本文關(guān)鍵詞：TIM-1信號(hào)通路在IgA腎病大鼠發(fā)病機(jī)制中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察Ig A腎病(Ig A nephropathy,Ig AN)大鼠和正常大鼠中T細(xì)胞免疫球蛋白與黏蛋白域基因-1(T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-1,TIM-1)信號(hào)通路與多種T細(xì)胞亞群的表達(dá)關(guān)系,初步探討TIM-1信號(hào)通路在Ig AN發(fā)病中的作用和機(jī)制。方法:1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及實(shí)驗(yàn)性Ig AN大鼠模型的建立:隨機(jī)將20只SPF級(jí)SD雄性大鼠分為Ig AN模型組及正常對(duì)照組。Ig AN模型組予0.1%牛血清蛋白(BSA)溶液隔日灌胃+CCL4蓖麻油混合劑皮下注射/周+脂多糖(LPS)尾靜脈注射2次,以建立大鼠實(shí)驗(yàn)性Ig AN模型;正常對(duì)照組則以等體積PBS溶液灌胃+等體積生理鹽水皮下注射及尾靜脈注射。2.大鼠實(shí)驗(yàn)性Ig AN模型的鑒定及觀察指標(biāo):觀察大鼠一般情況及大鼠24h尿蛋白定量、血白蛋白、腎功能等指標(biāo)變化,第9周末摘取大鼠腎臟行HE染色及Ig A免疫熒光,以鑒定大鼠實(shí)驗(yàn)性Ig AN模型的建立,并進(jìn)行大鼠腎臟病理?yè)p傷的Katafuchi評(píng)分。同時(shí)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)兩組大鼠腎組織中TIM-1,IL-4、IFN-γ及FOXP3的表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量法檢測(cè)兩組大鼠腎組織中TIM-1 m RNA含量。3.比較兩組間臨床指標(biāo),病理?yè)p傷Katafuchi評(píng)分,TIM-1 m RNA含量,TIM-1、IL-4、IFN-γ及FOXP3免疫組化表達(dá)半定量積分的差異,并分別分析Ig AN組TIM-1 m RNA含量與臨床指標(biāo)、Katafuchi評(píng)分相關(guān)性及TIM-1半定量積分與IL-4、IFN-γ及FOXP3免疫組化表達(dá)半定量積分相關(guān)性。結(jié)果:1.兩組大鼠一般情況變化;Ig AN模型組大鼠在實(shí)驗(yàn)初期一般情況對(duì)比正常對(duì)照組無(wú)明顯差異,自第6周后出現(xiàn)萎靡、少動(dòng),體重增長(zhǎng)減緩,第8周后上述癥狀加重。同時(shí)對(duì)比正常對(duì)照組體重增長(zhǎng)情況,自第6周末大鼠體重增長(zhǎng)明顯減緩,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Ig AN模型組大鼠第4、9周末24尿蛋白定量顯著增加,高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ig AN模型組大鼠第4、9周末血白蛋白顯著下降,低于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);兩組大鼠血肌酐均無(wú)明顯升高,兩組間對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.兩組大鼠腎臟病理改變及腎臟病理?yè)p傷評(píng)分:正常對(duì)照組大鼠腎組織Ig A免疫熒光為陰性,光鏡下可見(jiàn)正常腎小球結(jié)構(gòu),小管、間質(zhì)無(wú)明顯改變;Ig AN模型組腎組織Ig A免疫熒光則可見(jiàn)沿系膜區(qū)有不同程度沉積,光鏡下見(jiàn)腎小球彌漫性輕、中度系膜增寬,系膜細(xì)胞增生,腎間質(zhì)見(jiàn)纖維化伴炎細(xì)胞浸潤(rùn)。大鼠Katafuchi評(píng)分為Ig AN模型組(6.30±1.95)顯著高于正常對(duì)照組(1.30±0.82),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3.免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果:TIM-1在正常對(duì)照組于腎小管胞漿少量陽(yáng)性表達(dá),而在Ig AN模型組于腎小球胞核和腎小管胞漿中廣泛陽(yáng)性表達(dá),定量積分對(duì)比顯著升高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。IL-4在正常對(duì)照組于腎小管胞漿少量陽(yáng)性表達(dá),而在Ig AN模型組于腎小管胞漿中廣泛陽(yáng)性表達(dá),定量積分對(duì)比顯著升高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。IFN-γ在正常對(duì)照組和Ig AN模型組均只在腎小管胞核中有少量陽(yáng)性表達(dá),定量積分對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。FOXP3在正常對(duì)照組和Ig AN模型組均只在腎小球胞核中有少量陽(yáng)性表達(dá),定量積分對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.實(shí)時(shí)熒光定量法檢測(cè)結(jié)果Ig AN模型組腎臟TIM-1 m RNA的相對(duì)表達(dá)量顯著高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。5.相關(guān)性分析結(jié)果在Ig AN模型組中,腎組織TIM-1表達(dá)量與24h尿蛋白定量及Katafuchi評(píng)分呈正相關(guān),與血白蛋白呈負(fù)相關(guān),但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在Ig AN模型組中,腎組織TIM-1表達(dá)量與腎組織表達(dá)IL-4呈正相關(guān)且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),腎組織TIM-1表達(dá)量與腎組織表達(dá)IFN-γ呈正相關(guān),與IFN-γ/IL-4呈負(fù)相關(guān),與腎組織FOXP3表達(dá)無(wú)相關(guān)性,但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.本研究建立以BSA+CCl4+LPS誘導(dǎo)的大鼠Ig AN模型,并發(fā)現(xiàn)TIM-1m RNA的表達(dá)上調(diào),且與Ig AN大鼠的24尿蛋白定量,腎臟病理組織學(xué)損傷程度正相關(guān),提示TIM-1信號(hào)通路可能參與大鼠Ig AN的發(fā)病及進(jìn)展。2.Ig AN大鼠腎組織中TIM-1與IL-4表達(dá)均上調(diào)并呈正相關(guān),提示TIM-1信號(hào)通路可能參與調(diào)控Th2優(yōu)勢(shì)反應(yīng),而參與Ig AN的發(fā)病。3.Ig AN大鼠腎組織中TIM-1的表達(dá)與IFN-γ/IL-4表達(dá)呈負(fù)相關(guān),提示TIM-1信號(hào)通路可能通過(guò)調(diào)控Th1/Th2平衡來(lái)參與Ig AN的發(fā)病。
【關(guān)鍵詞】：IgA腎病 TIM-1 IL-4 IFN-γ FOXP3
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R692.31
【目錄】：

