發(fā)布時(shí)間：2023-04-02 08:53

　　為探討胚胎轉(zhuǎn)錄因子八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)在順鉑治療睪丸胚胎癌中的作用,采用體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)評(píng)估順鉑對(duì)OCT4沉默睪丸胚胎癌細(xì)胞株的影響。用500 ng/μL順鉑處理腫瘤細(xì)胞后,MTT法檢測(cè)OCT4沉默/不沉默條件下2012EP和833K-E細(xì)胞株的增殖能力,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力;采用細(xì)胞遷移侵襲實(shí)驗(yàn)和結(jié)晶紫染色法檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力;FACS檢測(cè)細(xì)胞周期分布情況;Western blotting分別檢測(cè)OCT4沉默/不沉默條件下腫瘤發(fā)生相關(guān)通路中幾種關(guān)鍵蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,順鉑反增不同濃度OCT4沉默細(xì)胞的存活率(P<0.01)。經(jīng)500 ng/μL順鉑處理后,OCT4沉默細(xì)胞的增殖能力是對(duì)照組的2～3倍(P<0.001),遷移能力是對(duì)照組的2倍(P<0.001),侵襲能力則是約1.5倍(P<0.001)。此外,OCT4沉默上調(diào)了參與細(xì)胞增殖、遷移、轉(zhuǎn)移和細(xì)胞周期調(diào)控的重要蛋白的表達(dá)水平,而OCT4蛋白表達(dá)水平與β連環(huán)蛋白呈正相關(guān)。由此,OCT4可能成為順鉑...

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)
        1.2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
        1.2.2 RT-PCR檢測(cè)
        1.2.3 Western blotting檢測(cè)
        1.2.4 腫瘤細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        1.2.5 MTT檢測(cè)與藥物處理
        1.2.6 細(xì)胞侵襲遷移能力檢測(cè)
        1.2.7 FACS檢測(cè)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 OCT4在不同睪丸生殖瘤細(xì)胞系中的表達(dá)
    2.2 OCT4敲除情況評(píng)估
    2.3 不同劑量順鉑對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響
    2.4 順鉑處理對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響
    2.5 順鉑處理對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲的影響
    2.6 順鉑處理對(duì)腫瘤細(xì)胞G1/S細(xì)胞周期轉(zhuǎn)變的影響
    2.7 β連環(huán)蛋白與OCT4蛋白表達(dá)水平的相關(guān)性
    2.8 腫瘤發(fā)生相關(guān)通路中關(guān)鍵蛋白的表達(dá)與OCT4表達(dá)關(guān)系
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