屆全國燒傷救治專題研討會論文匯編[C];2009年

7 劉曉明;張麗娟;林熙然;;hTERT基因反義表達質粒的構建及其在舌鱗癌Tca8113細胞中表達的研究[A];2002中國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2002年

8 程文;高建平;張征宇;葛京平;位志峰;;聯(lián)合RNA干擾hTR及hTERT基因對膀胱尿路上皮癌BIU-87細胞株端粒酶活性影響的研究[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

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1 徐偉來;hTERT基因在骨髓增生異常綜合征中的表達及其在三氧化二砷誘導MUTZ-1細胞凋亡中的作用研究[D];浙江大學;2005年

2 金玲;慢病毒載體介導hTERT基因修飾的人羊膜上皮細胞重建角膜表層的實驗研究[D];暨南大學;2009年

3 羅yN;沉默hTERT基因表達對不同p53狀態(tài)卵巢癌細胞生長及凋亡的快速影響[D];重慶醫(yī)科大學;2009年

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1 任洪波;hTERT基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)在腎癌中的研究[D];山東大學;2015年

2 張誠;電穿孔法轉染hTERT基因至脂肪來源干細胞增強其增殖能力的研究[D];復旦大學;2009年

3 管曉梅;水牛胎兒成纖維細胞轉染hTERT基因及其核移植效果的研究[D];廣西大學;2014年

4 鄔佩云;MicroRNA調控鼻咽癌hTERT基因表達的實驗研究[D];中南大學;2007年

5 王海斌;口腔頜面部肉瘤中hTERT基因、C-myc和Ki-67的表達及其生物學意義[D];鄭州大學;2003年

6 郝海龍;膀胱移行細胞癌患者外周血hTERT基因檢測及意義[D];山西醫(yī)科大學;2004年

7 張拓;轉hTERT基因的牛胎兒成纖維細胞作為SCNT核供體的研究[D];西北農林科技大學;2009年

8 孫蓬明;卵巢惡性腫瘤細胞端粒酶表達和hTERT基因、C-myc基因調控的研究[D];福建醫(yī)科大學;2002年

9 景抗震;聯(lián)合RNA干擾hTR及hTERT基因對膀胱尿路上皮癌BIU-87細胞株端粒酶活性抑制的研究[D];第二軍醫(yī)大學;2007年

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