本文關(guān)鍵詞：TGFβ1和TLR4在T24細(xì)胞中的表達(dá)及相互作用

  更多相關(guān)文章： 膀胱移行細(xì)胞癌 TLR4 TGFβ1

【摘要】：背景膀胱癌是世界范圍內(nèi)男性中第7位常見惡性腫瘤,女性第17位常見惡性腫瘤。作為最常見的膀胱癌亞型,膀胱移行細(xì)胞癌約占所有膀胱癌的90%,浸潤和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。腫瘤的轉(zhuǎn)移過程包括:侵襲相鄰組織,滲透進(jìn)入淋巴/血管系統(tǒng),脫離原發(fā)灶,蔓延至附近或遠(yuǎn)處特定部位之后,經(jīng)過侵襲、增殖、血管重塑等過程形成新的轉(zhuǎn)移性病灶。雖然目前膀胱癌的診斷和治療研究取得了很大進(jìn)步,但是其復(fù)發(fā)、浸潤、轉(zhuǎn)移的機(jī)制尚不明確。大量研究發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming growth factor beta 1,TGFβ1)和Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)信號通路與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過程密切相關(guān),且有文獻(xiàn)報(bào)道,在一些腫瘤細(xì)胞表面存在TLR4的表達(dá),并且其激活可以上調(diào)TGFβ1細(xì)胞因子的表達(dá),猜想TGFβ1和TLR4在腫瘤中可能存在關(guān)聯(lián),而目前有關(guān)兩者間相互作用的報(bào)道甚少,本研究旨在探索與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的TGFβ1與TLR4信號通路,在膀胱移行細(xì)胞癌T24細(xì)胞中的表達(dá)及兩者之間的相互作用。目的研究TGFβ1和TLR4信號通路在膀胱移行細(xì)胞癌T24細(xì)胞中的表達(dá)及相互作用,從而為膀胱移行細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制的研究提供新思路。方法1.采用RT-PCR方法檢測T24細(xì)胞分別在LPS(脂多糖)、rh TGFβ1(重組人源轉(zhuǎn)化生長因子β1)刺激前后TLR4在m RNA水平的表達(dá)量變化。2.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測T24細(xì)胞分別在LPS、rh TGFβ1刺激前后TLR4在蛋白水平的表達(dá)量變化。3.采用RT-PCR方法檢測T24細(xì)胞在LPS刺激前后TGFβ1在m RNA水平的表達(dá)量變化。4.采用ELISA方法檢測T24細(xì)胞在LPS刺激前后TGFβ1在蛋白水平的表達(dá)量變化。結(jié)果1.在m RNA水平和蛋白質(zhì)水平均檢測到TLR4和細(xì)胞因子TGFβ1在T24細(xì)胞的表達(dá)。2.三種不同濃度LPS(1μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)刺激T24細(xì)胞12h后,TLR4 m RNA相對表達(dá)量隨著LPS濃度的升高而升高,組間相對表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.26,P=0.007);與對照組相比,當(dāng)LPS濃度為1μg/ml時(shí)即出現(xiàn)升高趨勢,在10μg/ml時(shí)作用效果達(dá)到最強(qiáng)(P0.001)。選用10μg/ml LPS刺激T24細(xì)胞不同時(shí)間之后,TLR4 m RNA相對表達(dá)量出現(xiàn)差異(χ2=13.78,P=0.02),并且在12h時(shí)達(dá)到最高(P0.001)。在蛋白質(zhì)水平,流式細(xì)胞術(shù)檢測到LPS刺激后T24細(xì)胞膜表面TLR4蛋白表達(dá)升高,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=㧟3.93,P=0.02)。3.三種不同濃度LPS(1μg/ml、5μg/ml、10μg/ml)刺激T24細(xì)胞12h后,TGFβ1 m RNA相對表達(dá)量隨著LPS濃度的升高而升高,組間相對表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.28,P=0.03);與對照組相比,當(dāng)LPS濃度為5μg/ml時(shí),其升高開始具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.04),在10μg/ml時(shí)作用效果最為明顯(P=0.003)。選用10μg/ml LPS刺激T24細(xì)胞不同時(shí)間之后,TGFβ1 m RNA相對表達(dá)量出現(xiàn)差異(χ2=15.12,P=0.01),并且在12h時(shí)達(dá)到最高(P0.001)。在蛋白質(zhì)水平,ELISA方法同樣檢測到LPS刺激后細(xì)胞因子TGFβ1蛋白表達(dá)升高,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=㧟2.47,P=0.03)。4.三種不同濃度rh TGFβ1(1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml)作用于T24細(xì)胞12h后,TLR4在m RNA水平有升高趨勢,并且在5ng/ml時(shí)達(dá)到最高,但并不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.88,P=0.28)。之后選用5ng/ml rh TGFβ1刺激T24細(xì)胞不同時(shí)間之后,同樣m RNA相對表達(dá)量變化并沒有因?yàn)闀r(shí)間的變化而出現(xiàn)差異(χ2=9.69,P=0.08)。但在蛋白質(zhì)水平,用5ng/ml rh TGFβ1刺激T24細(xì)胞24h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測到細(xì)胞膜表面TLR4蛋白表達(dá)明顯升高,并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-14.92,P0.001)。結(jié)論1.膀胱移行細(xì)胞癌T24細(xì)胞可組成性表達(dá)TGFβ1和TLR4。2.膀胱移行細(xì)胞癌T24細(xì)胞中,在蛋白質(zhì)水平上,TGFβ1和TLR4信號通路具有正相關(guān)促進(jìn)作用。TLR4信號通路可以被其配體LPS激活,并能促進(jìn)細(xì)胞因子TGFβ1的表達(dá);TGFβ1可以促進(jìn)TLR4蛋白的表達(dá),但并不能影響TLR4在m RNA水平的表達(dá)量。
【關(guān)鍵詞】：膀胱移行細(xì)胞癌 TLR4 TGFβ1
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 中英文縮略詞表11-12
• 引言12-14
• 材料與方法14-23
• 結(jié)果23-32
• 討論32-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 綜述 TGFβ信號通路與腫瘤41-64
• 參考文獻(xiàn)51-64
• 個(gè)人簡歷、在讀期間發(fā)表論文64-65
• 致謝65