• 摘要3-6
• Abstract6-12
• 第1章 引言12-14
• 第2章 材料與方法14-22
• 2.1 材料14-15
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 2.1.2 主要試劑14
• 2.1.3 主要儀器14-15
• 2.2 方法15-21
• 2.2.1 主要溶液配置15
• 2.2.2 動(dòng)物模型的建立、分組及鑒定15-16
• 2.2.3 一般情況評(píng)價(jià)及標(biāo)本的獲取和處理16
• 2.2.4 蘇木素-伊紅(hematoxylin and eosin ,HE)染色16-17
• 2.2.5 IHC法檢測(cè)小鼠結(jié)腸黏膜內(nèi)TIM-1、IL-4、IFN-γ 及Foxp3蛋白的表達(dá)17-18
• 2.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量法（Realtime-PCR,RT-PCR）檢測(cè)大鼠腎組織中TIM-1 mRNA表達(dá)18-21
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21-22
• 第3章 結(jié)果22-31
• 3.1 兩組大鼠一般情況比較22
• 3.2 兩組大鼠 24h尿蛋白定量比較22-23
• 3.3 兩組大鼠血生化指標(biāo)比較23
• 3.4 兩組大鼠腎臟病理比較23-25
• 3.5 IHC法檢測(cè)大鼠腎臟TIM-1、IFN-γ、IL-4、Foxp3的表達(dá)25-27
• 3.5.1 大鼠腎臟TIM-1 的表達(dá)25
• 3.5.2 大鼠腎臟IFN-γ 的表達(dá)25
• 3.5.3 大鼠腎臟IL-4 的表達(dá)25-26
• 3.5.4 大鼠腎臟Foxp3的表達(dá)26-27
• 3.6 RT-PCR檢測(cè)大鼠兩組大鼠腎臟TIM-1mRNA的含量27-28
• 3.7 TIM-1 表達(dá)與各個(gè)臨床及病理指標(biāo)間的相關(guān)性分析28-31
• 第4章 討論31-34
• 4.1 實(shí)驗(yàn)性IgAN大鼠模型的構(gòu)建31
• 4.2 IgAN與多種效應(yīng)性T細(xì)胞關(guān)系31-32
• 4.3 TIM-1 與腎臟病的關(guān)系32
• 4.4 TIM-1 與IFN-γ、IL-4、Foxp3的關(guān)系32-34
• 第5章 結(jié)論與展望34-35
• 5.1 結(jié)論34
• 5.2 展望34-35
• 致謝35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果39-40
• 綜述40-49
• 參考文獻(xiàn)46-49

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 張靜;李靜;桑曉紅;劉健;王麗娜;苗娜;;運(yùn)用兩種BSA劑量建立IgA腎病大鼠模型觀察[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2013年01期

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  本文關(guān)鍵詞：TIM-1信號(hào)通路在IgA腎病大鼠發(fā)病機(jī)制中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：381204