目的：探討高糖和血管緊張素Ⅱ是否可以協(xié)同刺激TLR4的表達(dá)及信號(hào)通路的激活，觀察厄貝沙坦是否下調(diào)TLR4的表達(dá)，以及血管緊張素Ⅱ是否為T(mén)LR4的配體及AT1R與TLR4之間的可能協(xié)同關(guān)系。 方法：研究對(duì)象為大鼠腎小球系膜細(xì)胞（HBZY-1）。細(xì)胞同步化后分組：正常對(duì)照組（5.6mM D-glucose）、高糖組（25mM D-glucose）、血管緊張素Ⅱ（10-7.M）組、高糖+血管緊張素Ⅱ組、AngⅡ（10-7M）+厄貝沙坦（10-5M）組、AngⅡ+厄貝沙坦（10-5M）+TLR4阻斷劑（10ug/ml）組。采用real-time PCR，westernblot檢測(cè)TLR4,MyD88mRNA及蛋白的表達(dá)變化，分別收集細(xì)胞上清液用ELISA檢測(cè)IL-6、MCP-1蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：高糖和血管緊張素Ⅱ分別刺激腎小球系膜細(xì)胞12小時(shí)后TLR4、MyD88mRNA表達(dá)明顯增加，刺激24小時(shí)細(xì)胞上清液IL-6、MCP-1的表達(dá)亦顯著增加，與正常對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.01）。高糖和血管緊張素Ⅱ共同刺激HBZY-1細(xì)胞，下游因子MyD88mRNA及蛋白，炎癥因子IL-6，... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
第1章 引言
第2章 高糖和血管緊張素Ⅱ通過(guò)TLR4協(xié)同刺激大鼠腎小球系膜細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)及干預(yù)研究
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器及耗材
    2.2 方法
        2.2.1 主要溶液的配置
        2.2.2 基本細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.4 熒光定量 PCR（real-time PCR）檢測(cè)上述不同處理組 TLR4、MyD88 mRNA 的相對(duì)表達(dá)量的變化
        2.2.5 western blot 分析各處理組 TLR4、MyD88 蛋白的相對(duì)表達(dá)量
        2.2.6 ELISA 分析各處理組細(xì)胞上清液中 IL-6、MCP-1 的表達(dá)量的變化
        2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 RNA 溶度和純度的檢測(cè)
        2.3.2 real-time PCR 檢測(cè) TLR4、MyD88 mRNA 相對(duì)表達(dá)量結(jié)果
        2.3.3 western blot 檢測(cè) TLR4、MyD88 蛋白表達(dá)結(jié)果
        2.3.4 ELISA 檢測(cè)各組細(xì)胞上清液 IL-6、MCP-1 的表達(dá)變化
    2.4 討論
第3章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脂多糖對(duì)2型糖尿病腎病患者單核細(xì)胞TLR4水平及NF-κB,Notch1表達(dá)的影響[J]. 楊孟雪,甘華,沈清.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(06)



本文編號(hào)：3704898