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 彭岳;趙鐵建;謝海源;韋燕飛;;細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中一些細(xì)節(jié)問題的探討[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2009年06期

2 鄭麗君;夏文美;童村;;HeLa細(xì)胞的培養(yǎng)與使用[J];醫(yī)藥工業(yè);1983年10期

3 李少英;李月秋;朱金玲;;三種細(xì)胞生長狀況的觀察[J];佳木斯醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1995年06期

4 嚴(yán)國俊;裴燕芳;朱貞宏;吳潔穎;潘金火;;實(shí)時(shí)細(xì)胞電子分析技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];中國藥學(xué)雜志;2014年03期

5 陳必良,穆潤華,馬向東,王德堂,辛?xí)匝?鄭維國,嚴(yán)瑞蘭;特異性反義寡核苷酸對含HPV16的SiHa細(xì)胞的作用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年03期

6 孟洪弟,戚豫,潘虹,吳希如;無線粒體DNA的ρ°206細(xì)胞的培養(yǎng)及其呼吸鏈功能損害[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2000年03期

7 何秉燕;鄧長生;鄒典定;劉湘芬;易有榮;;G-CSF對洛伐他汀誘導(dǎo)的K562細(xì)胞內(nèi)酸堿度及凋亡的影響[J];中華血液學(xué)雜志;2006年07期

8 黃靜紅;李德如;閻國富;;蘿卜硫素對HaCaT細(xì)胞的影響研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2010年11期

9 章靜波,葉祝三;保護(hù)正常組織和細(xì)胞——腫瘤化療研究中的一個(gè)動向[J];國外醫(yī)學(xué)參考資料(腫瘤學(xué)分冊);1978年01期

10 章靜波;薛新華;;細(xì)胞松弛菌素D對EC_a-109細(xì)胞的作用[J];解剖學(xué)報(bào);1979年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉令九;趙小琳;岳立廣;徐艷玲;李淑焱;侯麗娟;隋紅;姜崴;謝寶生;李勇;劉兵;李海濱;;細(xì)胞工廠培養(yǎng)人胚肺二倍體細(xì)胞制備凍干甲型肝炎減毒活疫苗[A];2011中國生物制品年會暨第十一次全國生物制品學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2011年

2 宋征;;應(yīng)用Bhas42細(xì)胞試驗(yàn)檢測22個(gè)腫瘤促長基因標(biāo)志物[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會暨藥物非臨床安全性評價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

3 谷彬;張輝;喻澤蘭;;依地福新對Jurkat細(xì)胞生長抑制機(jī)制的研究[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

4 武冬梅;李秀娥;葛莉亞;袁星;;雙酚-A對MCF-7細(xì)胞伏安行為的影響[A];第五屆全國環(huán)境化學(xué)大會摘要集[C];2009年

5 李曉飛;呂超;吳小榮;韓慶玲;王杰;易宗春;;鉛和鋁離子對K562細(xì)胞紅系分化的影響[A];全國生化/工業(yè)與衛(wèi)生毒理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2010年

6 宋為民;郭波;;復(fù)方甘草酸苷對HaCaT細(xì)胞表達(dá)AQP3的影響[A];2011全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

7 劉魯明;錢華;陳震;林勝友;黃挺;;參麥注射液對腫瘤細(xì)胞環(huán)核甘酸的影響[A];全國中醫(yī)藥科研與教學(xué)改革研討會論文集[C];2000年

