本文關(guān)鍵詞：膀胱癌血清microRNA診斷模型的建立及其對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)的臨床意義

  更多相關(guān)文章： 膀胱癌 血清microRNA 診斷 復(fù)發(fā)

【摘要】：目的：通過對(duì)侵襲性膀胱癌膀胱癌、非侵襲性膀胱癌和對(duì)照血清中microRNA(miRNA)進(jìn)行高通量檢測(cè),確定膀胱癌血清miRN A特異表達(dá)譜,建立膀胱癌血清-miRNA診斷模型,并評(píng)價(jià)該miRNA模型對(duì)膀胱癌的診斷價(jià)值,同時(shí)探討血清miRNA與膀胱癌復(fù)發(fā)的關(guān)系。方法：1.在測(cè)序階段,利用Miseq測(cè)序的方法,選取10名侵襲性膀胱癌、10名非侵襲性膀胱癌和10名對(duì)照者血清分別混合后進(jìn)行高通量的miRNA序列測(cè)定,對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析,獲取膀胱癌血清miRNA特異表達(dá)譜,篩選出膀胱癌組與對(duì)照組間差異表達(dá)的miRNA.2.在確證階段,采用qRT-PCR技術(shù),首先在120名膀胱癌患者和120名對(duì)照者血清中對(duì)初步篩選出的差異表達(dá)miR NA進(jìn)行驗(yàn)證,進(jìn)一步確定差異表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的miRNA。將確定的差異表達(dá)miRNA帶入多元Iogisitic回歸分析,建立膀胱癌血清miRNA診斷模型,采用受試者工作曲線(receiver operating characteristic curve, ROC)分析膀胱癌血清1miRNA診斷模型的診斷效能。3.在驗(yàn)證階段,另選取110位膀胱癌患者和110名對(duì)照者血清,采用qRT-PCR方法再次驗(yàn)證差異表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的miRNA,并評(píng)價(jià)血清miRNA診斷模型對(duì)膀胱癌的診斷價(jià)值。同時(shí)獲取110位膀胱癌患者和110名對(duì)照者的尿液標(biāo)本進(jìn)行傳統(tǒng)的尿液脫落細(xì)胞學(xué)檢查,對(duì)比分析膀胱癌血清miRNA診斷模型與尿液脫落細(xì)胞學(xué)對(duì)膀胱癌的診斷價(jià)值。4.分別跟蹤分析驗(yàn)證階段110名侵襲性膀胱癌和110名非侵襲性膀胱癌患者的復(fù)發(fā)信息。采用Kaplan-Meier方法進(jìn)行膀胱癌患者無復(fù)發(fā)生存曲線分析,通過Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型分別分析可用于侵襲性膀胱癌和非侵襲性膀胱癌復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)的獨(dú)立預(yù)后因素。結(jié)果：1.測(cè)序階段候選miRNA的篩選：經(jīng)血清Miseq測(cè)序,共檢測(cè)了529個(gè)miRNA (≥1個(gè)拷貝),其中在侵襲性膀胱癌組、非侵襲性膀胱癌組和對(duì)照組中分別確定了259、180和206個(gè)miRNA (≥10個(gè)拷貝)。