目的： 探討獲得性調(diào)節(jié)性Th3細胞在IgA腎病中的作用及機制，為IgA腎病臨床治療策略提供新的思路及理論基礎(chǔ)。 方法： 通過體外細胞實驗，將等體積均勻懸浮的DAKIKI B淋巴細胞接種于培養(yǎng)板，設(shè)陰性對照組(不加任何刺激因子)、實驗組(分別加5ng/ml、10ng/ml、15ng/ml、30ng/ml不同濃度的TGF-β1)、陽性對照組(加濃度為10ng/ml IL-4)，分組培養(yǎng)3天、7天。采用ELISA雙抗體夾心法檢測各組細胞培養(yǎng)上清液中IgA1濃度、IgA1低糖基化程度及IgA1唾液酸化程度；采用Real time-PCR技術(shù)檢測各組B淋巴細胞在不同時間點(12h，72h) C1β3Gal-T半乳糖基轉(zhuǎn)移酶和分子伴侶ComscmRNA表達水平。 結(jié)果： (1)細胞上清IgA1濃度測定：ELISA檢測結(jié)果顯示：TGF-β1對B淋巴細胞分泌IgA1成雙向調(diào)節(jié)，在低濃度時(0-10ng/ml)呈正相關(guān)性，在高濃度(10-30ng/ml)呈負相關(guān)性，3、7天空白組VS各實驗組及IL-4組，均P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。 （2）IgA1低糖基化程度測定：一定濃度的TGF-β1及IL-4均會...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 資料
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑及溶液配制
    2.2 方法
        2.2.1 技術(shù)路線
        2.2.2 細胞的復活及處理
        2.2.3 提取 3 天、7 天各組細胞上清液用于檢測 IgA1 濃度及異常糖基化程度，唾液酸化程度
        2.2.4 ELISA 法檢測 IgA1 濃度
        2.2.5 ELISA 法測 IgA1 糖基化程度，唾液酸化程度
        2.2.6 實時熒光定量 Real time -qPCR 檢測 C1β3Gal- T 半乳糖基轉(zhuǎn)移酶和分子伴侶 Comsc 基因表達水平
第3章 結(jié)果
    3.1 Th3 分泌因子 TGF-β1 對 B 淋巴細胞分泌 IgA1 的影響
    3.2 Th3 分泌因子 TGF-β1 對 B 淋巴細胞分泌 IgA1 糖基化及唾液酸化的影響
    3.3 Real time-PCR 熒光定量各組細胞 C1β3 GAL-T、COMSC 基因表達相對定量
第4章 討論
    4.1 IgA 腎病發(fā)病機制
    4.2 低糖基化的 IgA1 在 IgA 腎病發(fā)生發(fā)展中作用
    4.3 輔助性 T 細胞與異常糖基化 IgA1 的形成關(guān)系
    4.4 TGF-β1 在 IgA 腎病發(fā)生展中的作用
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3759404