目的探討微小RNA-545-3p(miR-545-3p)對前列腺癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其對血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)/血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)信號通路的調(diào)控作用。方法 qRT-PCR檢測miR-545-3p在不同前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況;雙熒光素酶報告基因檢測miR-545-3p與VEGFA的相互作用;MTT實驗與流式細(xì)胞術(shù)檢測miR-545-3p過表達(dá)及VEGFA過表達(dá)后前列腺癌細(xì)胞增殖能力及凋亡行為的變化;Western blot檢測miR-545-3p過表達(dá)及VEGFA過表達(dá)后前列腺癌細(xì)胞CDK1、Bcl2、Bax及VEGFA/VEGFR2信號通路蛋白的表達(dá)水平變化。結(jié)果 miR-545-3p在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)水平降低,與其他前列腺癌細(xì)胞相比,DU145細(xì)胞中miR-545-3p的表達(dá)水平較低;雙熒光素酶實驗證實miR-545-3p可調(diào)控VEGFA的表達(dá)及活性;miR-545-3p過表達(dá)可減弱前列腺癌細(xì)胞增殖能力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡;miR-545-3p過表達(dá)可下調(diào)VEGFA、p-VEGFR2、CDK1、Bcl2的表達(dá),同時過表達(dá)VEGFA后可逆轉(zhuǎn)miR-54...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 研究方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及實驗分組
        1.2.2 qRT-PCR實驗
        1.2.3 MTT檢測細(xì)胞活力
        1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡
        1.2.5 雙熒光素酶活性測定
        1.2.6 蛋白免疫印跡(Western blot)檢測蛋白表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 miR-545-3p在前列腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)
    2.2 miR-545-3p對前列腺癌細(xì)胞DU145增殖和凋亡的影響
    2.3 miR-545-3p對DU145細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    2.4 miR-545-3p抑制DU145細(xì)胞的VEGFA/VEGFR2信號通路
    2.5 上調(diào)VEGFA/VEGFR2信號通路逆轉(zhuǎn)miR-545-3p對DU145細(xì)胞增殖和凋亡的影響
3 討論



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