經(jīng)初步篩選,共選取了26個(gè)在膀胱癌和對(duì)照者血清中差異表達(dá)的miRNA,其中18個(gè)]miRNA在膀胱癌組血清中表達(dá)下調(diào)(miR-484, let-7b-5p, let-7a-5p, miR-30a-5p, miR-181b-5p, miR-1228-5p, miR-181a-5p, miR-27a-3p, miR-3135b, miR-3187-3p, miR-185-5p, miR-15a-5p, miR-15b-5p, miR-92b-5p, miR-342-3p, miR-501-3p, miR-148a-3p, 和 let-7i-5p),8 個(gè) miRNA在膀胱癌組血清中表達(dá)上調(diào)(miR-24-3p, let-7c, miR-128, miR-98, miR-148b-3p, miR-30d-5p, miR-1294,和miR-152)。2.在確證階段,經(jīng)qRT-PCR初次驗(yàn)證,膀胱癌血清中miR-152, miR-148b-3p表達(dá)升高,miR-3187-3p, miR-15b-5p, miR-27a-3p, miR-30a-5p表達(dá)降低(均p0.001)。ROC評(píng)估m(xù)iR-152, miR-148b-3p, miR-3187-3p, miR-15b-5p, miR-27a-3p 和 miR-30a-5p診斷膀胱癌的受試者工作曲線下面積(area underthe ROC,AUC)分別為0.738,0.729,0.814,0.715,0.703和0.654。通過Logistic多元回歸分析建立了基于六個(gè)1niRNA分子的膀胱癌血清miRNA診斷模型,此診斷模型AUC為0.956(95%CI為0.922-0.978,靈敏度為90.00%,特異度為90.00%)。3.在驗(yàn)證階段,經(jīng)qRT-PCR再次驗(yàn)證后表明,膀胱癌血清miRNA診斷模型AUC為0.899(95%CI為0.851-0.936,靈敏度為80.00%,特異度為89.09%)。其對(duì)Ta,T1和T2-T4期膀胱癌的靈敏度分別為90.00%,84.85%,89.36%,明顯高于尿液脫落細(xì)胞學(xué)相應(yīng)的13.33%,30.30%,44.68%,(均p0.001)。4.在非侵襲性膀胱癌患者組,Kaplan-Meier分析顯示,高表達(dá)miR-152膀胱癌患者較低表達(dá)miR-152膀胱癌患者的無復(fù)發(fā)生存率低(p=0.023),低表達(dá)miR-3187-3p膀胱癌患者較高表達(dá)miR-3187-3p膀胱癌患者的無復(fù)發(fā)生存率低(p=0.043)。多變量Cox回歸分析顯示,miR-152和臨床病理分期可以作為非侵襲性膀胱癌復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)(p分別為0.028和0.026)。在侵襲性膀胱癌患者組,未發(fā)現(xiàn)與膀胱癌復(fù)發(fā)相關(guān)的獨(dú)立預(yù)后因素。結(jié)論：1.膀胱癌血清miRNA診斷模型(miR-152, miR-148b-3p, miR-3187-3p, miR-15b-5p, miR-27a-3p 和 miR-30a-5p)對(duì)膀胱癌早期診斷具有一定的臨床意義。2.血清miR-152可作為非侵襲性膀胱癌復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：膀胱癌 血清microRNA 診斷 復(fù)發(fā)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.14
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 符號(hào)說明12-13
• 前言13-18
• 實(shí)驗(yàn)材料18-23
• 實(shí)驗(yàn)方法23-29
• 結(jié)果29-33
• 討論33-38
• 結(jié)論38-39
• 附圖表39-51
• 參考文獻(xiàn)51-58
• 致謝58-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文59-60
• 附件60

