棕櫚;鞍踪|組學分析揭示前列腺癌細胞中雄激素促進代謝相關蛋白棕櫚酰化修飾
發(fā)布時間:2022-12-10 06:39
目的:篩選棕櫚;揎椝绞苄奂に卣T導的蛋白,探索前列腺癌去雄激素治療外其他潛在的治療靶點。方法:以LNCa P細胞為研究對象,雄激素(Methyltrienolone,R1881,5 nmol/L)或DMSO(dimethyl sulfoxide)處理LNCa P細胞24 h,同時利用人工合成的炔基棕櫚酸Alk-C16 (100μmol/L)對細胞進行代謝標記,收集細胞,裂解,提取總蛋白,加入標記有疊氮化物的瓊脂糖珠(1 mmol/L),室溫反應1 h,利用疊氮化物與Alk-C16末端炔基發(fā)生點擊化學反應形成的共價鍵將棕櫚;揎椀鞍赘患诃傊侵樯,進行蛋白質譜非標記定量分析(label-free quantitation,LFQ),比較R1881處理和非處理細胞蛋白棕櫚酰化修飾變化情況,篩選棕櫚;揎椝绞苄奂に卣T導的蛋白。結果:實驗共鑒定出907個潛在的棕櫚;揎椀鞍祝╩ascot score> 2,P <0. 05),其中有430個蛋白LFQ值至少有2次不為0。在這430個蛋白中有92個蛋白R1881處理與非處理樣品LFQ比值大于1. 5 (P <0. 05),說明雄激素...
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 抗體、試劑與儀器
1.3 棕櫚;鞍踪|組學分析
1.3.1 炔基棕櫚酸合成
1.3.2 細胞代謝標記及點擊化學反應
1.3.3 蛋白質譜分析及數(shù)據(jù)處理
1.4 蛋白功能分析
1.5 蛋白S-棕櫚;揎棛z測方法(羥胺還原法)
1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 受雄激素誘導的棕櫚酰化修飾蛋白質組學分析
2.2 受雄激素誘導的棕櫚;揎椀鞍坠δ芊诸
2.3 篩選棕櫚;揎検苄奂に卣T導的代謝相關蛋白
2.4 雄激素促進細胞色素b-c1復合體亞基2棕櫚酰化修飾
3 討論
本文編號:3716266
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1 材料與方法
1.1 材料
1.2 抗體、試劑與儀器
1.3 棕櫚;鞍踪|組學分析
1.3.1 炔基棕櫚酸合成
1.3.2 細胞代謝標記及點擊化學反應
1.3.3 蛋白質譜分析及數(shù)據(jù)處理
1.4 蛋白功能分析
1.5 蛋白S-棕櫚;揎棛z測方法(羥胺還原法)
1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 受雄激素誘導的棕櫚酰化修飾蛋白質組學分析
2.2 受雄激素誘導的棕櫚;揎椀鞍坠δ芊诸
2.3 篩選棕櫚;揎検苄奂に卣T導的代謝相關蛋白
2.4 雄激素促進細胞色素b-c1復合體亞基2棕櫚酰化修飾
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