本文關(guān)鍵詞：靶向survivin基因的shRNA慢病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)膀胱癌EJ細(xì)胞凋亡的影響

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【摘要】：目的:構(gòu)建survivin基因特異性shRNA慢病毒干擾載體,轉(zhuǎn)染膀胱癌EJ細(xì)胞,研究survivin基因在膀胱癌細(xì)胞株中的表達(dá)抑制情況,觀察survivin shRNA慢病毒載體對(duì)EJ細(xì)胞凋亡的影響.方法:以survivin基因?yàn)榘袠?biāo)設(shè)計(jì)shRNA干擾序列,克隆至p SIH1-H1-cop GFP慢病毒載體.干擾載體鑒定正確后轉(zhuǎn)染膀胱癌細(xì)胞株EJ細(xì)胞,熒光顯微鏡下觀察GFP表達(dá)情況,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)survivin基因mRNA含量變化,Western blotting法檢測(cè)survivin蛋白表達(dá),Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)EJ細(xì)胞凋亡情況.結(jié)果:PCR擴(kuò)增鑒定、DNA測(cè)序證實(shí)survivin慢病毒干擾載體構(gòu)建成功;EJ細(xì)胞經(jīng)干擾載體處理后,EJ細(xì)胞survivin基因mRNA水平下調(diào)了73.33%,蛋白表達(dá)受到顯著抑制,EJ細(xì)胞凋亡率達(dá)到24.39%.結(jié)論:成功構(gòu)建了靶向survivin基因的shRNA重組慢病毒干擾載體,可以顯著降低轉(zhuǎn)染細(xì)胞survivin基因的表達(dá)水平,并有效提高膀胱癌細(xì)胞凋亡率.
【作者單位】： 蘭州大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科研究所甘肅省泌尿系統(tǒng)疾病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室甘肅省泌尿系臨床醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】： 載體構(gòu)建 survivin 短發(fā)卡狀RNA(shRNA) 膀胱癌 細(xì)胞凋亡
【基金】：甘肅省科技計(jì)劃項(xiàng)目(1308RJYA056) 甘肅省泌尿系疾病臨床醫(yī)學(xué)中心開(kāi)放課題基金項(xiàng)目(mnlczxkf-28) 蘭州大學(xué)中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目(lzujbky-2014-165)
【分類(lèi)號(hào)】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤,占中國(guó)泌尿系腫瘤發(fā)病率首位,2012年全國(guó)腫瘤登記地區(qū)膀胱癌的發(fā)病率為6.61/10萬(wàn),列惡性腫瘤發(fā)病率的第9位,而在西方國(guó)家的泌尿系腫瘤中發(fā)病率居第2位,僅次于前列腺癌.因此探討相關(guān)癌基因與膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性對(duì)提高膀胱癌療效具有

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 聶祝青;田小林;朱小寶;;Survivin和Caspase-3在結(jié)直腸癌中表達(dá)及臨床意義[J];結(jié)直腸肛門(mén)外科;2013年04期

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3 沈建軍;李斌;龍敏;姜南艷;林芳;何婷;張惠中;;腫瘤特異性Survivin、Livin共沉默RNAi載體的構(gòu)建及其在前列腺癌細(xì)胞中的RNA干涉作用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2013年09期

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

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8 葉佑范;Survivin及其抑制劑YM155對(duì)角膜新生血管作用的研究[D];華中科技大學(xué);2014年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 胡華平;Survivin和Ki-67在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

3 金麗;奇異變形桿菌鞭毛蛋白質(zhì)FliD和人染色體移動(dòng)復(fù)合物的初步晶體學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

4 陳偉;散血草對(duì)裸鼠模型血管瘤生長(zhǎng)及Fas/FasL表達(dá)影響的研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2013年

5 田甜;肝復(fù)康對(duì)肝纖維化大鼠肝組織及肝星狀細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

6 孫良文;慢病毒介導(dǎo)的shRNA干擾IRG1基因表達(dá)及其在布魯菌感染中的作用[D];吉林大學(xué);2014年

7 王麗鑫;DADS誘導(dǎo)人胃癌BGC823細(xì)胞凋亡及其與smac和survivin表達(dá)的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

8 李慧萍;細(xì)胞周期依賴的ApoB RNA編輯的研究[D];浙江師范大學(xué);2014年

9 管小倩;氟尿嘧啶植入劑對(duì)結(jié)直腸癌患者外周血survivin、caspase-3、CD44V6的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2014年

10 王陳萍;新型核苷類(lèi)似物FNC對(duì)非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞侵襲力影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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4 郝楠馨;諸靜其;曹開(kāi)明;常時(shí)新;汪波;劉穎;;膀胱癌的多層螺旋CT征象與病理表現(xiàn)的關(guān)系[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;2009年02期

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7 趙德祥;;螺旋CT在膀胱癌診斷中的應(yīng)用[J];醫(yī)學(xué)信息(上旬刊);2010年08期

8 張輝;尚超;宋永勝;;肝癌衍生生長(zhǎng)因子與膀胱癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性及其對(duì)細(xì)胞侵襲能力影響[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2010年05期

9 木海琦;楊森;王怡君;陳映鶴;;百里醌抑制膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2011年11期

10 李濤;楊立;王志平;;鼠膀胱癌原位模型建立的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2013年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張永春;谷江;孫發(fā);石家齊;;傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在膀胱癌治療中的意義[A];2010年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

2 潘春武;沈周俊;唐小瑩;王e，

本文編號(hào)：683078