發(fā)布時間：2023-02-11 13:21

　　目的評估長鏈非編碼RNA波形蛋白反義RNA1(VIM-AS1)在前列腺癌組織中的表達及臨床相關(guān)性,探索其對去勢抵抗性前列腺癌(CRPC)C4-2細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響及潛在機制。方法利用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫分析VIM-AS1在前列腺癌組織中的表達水平及其與TNM分期、生存周期的相關(guān)性;應(yīng)用反義寡核苷酸(ASO)沉默C4-2細(xì)胞中VIM-AS1的表達,5-乙炔基-2′-脫氧尿嘧啶(EdU)實驗檢測細(xì)胞增殖的變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡和周期的變化,CCK-8法檢測比卡魯胺殺傷敏感性的變化,Transwell^TM實驗檢測細(xì)胞侵襲和遷移以及細(xì)胞數(shù)目的變化,劃痕實驗檢測遷移距離的變化。生物信息學(xué)分析VIM-AS1與含三聯(lián)基元蛋白24(TRIM24)表達的相關(guān)性,實時定量PCR和Western blot法分別檢測VIM-AS1對TRIM24 mRNA和蛋白表達的影響。結(jié)果前列腺癌組織VIM-AS1表達上調(diào),并與患者TNM分期正相關(guān),與總體生存率呈負(fù)相關(guān)。敲低VIM-AS1表達后,C4-2細(xì)胞增殖能力、S期細(xì)胞比例、侵襲細(xì)胞數(shù)和遷移距離、遷移細(xì)胞數(shù)降低,而比卡魯胺殺傷敏感性、凋...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和ASO轉(zhuǎn)染
        1.2.2 EdU實驗檢測C4-2細(xì)胞增殖
        1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測C4-2細(xì)胞的細(xì)胞周期與凋亡
        1.2.4 CCK-8法檢測C4-2細(xì)胞的藥物敏感性
        1.2.5 TranswellTM實驗檢測C4-2細(xì)胞的侵襲和遷移
        1.2.6 細(xì)胞劃痕實驗檢測C4-2細(xì)胞的遷移能力
        1.2.7 實時定量PCR檢測C4-2細(xì)胞的VIM-AS1、TRIM24 mRNA水平
        1.2.8 Western blot法檢測C4-2細(xì)胞的TRIM24蛋白表達
        1.2.9 生物信息學(xué)分析
        1.2.10 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 VIM-AS1在前列腺癌組織高表達且隨TNM分期增加而增加, 高表達患者生存率低
    2.2 沉默VIM-AS1表達抑制前列腺癌細(xì)胞增殖并增加細(xì)胞凋亡, 同時細(xì)胞對比卡魯胺殺傷敏感性增強
    2.3 沉默VIM-AS1抑制前列腺癌細(xì)胞的侵襲和遷移
    2.4 VIM-AS1抑制TRIM24表達
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本文編號：3740459