本文關鍵詞：基質(zhì)-Gla蛋白對草酸鈣晶體滯留的作用及機制研究

  更多相關文章： 草酸鈣結(jié)石 動物模型 華法林 晶體滯留 MGP(Macrix-Gla protein)

【摘要】：目的：采用單一乙二醇誘導SD大鼠建立草酸鈣晶體動物模型；華法林失活MGP類蛋白,探討MGP類蛋白對大鼠草酸鈣晶體滯留的影響及機制。方法： SD雄性大鼠50只分為對照組：空白對照組(TC組,n=11)、華法林對照組(WC組,n=12)及實驗組：乙二醇造模組(GM組,n=12)、華法林乙二醇組(WGM組,n=15)。本實驗采用0.75%乙二醇飲水誘導SD雄性大鼠形成草酸鈣晶體動物模型；華法林腹腔注射干預MGP類蛋白羧化使其失活,第5天收集、分析24h尿液,第7天處死大鼠,收集血樣并檢測血鈣、磷、肌酐、尿酸等生化指標；采用顯微CT觀察鈣化及晶體分布特點；分別采用蘇木精-伊紅(HE)染色及Von-Kossa's染色鈣鹽染色,并使用偏光顯微鏡觀察,人工分析計數(shù)；免疫組織化學觀察草酸鈣晶體腎組織MGP蛋白的定位與表達。結(jié)果：1、實驗大鼠情況：實驗過程大鼠死亡3只；體重增幅：WGM組、WC組較TC組顯著性下降；2、血清生化檢測：在尿素上：GM組、WC及WGM組相比TC顯著下降,并存在統(tǒng)計學差異。血鈣上：WC、WGM組明顯低于TC、GM組并有顯著差異性,余組相比無差異性。血磷、鎂上各組比較未見顯著差異性。3、24h尿生化：給藥組24h尿肌酐略高于對照組；實驗組24h尿Ca2+、UA、P明顯低于對照組,實驗組尿草酸明顯高于對照組,對照組及實驗組組間比較未見明顯差異；WGM組尿Ca2+、UA、P、Ox相比TC組存在顯著性差異；WGM組在Ca2+、UA、Ox上相比WC組有顯著性差異；GM組在UA、P相比對照組存在顯著差異；GM組在UA、P相比對照組存在顯著差異,Ca2+、P上相比WC組存在顯著差異性；各組尿鎂未見明顯統(tǒng)計學差異。尿枸櫞酸上,TC組、GM組明顯高于WC組、WGM組,WGM組相比GM組、TC組存在顯著差異性,WC組相比TC組存在顯著差異性,WGM組較WC組無明顯差異性,GM組相比TC組無明顯統(tǒng)計學差異性。4、腎乳頭鈣化的顯微CT結(jié)果：TC組、WC組未見明顯鈣化陰影,實驗組觀察到有鈣化陰影,且WGM組較GM組出現(xiàn)鈣斑大鼠比例高,存在顯著差異,且鈣斑更明顯,廣泛。5、病理染色及晶體計數(shù)比較：兩種染色對照組均未見鈣鹽染色,實驗組在HE染色及Von-Kossa's染色中均發(fā)現(xiàn)腎小管內(nèi)草酸鈣晶體存在,腎小管腔擴張；人工統(tǒng)計每切片上晶體數(shù)目,WGM組晶體滯留數(shù)目明顯高于GM組,且計數(shù)存在顯著差異。6、免疫組化：TC組及WGM醇組在腎皮質(zhì)和髓質(zhì)腎小管上皮細胞存在廣泛染色。結(jié)論：1.實驗7天內(nèi)成功在SD雄性大鼠體內(nèi)誘導腎小管內(nèi)草酸鈣晶體形成及高草酸尿癥、低枸櫞酸尿癥。2.MGP類蛋白失活對SD大鼠腎小管內(nèi)草酸鈣晶體形成及滯留具有明顯促進作用。3.免疫組化見MGP在腎皮質(zhì)及腎髓質(zhì)廣泛表達,正常組及草酸鈣結(jié)晶組未見明顯變化。
【關鍵詞】：草酸鈣結(jié)石 動物模型 華法林 晶體滯留 MGP(Macrix-Gla protein)
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R691.4
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 中英文縮略詞表11-12
• 前言12-15
• 1. 泌尿系結(jié)石機制的研究意義12
• 2. MGP對尿石滯留特點的探討12-15
• 第一部分 理論研究15-23
• 1.1 中醫(yī)對尿石癥的認識15-17
• 1.1.1 尿石的病因病機研究15
• 1.1.2 尿石癥的辨證論治15-16
• 1.1.3 現(xiàn)代關于抗凝與中藥活血化瘀的研究16-17
• 1.2 草酸鈣結(jié)石的現(xiàn)代研究17-21
• 1.2.1 草酸鈣結(jié)石模型的建立與探討17-18
• 1.2.2 草酸鈣結(jié)石的代謝研究18-19
• 1.2.3 草酸鈣結(jié)石的形成機制研究19-21
• 1.3 腎鈣素、尿凝血酶片段1類含Gla蛋白對尿石形成機制的探討21-23
• 第二部分 實驗研究23-34
• 2.1 實驗材料23-24
• 2.1.1 實驗動物23
• 2.1.2 實驗儀器和器材23
• 2.1.3 實驗制劑的制備23-24
• 2.2 實驗方法24-27
• 2.2.1 實驗動物分組24
• 2.2.2 實驗動物24尿液采集24-25
• 2.2.3 實驗動物血清采集25
• 2.2.4 采集腎臟及腎乳頭標本及顯微CT觀察25
• 2.2.5 腎組織病理學檢查及偏光顯微鏡檢查25-26
• 2.2.6 MGP的免疫組化表達26-27
• 2.3 統(tǒng)計學方法27
• 2.4 實驗結(jié)果27-33
• 2.4.1 實驗動物死亡情況27
• 2.4.2 實驗動物體重增長情況27-28
• 2.4.3 各組大鼠血清生化分析結(jié)果28
• 2.4.4 各組大鼠24h尿BUN,Cr,UA,IP,Ca2+,Ox及CA分析28-30
• 2.4.5 腎乳頭的顯微CT觀察30-31
• 2.4.6 腎組織病理及偏光顯微鏡檢查31-33
• 2.4.7 MGP的免疫組化表達33
• 2.5 實驗結(jié)論33-34
• 第三部分 討論34-36
• 參考文獻36-40
• 攻讀碩士學位期間取得的學術成果40-41
• 致謝41

【參考文獻】

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本文編號：692619