目的:篩選棕櫚酰化修飾水平受雄激素誘導(dǎo)的蛋白,探索前列腺癌去雄激素治療外其他潛在的治療靶點(diǎn)。方法:以LNCa P細(xì)胞為研究對象,雄激素（Methyltrienolone,R1881,5 nmol/L）或DMSO（dimethyl sulfoxide）處理LNCa P細(xì)胞24 h,同時(shí)利用人工合成的炔基棕櫚酸Alk-C16 （100μmol/L）對細(xì)胞進(jìn)行代謝標(biāo)記,收集細(xì)胞,裂解,提取總蛋白,加入標(biāo)記有疊氮化物的瓊脂糖珠（1 mmol/L）,室溫反應(yīng)1 h,利用疊氮化物與Alk-C16末端炔基發(fā)生點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)形成的共價(jià)鍵將棕櫚�；揎椀鞍赘患诃傊侵樯�,進(jìn)行蛋白質(zhì)譜非標(biāo)記定量分析（label-free quantitation,LFQ）,比較R1881處理和非處理細(xì)胞蛋白棕櫚�；揎椬兓闆r,篩選棕櫚�；揎椝绞苄奂に卣T導(dǎo)的蛋白。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)共鑒定出907個(gè)潛在的棕櫚�；揎椀鞍祝╩ascot score＞ 2,P ＜0. 05）,其中有430個(gè)蛋白LFQ值至少有2次不為0。在這430個(gè)蛋白中有92個(gè)蛋白R1881處理與非處理樣品LFQ比值大于1. 5 （P ＜0. 05）,說明雄激素... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 抗體、試劑與儀器
    1.3 棕櫚�；鞍踪|(zhì)組學(xué)分析
        1.3.1 炔基棕櫚酸合成
        1.3.2 細(xì)胞代謝標(biāo)記及點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)
        1.3.3 蛋白質(zhì)譜分析及數(shù)據(jù)處理
    1.4 蛋白功能分析
    1.5 蛋白S-棕櫚�；揎棛z測方法(羥胺還原法)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 受雄激素誘導(dǎo)的棕櫚�；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)分析
    2.2 受雄激素誘導(dǎo)的棕櫚�；揎椀鞍坠δ芊诸�
    2.3 篩選棕櫚�；揎検苄奂に卣T導(dǎo)的代謝相關(guān)蛋白
    2.4 雄激素促進(jìn)細(xì)胞色素b-c1復(fù)合體亞基2棕櫚酰化修飾
3 討論



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