發(fā)布時間：2017-06-03 02:03

  本文關(guān)鍵詞：PAK2在去勢抵抗性前列腺癌中表達(dá)升高的意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:檢測不同人的前列腺組織中PAK2以及PAK2活化形式PAK2-S141P表達(dá)水平,探究雄激素在前列腺腫瘤細(xì)胞中對PAK2的影響以及PAK2在去勢抵抗性前列腺癌中的作用。方法:1、利用免疫組織化學(xué)染色法分別檢測人良性前列腺增生(BPH),雄激素依賴性前列腺癌(ADPC)和去勢抵抗性前列腺癌組織(CRPC)中PAK2和PAK2-S141P的表達(dá)水平并比較三組間表達(dá)差異。2、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,雄激素受體陽性前列腺癌LNCaP細(xì)胞在無類固醇培養(yǎng)液培養(yǎng)48h后,應(yīng)用雙氫睪酮(DHT)分別處理30min,2h,4h,8h,24h,48h,72h,蛋白印跡(western blot)檢驗(yàn)細(xì)胞內(nèi)PAK2表達(dá)水平,雄激素受體抑制劑恩雜魯胺(MDV3100)處理LNCaP細(xì)胞24h后,同樣檢測PAK2的表達(dá)水平;利用小干擾RNA特異性沉默前列腺癌C4-2細(xì)胞的PAK2基因,通過細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測PAK2對前列腺腫瘤細(xì)胞增殖和遷徙的影響。3、動物實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)用前列腺癌PC3細(xì)胞系皮下種植Balb/c裸鼠,建立裸鼠皮下異種移植成瘤模型,實(shí)驗(yàn)組以PAK2抑制劑PF-3758309灌胃處理,對照組給予等濃度,等體積的二甲基亞砜(DMSO),相同生長條件下觀察兩組腫瘤生長情況,繪制腫瘤生長曲線,并用免疫組化方法檢驗(yàn)?zāi)[瘤Ki67,Caspase-3和PAK2-S141P的表達(dá)水平。結(jié)果:1.PAK2和PAK2-S141P蛋白在前列腺癌組織中的表達(dá)高于良性前列腺增生組織;在前列腺癌組織中,去勢抵抗期兩種蛋白的表達(dá)又高于雄激素依賴時期的癌組織。2.經(jīng)過雙氫睪酮處理的前列腺癌LNCaP細(xì)胞相對于無類固醇培養(yǎng)液內(nèi)培養(yǎng)的LNCaP細(xì)胞PAK2的表達(dá)水平較低,而經(jīng)雄激素受體抑制劑恩雜魯胺處理的LNCaP細(xì)胞內(nèi)PAK2的表達(dá)升高。說明在雄激素缺乏的情況下,PAK2出現(xiàn)了過表達(dá)。沉默PAK2基因后,C4-2細(xì)胞的增殖活性和遷徙能力受到明顯抑制,同對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.05)。PAK2能促進(jìn)前列腺癌C4-2細(xì)胞的增殖和遷徙。3.動物實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)用PAK2抑制劑PF-3758309處理后的裸鼠PC3細(xì)胞腫瘤生長明顯受到抑制,實(shí)驗(yàn)組Ki67,PAK2-S141P表達(dá)降低,Caspase-3表達(dá)增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。說明PAK2抑制劑抑制腫瘤細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。結(jié)論:PAK2在良性前列腺增生組織、激素依賴性前列腺癌組織和去勢抵抗性前列腺癌中的表達(dá)逐漸增高,故其可能在前列腺癌的進(jìn)展過程中起著重要作用。沉默PAK2基因可以抑制前列腺癌C4-2細(xì)胞的遷徙及增殖活性,PAK2抑制劑PF-3758309抑制小鼠異種移植前列腺癌PC3細(xì)胞成瘤的生長,因而PAK2可能會成為治療前列腺癌尤其是去勢抵抗性前列腺癌的一個靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：P21 蛋白活化激酶2 去勢抵抗 前列腺癌 異種移植
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-15
• 研究現(xiàn)狀、成果11-14
• 研究目的、方法14-15
• 一、PAK2在人前列腺組織中表達(dá)水平的研究15-23
• 1.1 對象和方法15-18
• 1.1.1 研究對象15-16
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法17-18
• 1.2 結(jié)果18-20
• 1.2.1 人前列腺組織PAK2免疫組化表達(dá)水平18-20
• 1.2.2 人前列腺組織PAK2和PAK2-S141P免疫組化結(jié)果分析20
• 1.3 討論20-21
• 1.4 小結(jié)21-23
• 二、雄激素素對前列腺癌細(xì)胞PAK2的影響及PAK2對細(xì)胞生長的影響23-36
• 2.1 對象和方法23-31
• 2.1.1 研究對象23
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料23-25
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法25-31
• 2.2 結(jié)果31-33
• 2.2.1 DHT處理LNCaP細(xì)胞后PAK2的表達(dá)變化31
• 2.2.2 MDV3100對LNCaP細(xì)胞PAK2表達(dá)的影響31
• 2.2.3 C4-2細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)和侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-33
• 2.3 討論33-35
• 2.4 小結(jié)35-36
• 三、PAK2抑制劑對裸鼠異種移植腫瘤生長的影響36-43
• 3.1 對象和方法36-38
• 3.1.1 研究對象36
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)材料36-37
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)方法37-38
• 3.2 結(jié)果38-41
• 3.2.1 PAK2抑制劑PF-3758309對前列腺癌PC3細(xì)胞小鼠成瘤的影響38-39
• 3.2.2 PAK2抑制劑PF-3758309處理組與對照組Ki67,Caspase3,PAK2-S141P的表達(dá)水平39-41
• 3.3 討論41-42
• 3.4 小結(jié)42-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明48-49
• 綜述 P21蛋白活化激酶2與去勢抵抗性前列腺癌研究進(jìn)展49-63
• 綜述參考文獻(xiàn)58-63
• 致謝63

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王超;PAK2在去勢抵抗性前列腺癌中表達(dá)升高的意義[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：PAK2在去勢抵抗性前列腺癌中表達(dá)升高的意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：416992