【背景】 終末期腎病是一種常見并且嚴重的疾病，近年來以每年10%的速度在增長。腹膜透析（peritoneal dialysis）是終末期腎病患者(ESRD)的腎臟替代治療方法之一，它采用腹膜作為半透膜進行超濾和彌散達到清除毒素和水分的作用。腹膜透析不能長期進行多與腹膜結(jié)構(gòu)和功能的逐漸破壞有關，以至于病人必須改變治療策略[1]。近年來研究證實：腹膜間皮細胞向間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化(EMT)是腹膜透析患者腹膜發(fā)生損害的關鍵，也是導致腹膜纖維化的重要環(huán)節(jié)[2]。腹膜纖維化的重要病理改變是間皮細胞下層纖維化、基底膜增厚。上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化是腫瘤發(fā)展、慢性炎癥以及纖維化的一個必經(jīng)過程，而Twist在上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化中起到重要的調(diào)控作用[3]。本課題組前期實驗研究證實，Twist在體外HPMCs細胞系向間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化中發(fā)揮著重要的作用，其過表達促進了腹膜間皮細胞向間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化即EMT的發(fā)生[4]，然而前期研究主要在體外實驗中進行，關于Twist是否能在人體內(nèi)促進腹膜間皮細胞轉(zhuǎn)分化以及通過哪些相關分子調(diào)控尚不清楚。因此深入研究人腹膜間皮細胞在腹膜透析液作用下發(fā)生轉(zhuǎn)分化的機制，以及相關的調(diào)控分子，對...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1腹膜透析患者透出液原代培養(yǎng)人腹膜間皮細胞的形態(tài)學改變Fig.1Morphologicalchangesofhumanperitonealmesothelialcells(HPMCs)inperitonealdialysisfluidfrompatientundergoingPDdialysis

MedJChinPLA,Vol.38,No.11,November1,2013881混合存在；透齡48個月透出液培養(yǎng)的細胞多呈條索狀，類似纖維樣細胞。提示隨著透齡的延長，HPMCs形態(tài)由上皮樣細胞逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維樣細胞(圖1)。2.2免疫熒光及Westernblotting檢測Tw....

圖2E-cadherin、α-SMA和Twist在不同透齡腹膜透析透出液培養(yǎng)的HPMCs中的表達Fig.2ExpressionofE-cadherin,α-SMAandTwistdetectedbyimmunofluorescenceandWesternblottingintheHPMCsfromperitonealdialysisfluidinPDpatientsα-SMAβ-actin43kD43kD642016121824Time(month)

質(zhì)粒和對照質(zhì)粒后，免疫熒光染色顯示，對照組E-cadherin在細胞膜高表達，而α-SMA表達較弱。與對照組相比，過表達Twist后E-cadherin表達明顯減弱(P<0.05)，而α-SMA、Twist及Bmi-1的表達顯著增加(P<0.05，圖4A)。Westernblot....

圖4Twist經(jīng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染上調(diào)后E-cadherin、α-SMA、Twist和Bmi-1的表達變化

882解放軍醫(yī)學雜志2013年11月1日第38卷第11期圖3不同透齡PD患者透出液培養(yǎng)的HPMCs中Bmi-1的表達Fig.3ExpressionofBmi-1detectedbyimmunofluorescenceandWesternblottingintheHPMCsfrom....

圖3不同透齡PD患者透出液培養(yǎng)的HPMCs中Bmi-1的表達(3)

882解放軍醫(yī)學雜志2013年11月1日第38卷第11期圖3不同透齡PD患者透出液培養(yǎng)的HPMCs中Bmi-1的表達Fig.3ExpressionofBmi-1detectedbyimmunofluorescenceandWesternblottingintheHPMCsfrom....

本文編號：3908096