【背景】 終末期腎病是一種常見并且嚴重的疾病，近年來以每年10%的速度在增長。腹膜透析（peritoneal dialysis）是終末期腎病患者(ESRD)的腎臟替代治療方法之一，它采用腹膜作為半透膜進行超濾和彌散達到清除毒素和水分的作用。腹膜透析不能長期進行多與腹膜結構和功能的逐漸破壞有關，以至于病人必須改變治療策略[1]。近年來研究證實：腹膜間皮細胞向間充質細胞轉分化(EMT)是腹膜透析患者腹膜發(fā)生損害的關鍵，也是導致腹膜纖維化的重要環(huán)節(jié)[2]。腹膜纖維化的重要病理改變是間皮細胞下層纖維化、基底膜增厚。上皮-間充質轉分化是腫瘤發(fā)展、慢性炎癥以及纖維化的一個必經過程，而Twist在上皮-間充質轉分化中起到重要的調控作用[3]。本課題組前期實驗研究證實，Twist在體外HPMCs細胞系向間充質細胞轉分化中發(fā)揮著重要的作用，其過表達促進了腹膜間皮細胞向間充質細胞轉分化即EMT的發(fā)生[4]，然而前期研究主要在體外實驗中進行，關于Twist是否能在人體內促進腹膜間皮細胞轉分化以及通過哪些相關分子調控尚不清楚。因此深入研究人腹膜間皮細胞在腹膜透析液作用下發(fā)生轉分化的機制，以及相關的調控分子，對...

【文章頁數】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1腹膜透析患者透出液原代培養(yǎng)人腹膜間皮細胞的形態(tài)學改變Fig.1Morphologicalchangesofhumanperitonealmesothelialcells(HPMCs)inperitonealdialysisfluidfrompatientundergoingPDdialysis

MedJChinPLA,Vol.38,No.11,November1,2013881混合存在；透齡48個月透出液培養(yǎng)的細胞多呈條索狀，類似纖維樣細胞。提示隨著透齡的延長，HPMCs形態(tài)由上皮樣細胞逐漸轉變?yōu)槔w維樣細胞(圖1)。2.2免疫熒光及Westernblotting檢測Tw....

圖2E-cadherin、α-SMA和Twist在不同透齡腹膜透析透出液培養(yǎng)的HPMCs中的表達Fig.2ExpressionofE-cadherin,α-SMAandTwistdetectedbyimmunofluorescenceandWesternblottingintheHPMCsfromperitonealdialysisfluidinPDpatientsα-SMAβ-actin43kD43kD642016121824Time(month)

質粒和對照質粒后，免疫熒光染色顯示，對照組E-cadherin在細胞膜高表達，而α-SMA表達較弱。與對照組相比，過表達Twist后E-cadherin表達明顯減弱(P<0.05)，而α-SMA、Twist及Bmi-1的表達顯著增加(P<0.05，圖4A)。Westernblot....

圖4Twist經質粒轉染上調后E-cadherin、α-SMA、Twist和Bmi-1的表達變化

882解放軍醫(yī)學雜志2013年11月1日第38卷第11期圖3不同透齡PD患者透出液培養(yǎng)的HPMCs中Bmi-1的表達Fig.3ExpressionofBmi-1detectedbyimmunofluorescenceandWesternblottingintheHPMCsfrom....

圖3不同透齡PD患者透出液培養(yǎng)的HPMCs中Bmi-1的表達(3)

882解放軍醫(yī)學雜志2013年11月1日第38卷第11期圖3不同透齡PD患者透出液培養(yǎng)的HPMCs中Bmi-1的表達Fig.3ExpressionofBmi-1detectedbyimmunofluorescenceandWesternblottingintheHPMCsfrom....

本文編號：3908096