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 問曉東,孫新成,王學(xué)民,張樹云,李文平,張振江,郭躍先,張瑞剛;膀胱癌血清和尿液中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平的變化及意義[J];中華外科雜志;2004年14期

2 周捷;臧林泉;馮文彬;潘雪刁;王軍業(yè);郭桐;王秀芳;田亮;劉海洋;;肺癌血清中特異性結(jié)合多肽的篩選[J];廣東醫(yī)學(xué);2010年08期

3 王慧霞;;肺癌血清及胸水淀粉酶檢測(cè)及臨床意義[J];吉林醫(yī)學(xué);2013年21期

4 郭麗;張毅;呂金燕;高文斌;吳世法;王若雨;;用多元分析方法研究乳腺癌血清的表面增強(qiáng)拉曼光譜[J];光譜學(xué)與光譜分析;2013年06期

5 陳東仕;金宏偉;黃慧英;翁鷺娜;黃河清;;質(zhì)譜技術(shù)在篩選肺癌血清差異多肽與蛋白質(zhì)的應(yīng)用[J];廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2006年S1期

6 李長(zhǎng)生,李清泉,潘顯光;肺癌血清氧自由基清除劑檢測(cè)的臨床意義[J];中華內(nèi)科雜志;1996年03期

7 國(guó)愛英;石磊垣;王兆祥;常克力;鄒永勝;林庭樽;;乳腺癌血清中雌激素水平[J];腫瘤臨床;1984年03期

8 林紅,吳薇,羅輝,杜力群;肺癌血清CA125測(cè)定的診斷價(jià)值[J];中國(guó)癌癥雜志;2002年02期

9 王建光,李一鳴,葉維曾,鮑正華,張光勤,徐海成;胃癌血清中免疫抑制因子的初步探討[J];上海免疫學(xué)雜志;1983年05期

10 王亞強(qiáng),王福黨,顏平;肺癌血清弓形蟲抗體的檢測(cè)分析[J];中國(guó)誤診學(xué)雜志;2002年12期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 巫振洪;高艷章;;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子在乳腺癌血清表達(dá)的意義[A];第十屆全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

2 林琳;高瑤;黃真真;張琪爾;時(shí)琳;杭緯;;傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜法對(duì)腎癌血清代謝組學(xué)的研究[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第27屆學(xué)術(shù)年會(huì)第09分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2010年

3 陳文學(xué);張q和;魏淑琴;徐國(guó)峰;胡美迪;朱萱;呂農(nóng)華;;肝癌血清核酸適配子的篩選及其鑒定[A];首屆浙贛兩省腫瘤研究交流會(huì)論文匯編[C];2012年

4 尚文麗;楊拴盈;張薇;劉曉麗;周丹菲;蔣梅花;;Mapk1在肺癌血清中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)胸部腫瘤及內(nèi)窺鏡學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

5 陳文學(xué);張q和;魏淑琴;徐國(guó)峰;胡美迪;朱萱;呂農(nóng)華;;肝癌血清核酸適配子的篩選及其鑒定[A];第二十五屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

6 徐國(guó)峰;陳文學(xué);張q和;王婷;胡美迪;朱萱;呂農(nóng)華;;一組肝癌血清核酸適配子對(duì)肝癌的診斷價(jià)值[A];第二十五屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

7 黃芳;耿燕;李婷婷;樊小燕;張西英;;肺癌血清CEA、CA12-5、NSE、CYFRA21-1聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

8 廖秋林;陳曉東;趙亮;丁彥青;;鼻咽癌血清比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)暨第九屆全國(guó)病理大會(huì)論文匯編[C];2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 李國(guó)惠;肺癌血清分子標(biāo)志物的研究及應(yīng)用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

2 陳文學(xué);肝癌血清核酸適配子的篩選及其鑒定[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2011年

3 高樹庚;肺癌血清標(biāo)志分子的篩選及臨床意義[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蔣秀梅;膀胱癌血清microRNA診斷模型的建立及其對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)的臨床意義[D];山東大學(xué);2015年

2 王寶楠;紅外光譜法對(duì)癌癥早期診斷研究[D];長(zhǎng)春理工大學(xué);2011年

3 張洪麗;胃癌血清適配子對(duì)胃癌診斷價(jià)值的研究[D];南昌大學(xué);2014年

4 陳奇松;鼻咽癌血清的拉曼光譜研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

5 郭麗;用多元分析方法研究乳腺癌血清的SERS光譜[D];大連理工大學(xué);2011年

6 杜貞華;可溶性B7-H3在乳腺癌血清中的表達(dá)及意義[D];山東大學(xué);2011年

7 江露;可溶性LAG-3分子在胃癌血清中的表達(dá)及臨床意義[D];蘇州大學(xué);2014年

8 孫萍;乳腺癌血清TPS、VEGF的表達(dá)及與臨床病理特征關(guān)系的探討[D];中南大學(xué);2007年

9 王獻(xiàn);抗Survivin抗體和NSE在肺癌血清中聯(lián)合檢測(cè)的研究[D];河南科技大學(xué);2012年

10 梁瓊;肝癌血清miRNA的提取、分離及檢測(cè)研究[D];西北師范大學(xué);2010年

，

本文編號(hào)：596113