8 張雪玲;糜漫天;李等松;韋娜;張乾勇;楊志祥;;Lovastatin對HL-60細(xì)胞HMG-CoA還原酶mRNA表達(dá)及細(xì)胞增殖功能的影響[A];中國營養(yǎng)學(xué)會特殊營養(yǎng)第五屆學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

9 房佰俊;廖聯(lián)明;楊少光;史明霞;趙春華;;胎兒骨髓源原始干細(xì)胞分離純化及其生物學(xué)特性的初步研究[A];第九屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2003年

10 李曉軍;朱傳東;汪萍;賈麗;陳芳芳;夏欣一;陳龍邦;;人Id3基因在A549細(xì)胞中的表達(dá)及對細(xì)胞生長功能的研究[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 吳春燕 通訊員 寧習(xí)源 吳劍鵬;人類情緒可影響干細(xì)胞生長[N];光明日報(bào);2014年

2 馮衛(wèi)東;老化干細(xì)胞可轉(zhuǎn)變成年輕干細(xì)胞[N];科技日報(bào);2012年

3 常麗君;科學(xué)家闡明核內(nèi)周期運(yùn)作機(jī)制[N];科技日報(bào);2011年

4 本版編輯邋杜華斌 邰舉 毛文波 顧鋼 陳超 何屹 毛黎;2007年世界科技發(fā)展回顧(六)[N];科技日報(bào);2008年

5 通訊員 李靜;廈大教授發(fā)現(xiàn)細(xì)胞防癌“玄機(jī)”[N];廈門日報(bào);2009年

6 永誠;美發(fā)現(xiàn)控制細(xì)胞生長的蛋白質(zhì)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2000年

7 記者 張孟軍;加找到刺激干細(xì)胞生長分子[N];科技日報(bào);2001年

8 張?zhí)锟?干細(xì)胞研究精彩紛呈[N];中國醫(yī)藥報(bào);2011年

9 邵薇/編譯;T細(xì)胞的非凡能力[N];北京科技報(bào);2003年

10 經(jīng)天;控制細(xì)胞生長的蛋白質(zhì)[N];中藥事業(yè)報(bào);2000年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔣淵;缺氧肝癌細(xì)胞中HIF-1和NF-κB的相互作用及其分子機(jī)制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 張廣;肝星狀細(xì)胞在肝癌細(xì)胞惡性行為中的作用及機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

3 付托;活性氧族在CHO細(xì)胞補(bǔ)料批次培養(yǎng)中的作用、機(jī)制及調(diào)控研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

4 楊小超;陽離子配體修飾的納米金用于細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)和微囊自組裝研究[D];重慶大學(xué);2010年

5 葉玲玲;基于生物素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的HEK293細(xì)胞多基因代謝工程改造[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

6 梁國斌;產(chǎn)朊假絲酵母生產(chǎn)谷胱甘肽過程控制與優(yōu)化[D];江南大學(xué);2008年

7 楊海虹;鈣池操縱性鈣內(nèi)流在人肺腺癌A549細(xì)胞中的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

8 常玉娟;基于Nrf2/ARE通路辛開苦降方胃康寧對人胃粘膜上皮細(xì)胞SOD2、GSTP1相關(guān)調(diào)控機(jī)制的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

9 楊麗君;人Fcα/μR的表達(dá)與功能的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

10 李曼;DRC3f及eRF3b在肝病發(fā)生發(fā)展中作用機(jī)制的初步研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 柯自立;硫酸鎂對6-羥基多巴胺損傷的SH-SY5Y細(xì)胞的保護(hù)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 李婷婷;細(xì)胞穿透肽VP22對抑癌蛋白PTEN體外抗腫瘤作用影響的研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

3 王靜;環(huán)氧化物酶抑制劑NS-398聯(lián)合奧沙利鉑對宮頸癌Hela細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 鄭祿祿;番茄紅素對轉(zhuǎn)染SOD1-G93A的PC12細(xì)胞線粒體的保護(hù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 宋晨源;氯化銨對人正常肝細(xì)胞系changliver中二氫乳清酸脫氫酶表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

6 張莉;白藜蘆醇體外抑制腸道病毒71型的作用機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

7 高華武;富硒芪云抗腫瘤作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

8 宋加奎;丹參對人胃癌SGC-7901細(xì)胞化療敏感性的影響[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

9 許雅鑫;尼古丁對NCI-H1975和NCI-H460細(xì)胞促進(jìn)增殖作用及對PI3K/Akt通路的影響研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

10 高娜;加減駐景方含藥血清對二氯化鈷誘導(dǎo)后ARPE-19細(xì)胞表達(dá)VEGF及HIF-1α的影響[D];青海大學(xué);2015年

，

本文編號：616789