膀胱癌在泌尿系統(tǒng)的惡性腫瘤疾病中發(fā)病率位居第二,每年在全世界范圍內(nèi)有兩百萬人罹患此病,近年來隨著治療技術(shù)的進(jìn)步死亡率逐漸降低,但膀胱癌的進(jìn)展與轉(zhuǎn)移仍然危害著眾多的患者。越來越多的研究顯示DLK-DI03印記域的miRNA簇上的microRNA在多種腫瘤中發(fā)揮著作用。然而miR-381-3p作為其中的一類在膀胱癌上的作用機(jī)制尚無研究闡明。本研究發(fā)現(xiàn)了該印記域上MEG3的差異甲基化能調(diào)控膀胱癌細(xì)胞中miR-381-3p的表達(dá)量。我們也通過體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)過表達(dá)miR-381-3p可以抑制膀胱癌細(xì)胞增殖與遷移能力。我們通過生物信息學(xué)分析,Western Blot實(shí)驗(yàn)和雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證了 CDK6、CCNA2、MET是miR-381-3p直接的作用靶點(diǎn)。除此之外,我們發(fā)現(xiàn)miR-381-3p靶點(diǎn)中的CCNA2以及CDK6兩者對細(xì)胞周期及增殖起調(diào)控作用。我們也驗(yàn)證了CCNA2經(jīng)ROCK/AKT/β-catenin/SNAIL通路影響膀胱癌細(xì)胞的EMT進(jìn)程,并根據(jù)此前報(bào)道的MET/AKT/GSK-3 β/SNAIL/EMT通路,我們認(rèn)為SNAIL是miR-381-3p影響EMT進(jìn)程的最...

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
Abstract
中英文對照表
1. 緒論
    1.1 miRNA的生物學(xué)特性
    1.2 膀胱癌的流行病學(xué)及治療方法
    1.3 miRNA在膀胱癌中的應(yīng)用
2. miR-381-3p對膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)行為的作用及分子機(jī)制
    2.1 前言
    2.2 研究思路
    2.3 實(shí)驗(yàn)材料
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.6 討論
    2.7 結(jié)論
3. miR-381-3p靶基因調(diào)控膀胱癌生物學(xué)功能的機(jī)制探討
    3.1 前言
    3.2 研究思路
    3.3 研究方法
    3.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.6 討論
    3.7 總結(jié)
4. 探究miR-381-3p調(diào)控EMT的共同靶點(diǎn)
    4.1 前言
    4.2 研究思路
    4.3 研究方法
    4.4 實(shí)驗(yàn)方法
    4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.6 討論
    4.7 結(jié)論
5. miR-381-3p在生物體內(nèi)對膀胱癌的抑癌作用
    5.1 前言
    5.2 研究思路
    5.3 材料與方法
    5.4 實(shí)驗(yàn)方法
    5.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.6 討論
    5.7 結(jié)論
6. 討論與總結(jié)
    6.1 評估了miR-381-3p在膀胱癌中的表達(dá)模式
    6.2 評估了miR-381-3p在膀胱癌中的生物學(xué)功能并發(fā)現(xiàn)其直接靶點(diǎn)CDK6,CCNA2, MET
    6.3 miR-381-3p的靶基因CCNA2能同時(shí)抑制細(xì)胞周期和細(xì)胞的EMT進(jìn)程
    6.4 miR-381-3p靶點(diǎn)CDK6敲低抑制膀胱癌細(xì)胞增殖能力
    6.5 發(fā)現(xiàn)SNAIL是miR-381-3p調(diào)節(jié)EMT進(jìn)程的共同靶點(diǎn)
    6.6 驗(yàn)證了miR-381-3p在生物體內(nèi)同樣對膀胱癌有抑制作用
參考文獻(xiàn)
綜述 miRNA對腫瘤細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)作用
    參考文獻(xiàn)
作者簡歷



本文編號：3786629