第一部分MicroRNA-21-5p靶向調(diào)控絲裂原活化蛋白激酶激酶3 目的 驗證MicroRNA-21-5p(miR-21-5p)與絲裂原活化蛋白激酶激酶3(MKK3)3’非編碼區(qū)(3’UTR)結(jié)合，證實miR-21-5p與MKK3的靶向調(diào)控關(guān)系。 方法 1、分別構(gòu)建MKK33’UTR報告載體(MKK3-3U)及MKK33’UTR突變報告載體(MKK3-3U-M)；化學合成miR-21-5p模擬物(mimics)、miR-21-5p抑制劑(inhibitor)及無意義miR (NC)。 2、分別用NC(NC1組)、mimics(mimic1組)、inhibitor(inhibitor1組)與MKK3-3U共轉(zhuǎn)染人胚腎(HEK293)細胞，雙熒光素酶檢測儀檢測細胞熒光比值。 3、分別用空載質(zhì)粒(pYr-MirTarge)(對照組)、MKK3-3U(Wt組)、MKK3-3U-M(Mut組)與mimics共轉(zhuǎn)染HEK293，雙熒光素酶檢測儀檢測細胞熒光比值。 4、NC(NC2組)、mimics(mimic2組)、inhibitor(inhibitor2組)分別干預人腎小管上皮(HK-2)細胞...

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
前言
第一部分 MicroRNA-21-5p 靶向調(diào)控絲裂原活化蛋白激酶激酶 3
    前言
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 統(tǒng)計學處理
    2 實驗結(jié)果
        2.1 MKK3 與 miR-21-5p 間靶向關(guān)系的預測
        2.2 miR-21-5p 與 MKK3 3’UTR 區(qū)結(jié)合
        2.3 miR-21-5p 不能與結(jié)合位點突變的 MKK3 3’UTR 結(jié)合
        2.4 miR-21-5p 在 mRNA 水平下調(diào) MKK3 表達
        2.5 miR-21-5p在蛋白質(zhì)水平下調(diào) MKK3 表達
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻
第二部分 缺血再灌注腎損傷模型小鼠 miR-21/絲裂原活化蛋白激酶激酶 3 /白介素-6 /腫瘤壞死因子-α的表達及意義
    前言
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 統(tǒng)計學方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 各組小鼠血清肌酐水平
        2.2 各組小鼠血尿素氮水平
        2.3 各組小鼠腎臟病理及腎小管間質(zhì)病理損傷評分
        2.4 各組小鼠腎組織miR-21表達水平
        2.5 各組小鼠腎臟MKK3表達變化
        2.6 各組小鼠腎臟IL-6表達變化
        2.7 各組小鼠腎臟TNF-α表達變化
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻
第三部分 腎臟缺血預處理上調(diào) miR-21 低調(diào)絲裂原蛋白蛋白激酶激酶 3 及下游白介素-6 /腫瘤壞死因子-α保護腎臟
    前言
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 統(tǒng)計學方法
    2 實驗結(jié)果
        2.1 各組小鼠血肌酐水平
        2.2 各組小鼠血尿素氮水平
        2.3 各組小鼠腎臟病理及腎小管間質(zhì)病理損傷評分
        2.4 各組小鼠腎組織miR-21表達水平
        2.5 各組小鼠腎臟MKK3表達變化
        2.6 各組小鼠腎臟IL-6表達變化
        2.7 各組小鼠腎臟TNF-α表達變化
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻
第四部分 結(jié)論
綜述 MicroRNAs 與急性腎損傷研究進展
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間主要成果



本文編號：3758843