本文關鍵詞：HCN1通道基因敲除下調(diào)小鼠膀胱Cajal間質(zhì)細胞中BK通道的表達及功能

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【摘要】：目的觀察小鼠HCN1通道基因敲除對其膀胱Cajal間質(zhì)細胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)中BK通道的表達和功能的影響,探討這種影響對膀胱興奮性調(diào)控的意義。方法健康清潔成年的野生型C57BL/6J小鼠和HCN1通道基因敲除的C57BL/6J小鼠各48只(雌雄各半)分別記為正常組和敲基因組,反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)、熒光定量PCR(Q-PCR)、Western blot和免疫熒光雙標檢測其膀胱ICCs中BK通道各亞基的表達變化,離體逼尿肌肌條實驗檢測加入BK通道阻滯劑IBTX前后肌條收縮的變化,激光共聚焦顯微鏡下檢測分別加入BK通道激動劑NS1619、阻滯劑IBTX前后小鼠膀胱ICCs內(nèi)鈣熒光的變化。結果 Q-PCR顯示敲基因組小鼠膀胱中BK通道α、β1、β2、β3、β4各亞基表達均降低(P0.01);Western blot顯示敲基因組小鼠膀胱中BK通道α、β1、β2、β3、β4亞基表達均降低(其中α、β3、β4:P0.01;β1、β2:P0.05);免疫熒光雙標顯示敲基因組小鼠膀胱ICCs中BK通道α亞基表達降低(P0.01);離體逼尿肌肌條實驗顯示加入IBTX后敲基因組和正常組肌條收縮幅度均變大(P0.01,P0.05),且敲基因組肌條收縮幅度的變化值小于正常組(P0.05);激光共聚焦顯微鏡下可見加入NS1619后兩組ICCs內(nèi)鈣熒光均降低(P0.05)、加入IBTX后兩組ICCs內(nèi)鈣熒光均增強(P0.01),且不論加入激動劑或阻滯劑,敲基因組加藥前后ICCs內(nèi)鈣熒光的變化值均小于正常組(P0.01)。結論小鼠HCN1通道基因敲除下調(diào)了其膀胱ICCs中BK通道的表達及功能,這種下調(diào)可能是對HCN1通道基因敲除后膀胱收縮減弱的一種代償。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學西南醫(yī)院全軍泌尿外科研究所;第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院泌尿外科;
【關鍵詞】： ICCs 超極化激活環(huán)核苷酸門控陽離子通道 大電導鈣激活鉀通道 小鼠 基因敲除 膀胱
【基金】：國家自然科學基金重點項目(81230017)~~
【分類號】：R694
【正文快照】： 泌尿外科研究所1;400037重慶,第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院泌尿外科2)膀胱逼尿肌興奮性異常是臨床上常見的膀胱功能障礙,是多種膀胱病變?nèi)绨螂走^度活動癥(overactivebladder,OAB)、糖尿病性膀胱、神經(jīng)源性膀胱等的共同發(fā)病機制之一[1-2]。對于膀胱興奮性調(diào)控的研究理論主要有神經(jīng)源性

【共引文獻】

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中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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【相似文獻】

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本文編號：657676