人紅細胞生成素對高糖誘導腎近曲小管上皮細胞轉(zhuǎn)分化過程中炎性因子的影響及其可能機制
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更多相關(guān)文章: 糖尿病腎病 紅細胞生成素 細胞轉(zhuǎn)分化 白細胞介素 腫瘤壞死因子α RhoA/ROCK信號通路
【摘要】:目的探討重組人紅細胞生成素(rhEPO)對高糖誘導的正常人腎小管上皮細胞(HK-2細胞)轉(zhuǎn)分化過程中炎性因子的變化及其可能機制。方法體外培養(yǎng)HK-2細胞,采用隨機數(shù)字表法分為空白對照組(未加任何刺激物)、高糖誘導組(高糖終濃度為30 mmol/L)、甘露醇對照組(甘露醇為24.5 mmol/L)、rhEPO對照組(rhEPO終濃度為20 U/ml)、不同濃度rhEPO干預組(rhEPO終濃度分別為5、10、20 U/ml+高糖)及Rho激酶抑制劑(Y27632)組(Y27632終濃度為30μmol/L,加入Y27632 30 min后加高糖,高糖終濃度為30 mmol/L),以上各組均培養(yǎng)24 h。采用RT-PCR檢測各組細胞RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表達水平;采用細胞免疫熒光法檢測E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達水平;采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測人纖維連接蛋白(FN)、白介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)的蛋白表達水平。結(jié)果各組RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表達比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);其中高糖誘導組與5 U/ml rhEPO組RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表達均高于空白對照組,10 U/ml rhEPO組、20 U/ml rhEPO組及Rho激酶抑制劑組RhoA 、ROCK1 mRNA表達均低于空白對照組(P0.05);不同濃度rhEPO組RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表達均低于高糖誘導組(P0.05),Rho激酶抑制劑組ROCK1 mRNA表達低于高糖誘導組(P0.05);10 U/ml rhEPO組與20 U/ml rhEPO組RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表達均低于5 U/ml rhEPO組(P0.05);20 U/ml rhEPO組RhoA mRNA、ROCK1 mRNA表達均低于10 U/ml rhEPO組(P0.05)。各組α-SMA、E-cadherin、FN、IL-6及TNF-α蛋白表達比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);其中高糖誘導組、不同濃度rhEPO組、Rho激酶抑制劑組α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表達均高于空白對照組,E-cadherin均低于空白對照組(P0.05);不同濃度rhEPO組、Rho激酶抑制劑組α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表達均低于高糖誘導組,E-cadherin均高于高糖誘導組(P0.05);10 U/ml rhEPO組、20 U/ml rhEPO組α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表達均低于5 U/ml rhEPO組,E-cadherin均高于5 U/ml rhEPO組(P0.05);Rho激酶抑制劑組α-SMA、FN蛋白表達均低于5 U/ml rhEPO組,E-cadherin均高于5 U/ml rhEPO組(P0.05);20U/ml rhEPO組α-SMA、FN、IL-6及TNF-α蛋白表達均低于10 U/ml rhEPO組,E-cadherin均高于10 U/ml rhEPO組(P0.05);Rho激酶抑制劑組α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表達均低于10 U/ml rhEPO組(P0.05)。Pearson直線相關(guān)結(jié)果分析,高糖誘導組、不同濃度rhEPO干預組RhoA mRNA與ROCK1 mRNA表達水平呈正相關(guān)(r=0.885、0.901、0.886、0.868,P0.05)。結(jié)論 rhEPO可抑制高糖誘導的HK-2細胞轉(zhuǎn)分化,rhEPO還可以通過減少炎性因子的產(chǎn)生,減輕炎性反應,從而延緩糖尿病腎病(DN)的進展,延緩腎間質(zhì)纖維化,其機制可能與RhoA /ROCK信號通路有關(guān)。
【作者單位】: 南昌大學第二附屬醫(yī)院腎內(nèi)科;江西省腫瘤醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 糖尿病腎病 紅細胞生成素 細胞轉(zhuǎn)分化 白細胞介素 腫瘤壞死因子α RhoA/ROCK信號通路
【基金】:江西省自然科學基金資助項目(20122BAB205006)
【分類號】:R587.2;R692.9
【正文快照】: 陳艷霞,楊麗萍,吳險峰,等.人紅細胞生成素對高糖誘導腎近曲小管上皮細胞轉(zhuǎn)分化過程中炎性因子的影響及其可能機制[J].中國全科醫(yī)學,2015,18(20):2433-2438.[www.chinagp.net]Chen YX,Yang LP,Wu XF,et al.Effect and possible mechanism of rh EPO in the transdifferentiatio
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本文編號:663380
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