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長(zhǎng)鏈非編碼RNA波形蛋白反義RNA1(VIM-AS1)促進(jìn)C4-2去勢(shì)抵抗性前列腺癌細(xì)胞增殖與侵襲

發(fā)布時(shí)間:2023-02-11 13:21
  目的評(píng)估長(zhǎng)鏈非編碼RNA波形蛋白反義RNA1(VIM-AS1)在前列腺癌組織中的表達(dá)及臨床相關(guān)性,探索其對(duì)去勢(shì)抵抗性前列腺癌(CRPC)C4-2細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響及潛在機(jī)制。方法利用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)分析VIM-AS1在前列腺癌組織中的表達(dá)水平及其與TNM分期、生存周期的相關(guān)性;應(yīng)用反義寡核苷酸(ASO)沉默C4-2細(xì)胞中VIM-AS1的表達(dá),5-乙炔基-2′-脫氧尿嘧啶(EdU)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖的變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡和周期的變化,CCK-8法檢測(cè)比卡魯胺殺傷敏感性的變化,TranswellTM實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲和遷移以及細(xì)胞數(shù)目的變化,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遷移距離的變化。生物信息學(xué)分析VIM-AS1與含三聯(lián)基元蛋白24(TRIM24)表達(dá)的相關(guān)性,實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法分別檢測(cè)VIM-AS1對(duì)TRIM24 mRNA和蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果前列腺癌組織VIM-AS1表達(dá)上調(diào),并與患者TNM分期正相關(guān),與總體生存率呈負(fù)相關(guān)。敲低VIM-AS1表達(dá)后,C4-2細(xì)胞增殖能力、S期細(xì)胞比例、侵襲細(xì)胞數(shù)和遷移距離、遷移細(xì)胞數(shù)降低,而比卡魯胺殺傷敏感性、凋...

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和ASO轉(zhuǎn)染
        1.2.2 EdU實(shí)驗(yàn)檢測(cè)C4-2細(xì)胞增殖
        1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)C4-2細(xì)胞的細(xì)胞周期與凋亡
        1.2.4 CCK-8法檢測(cè)C4-2細(xì)胞的藥物敏感性
        1.2.5 TranswellTM實(shí)驗(yàn)檢測(cè)C4-2細(xì)胞的侵襲和遷移
        1.2.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)C4-2細(xì)胞的遷移能力
        1.2.7 實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)C4-2細(xì)胞的VIM-AS1、TRIM24 mRNA水平
        1.2.8 Western blot法檢測(cè)C4-2細(xì)胞的TRIM24蛋白表達(dá)
        1.2.9 生物信息學(xué)分析
        1.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 VIM-AS1在前列腺癌組織高表達(dá)且隨TNM分期增加而增加, 高表達(dá)患者生存率低
    2.2 沉默VIM-AS1表達(dá)抑制前列腺癌細(xì)胞增殖并增加細(xì)胞凋亡, 同時(shí)細(xì)胞對(duì)比卡魯胺殺傷敏感性增強(qiáng)
    2.3 沉默VIM-AS1抑制前列腺癌細(xì)胞的侵襲和遷移
    2.4 VIM-AS1抑制TRIM24表達(dá)
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本文編號(hào):3740459

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