背景:腎細胞癌是一種較為常見的泌尿系統惡性腫瘤,約占成人惡性腫瘤的3%和所有腎臟惡性腫瘤的90%。在中國,根據赫捷院士等人的統計,2015年新發(fā)腎癌病例66800例,死亡23400例。因腎細胞癌富血管的特點,其對于化療和放療缺乏敏感性,當前主要的治療方式為手術治療和靶向藥物治療。因對腎細胞癌發(fā)生發(fā)展的準確分子機制尚不完全清楚,探究其病理發(fā)生機制很有意義,能夠指導臨床診斷、藥物治療和術后監(jiān)測。MicroRNA(miRNA)是一類內源性非編碼小RNA,長度一般約為20-24nt。其主要在轉錄后水平通過調控靶基因的信使RNA(messengerRNA mRNA),與其3’非翻譯區(qū)(3’-Untranslated Region,3’-UTR)的特定序列結合來發(fā)揮作用。根據其與mRNA轉錄本的互補序列結合緊密程度,可以直接降解靶基因mRNA或抑制其翻譯蛋白,從而阻止特定靶基因的表達。目前關于miRNA與腎細胞癌之間作用機制的研究文獻很多,證實其通過不同的途徑參與到腎細胞癌的發(fā)生、進展轉移等各階段。目的:從臨床收集腎細胞癌組織標本,在實驗室培養(yǎng)經典腎細胞癌細胞株進行研究,用熒光定量PCR法分別檢測...

【文章頁數】：116 頁

【學位級別】：博士

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致謝
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縮略詞表
引言
    參考文獻
第一部分 MIR-362-3P在人腎細胞癌中的表達情況
    1.1 前言
    1.2 材料與方法
    1.3 結果
        1.3.1 組織樣本的臨床和病理特征
        1.3.2 腎細胞癌與癌旁組織MIR-362-3P的表達量比較
        1.3.3 腎細胞癌中MIR-362-3P表觀遺傳學修飾
        1.3.4 DNA甲基化酶抑制劑實驗
    1.4 討論
    1.5 結論
    1.6 參考文獻
第二部分 MIR-362-3P對腎細胞癌細胞增殖、周期、侵襲和遷移的影響
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結果
        2.3.1 MIR-362-3P在腎細胞癌細胞株786-O、ACHN和CAKI-1中的表達量顯著降低
        2.3.2 外源性MIR-362-3P MIMIC可以有效上調腎癌細胞的MIR-362-3P表達量
        2.3.3 MIR-362-3P的表達上調可以顯著抑制腎細胞癌細胞的增殖能力
        2.3.4 MIR-362-3P的表達上調可以顯著抑制786-O和ACHN細胞的平板克隆形成能力
        2.3.5 MIR-362-3P的表達上調可以在體內水平顯著抑制786-O皮下成瘤
        2.3.6 MIR-362-3P的表達上調可以引起786-O和ACHN細胞的G1期阻滯
        2.3.7 MIR-362-3P的表達上調可以顯著抑制786-O和ACHN細胞的遷移和侵襲能力
        2.3.8 MIR-362-3P的表達上調可以顯著抑制786-O和ACHN細胞的AKT/FOXO3A通路,從而抑制周期和逆轉EMT
    2.4 討論
    2.5 結論
    2.6 參考文獻
第三部分 MIR-362-3P的靶基因及影響腎細胞癌的分子機制探討
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 實驗方法
    3.3 結果
        3.3.1 MIR-362-3P潛在靶基因的生物信息學預測和分析
        3.3.2 SP1是MIR-362-3P的直接作用靶點
        3.3.3 人腎細胞癌組織標本中癌基因SP1與預后相關性研究
        3.3.4 下調SP1的表達量與過表達MIR-362-3P的表型和信號通路一致
    3.4 討論
    3.5 結論
    3.6 參考文獻
小結與展望
綜述
    參考文獻
作者簡歷



本文編號：3963967