本文關(guān)鍵詞：沉默Robo基因?qū)θ税螂滓菩紊掀ぐ┘?xì)胞T24增殖的影響

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【摘要】：【目的】研究Robo蛋白在人膀胱移形上皮癌細(xì)胞(T24)中的表達(dá)及沉默Robo基因?qū)24細(xì)胞增殖的影響�！痉椒ā繉�(shí)驗(yàn)分為兩組,對(duì)照組(不轉(zhuǎn)染載體)和轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染復(fù)合載體),每組20例。對(duì)照組體外培養(yǎng)T24細(xì)胞,用免疫組織化學(xué)、免疫熒光和蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)是否有Robo蛋白的表達(dá)及其表達(dá)亞型;轉(zhuǎn)染組利用RNA干擾技術(shù),尋找表達(dá)基因的沉默位點(diǎn),構(gòu)建合理的表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染T24細(xì)胞,免疫熒光化學(xué)觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染結(jié)果,蛋白質(zhì)印跡來(lái)檢測(cè)該表達(dá)基因沉默后蛋白表達(dá)的變化,MTT檢測(cè)該表達(dá)基因沉默后細(xì)胞存活率變化�！窘Y(jié)果】1免疫組化和免疫熒光檢測(cè)顯示T24細(xì)胞中有Robo1和Robo4表達(dá),且表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.363和P=0.241),而正常膀胱移行上皮細(xì)胞中無(wú)表達(dá),蛋白質(zhì)印跡證實(shí)了免疫組化結(jié)果(P=0.205)。2沉默Robo基因后,T24細(xì)胞中Robo1和Robo4的表達(dá)受到抑制,尤其是Robo1的表達(dá)幾乎受到全部抑制(免疫熒光P=0.002,蛋白印跡P=0.0001),MTT法檢測(cè)顯示Robo1干擾組細(xì)胞的存活率明顯下降,與對(duì)照組及Robo4組相比差異有顯著性(分別為P=0.012和P=0.023)。【結(jié)論】T24細(xì)胞中存在Robo1和Robo4兩種蛋白受體,沉默Robo基因后,Robo1的表達(dá)和T24細(xì)胞的存活率明顯下降。
【作者單位】： 廣東藥科大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院;佛山市南海區(qū)第四人民醫(yī)院泌尿外科;河南大學(xué)附屬淮河醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】： 人膀胱形上癌T細(xì)胞 Robo蛋白 免疫熒光 免疫組化 蛋白質(zhì)印跡 RNA干擾
【基金】：廣東省“4百十”工程人才培養(yǎng)項(xiàng)目(2050205F-43-03)
【分類號(hào)】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌是泌尿外科常見的惡性腫瘤,病因不明。膀胱癌在我國(guó)泌尿系統(tǒng)腫瘤中發(fā)病率和死亡率均居首位,隨著社會(huì)老齡化程度加劇,其發(fā)病率、死亡率呈逐年上升趨勢(shì)[1]。Slits是一種分泌型細(xì)胞外基質(zhì)蛋白,在哺乳動(dòng)物體內(nèi)存在Slitl、Slit2、Slit3三種亞型,即Slit1、Slit2和Slit3,三者均

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1 姚獅章;Robo蛋白在膀胱癌表達(dá)的檢測(cè)及沉默Robo基因?qū)δ[瘤細(xì)胞影響的研究[D];廣東藥學(xué)院;2014年

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本文編號(hào)：556418