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TSLC1過(guò)表達(dá)對(duì)膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-08 23:06

  本文關(guān)鍵詞:TSLC1過(guò)表達(dá)對(duì)膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用研究


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【摘要】:目的:研究過(guò)表達(dá)肺癌腫瘤抑制因子-1(TSLC1)對(duì)人膀胱癌T24裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用及相關(guān)分子機(jī)制。方法:將構(gòu)建好的TSLC1過(guò)表達(dá)人膀胱癌T24細(xì)胞株(Ad-TSLC1-T24)、空載體對(duì)照T24細(xì)胞株(Ad-T24)及空白對(duì)照T24細(xì)胞株種植于裸鼠皮下,觀察裸鼠移植瘤生長(zhǎng)情況,每5天測(cè)量計(jì)算移植瘤體積一次,并繪制腫瘤的生長(zhǎng)曲線,觀察TSLC1過(guò)表達(dá)對(duì)人膀胱癌T24裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響。種植腫瘤細(xì)胞5周后處死全部裸鼠并留取腫瘤組織標(biāo)本,稱量瘤重并計(jì)算抑瘤率。在光鏡下觀察移植瘤的病理變化,并使用免疫組化檢測(cè)人膀胱癌移植瘤中TSLC1蛋白的表達(dá)情況,并利用Western blot和RT-PCR技術(shù)檢測(cè)裸鼠移植瘤中TSLC1蛋白及m RNA表達(dá)。利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)移植瘤中Bcl-2、Bax、Caspase-3 m RNA的相對(duì)表達(dá)量。利用Western Blot技術(shù)檢測(cè)移植瘤組織中Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白相對(duì)表達(dá)量,探討TSLC1抑制腫瘤生長(zhǎng)的相關(guān)的分子機(jī)制。結(jié)果:成功構(gòu)建三組腫瘤移植瘤模型,腫瘤生長(zhǎng)曲線顯示Ad-TSLC1-T24組移植瘤生長(zhǎng)明顯慢于Ad-T24組及T24組(P0.05),5周后實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),Ad-TSLC1-T24組裸鼠移植瘤體積較Ad-T24組及T24組相比明顯小(P0.05),Ad-TSLC1-T24組腫瘤重量明顯低于Ad-T24組及T24組(P0.05),三組重量分別是(1.1±0.4)g、(1.8±0.5)g、(2.1±0.9)g,抑瘤率為47.6%,明顯高于Ad-T24組(14%,P0.05)。HE染色結(jié)果顯示,TSLC1過(guò)表達(dá)組移植瘤細(xì)胞具有明顯的腫瘤細(xì)胞凋亡壞死現(xiàn)象。免疫組化結(jié)果顯示,TSLC1在Ad-TSLC1-T24組移植瘤中表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性,在Ad-T24組及T24組中表達(dá)均呈弱陽(yáng)性。Western blot結(jié)果顯示TSLC1蛋白在Ad-TSLC1-T24組的相對(duì)表達(dá)量高于Ad-T24組及T24組,RT-PCR結(jié)果顯示TSLC1m RNA在Ad-TSLC1-T24組的相對(duì)表達(dá)量高于Ad-T24組及T24組,Ad-T24組及T24組兩組之間TSLC1蛋白及m RNA的表達(dá)均沒(méi)有明顯差別。RT-PCR結(jié)果顯示Ad-TSLC1-T24組較Ad-T24組與T24組移植瘤中Bax、Caspase-3 m RNA相對(duì)表達(dá)量增加(P0.05),Bcl-2 m RNA相對(duì)表達(dá)量降低(P0.05),Ad-T24組與T24組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western Blot結(jié)果顯示Ad-TSLC1-T24組較Ad-T24組與T24組移植瘤中Bax、Caspase-3蛋白相對(duì)表達(dá)量增加(P0.05),Bcl-2蛋白相對(duì)表達(dá)量降低(P0.05),Ad-T24組與T24組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.TSLC1基因過(guò)表達(dá)對(duì)人膀胱癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用。2.TSLC1抑制膀胱癌裸鼠移植瘤的機(jī)制可能與提高Bax/Bcl-2比例及上調(diào)促凋亡蛋白Caspase-3的表達(dá),促進(jìn)膀胱癌腫瘤細(xì)胞的凋亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:肺癌腫瘤抑制因子1 膀胱癌 裸鼠 移植瘤 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R737.14
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-9
  • 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明9-11
  • 前言11-15
  • 研究現(xiàn)狀、成果11-14
  • 研究目的、方法14-15
  • 對(duì)象和方法15-30
  • 結(jié)果30-38
  • 討論38-46
  • 結(jié)論46-47
  • 參考文獻(xiàn)47-52
  • 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明52-53
  • 綜述 肺癌腫瘤抑制因子1的研究進(jìn)展53-68
  • 綜述參考文獻(xiàn)63-68
  • 致謝68-70
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷70
,

本文編號(hào):642409

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