研究背景膿毒血癥指由于感染及感染所致全身炎癥反應(yīng)導(dǎo)致多器官功能衰竭的一組綜合征。其中革蘭陰性菌內(nèi)毒素-脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是膿毒血癥重要致病因素。腎小管上皮細(xì)胞線粒體結(jié)構(gòu)及功能損傷是內(nèi)毒素血癥誘發(fā)急性腎損傷(Acute kidney injury,AKI)的關(guān)鍵病理改變。但是內(nèi)毒素血癥AKI中腎小管上皮細(xì)胞損傷機(jī)制尚不清楚。叉頭框轉(zhuǎn)錄蛋白O1(Forkhead box O1,FOXO1)是一類保守轉(zhuǎn)錄因子,參與調(diào)控氧化應(yīng)激、糖代謝、DNA損傷修復(fù)。FOXO1在腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞中廣泛表達(dá),在糖尿病腎病、腎纖維化等多種腎臟疾病中發(fā)揮重要作用。但在內(nèi)毒素血癥AKI中,腎小管上皮細(xì)胞FOXO1的作用及具體機(jī)制尚不明確。研究目的探討腎小管上皮細(xì)胞FOXO1在內(nèi)毒素血癥AKI中的作用及機(jī)制。研究方法1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):6-8周C57BL/6小鼠腹腔注射LPS(10mg/kg)誘導(dǎo)內(nèi)毒素血癥AKI模型,檢測(cè)血清肌酐、尿素氮、TNF-α、IL-6。利用Western blot、qPCR、免疫熒光等檢測(cè)小鼠腎臟FOXO1、線粒體中樞調(diào)控分子過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活物 1-...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
    1. 膿毒血癥及膿毒血癥AKI的定義和流行病學(xué)
    2. 膿毒血癥及膿毒血癥AKI的發(fā)病機(jī)制
    3. 膿毒血癥AKI的治療現(xiàn)狀
    4. FOXO1與腎臟疾病
第一章 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
    1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
第二章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 內(nèi)毒素血癥AKI小鼠模型的構(gòu)建
    2.2 小鼠FOXO1過表達(dá)腺相關(guān)病毒腎臟原位注射
    2.3 小鼠腎功能的測(cè)定
    2.4 腎臟標(biāo)本電鏡檢測(cè)
    2.5 炎癥因子測(cè)定
    2.6 石蠟切片的制備及PAS染色
    2.7 條件永生化人腎小管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)
    2.8 體外HK-2細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組及藥物干預(yù)
    2.9 HK-2細(xì)胞siRNA轉(zhuǎn)染
    2.10 HK-2細(xì)胞腺病毒轉(zhuǎn)染
    2.11 Western blot
    2.12 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    2.13 免疫熒光染色
    2.14 Mitotracker染色
    2.15 MitoSOX染色
    2.16 MTT細(xì)胞活力測(cè)定
    2.17 統(tǒng)計(jì)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 FOXO1在內(nèi)毒素血癥AKI小鼠腎小管表達(dá)下調(diào)
    3.2 過表達(dá)FOXO1對(duì)內(nèi)毒素血癥AKI小鼠腎功能及線粒體的影響
    3.3 FOXO1在內(nèi)毒素血癥腎小管上皮細(xì)胞模型中表達(dá)下調(diào)
    3.4 過表達(dá)FOXO1對(duì)內(nèi)毒素血癥HK-2細(xì)胞損傷的影響
    3.5 HK-2細(xì)胞內(nèi)FOXO1可調(diào)控PGC1-α的表達(dá)
第四章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞表
成果
致謝



本文編號(hào)：3749717