目的：探討高糖和血管緊張素Ⅱ是否可以協(xié)同刺激TLR4的表達及信號通路的激活，觀察厄貝沙坦是否下調TLR4的表達，以及血管緊張素Ⅱ是否為TLR4的配體及AT1R與TLR4之間的可能協(xié)同關系。 方法：研究對象為大鼠腎小球系膜細胞（HBZY-1）。細胞同步化后分組：正常對照組（5.6mM D-glucose）、高糖組（25mM D-glucose）、血管緊張素Ⅱ（10-7.M）組、高糖+血管緊張素Ⅱ組、AngⅡ（10-7M）+厄貝沙坦（10-5M）組、AngⅡ+厄貝沙坦（10-5M）+TLR4阻斷劑（10ug/ml）組。采用real-time PCR，westernblot檢測TLR4,MyD88mRNA及蛋白的表達變化，分別收集細胞上清液用ELISA檢測IL-6、MCP-1蛋白的表達。 結果：高糖和血管緊張素Ⅱ分別刺激腎小球系膜細胞12小時后TLR4、MyD88mRNA表達明顯增加，刺激24小時細胞上清液IL-6、MCP-1的表達亦顯著增加，與正常對照組相比差異顯著（P＜0.01）。高糖和血管緊張素Ⅱ共同刺激HBZY-1細胞，下游因子MyD88mRNA及蛋白，炎癥因子IL-6，... 

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英漢縮略語名詞對照
第1章 引言
第2章 高糖和血管緊張素Ⅱ通過TLR4協(xié)同刺激大鼠腎小球系膜細胞炎癥因子的表達及干預研究
    2.1 材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器及耗材
    2.2 方法
        2.2.1 主要溶液的配置
        2.2.2 基本細胞實驗
        2.2.3 實驗分組
        2.2.4 熒光定量 PCR（real-time PCR）檢測上述不同處理組 TLR4、MyD88 mRNA 的相對表達量的變化
        2.2.5 western blot 分析各處理組 TLR4、MyD88 蛋白的相對表達量
        2.2.6 ELISA 分析各處理組細胞上清液中 IL-6、MCP-1 的表達量的變化
        2.2.7 統(tǒng)計學處理
    2.3 結果
        2.3.1 RNA 溶度和純度的檢測
        2.3.2 real-time PCR 檢測 TLR4、MyD88 mRNA 相對表達量結果
        2.3.3 western blot 檢測 TLR4、MyD88 蛋白表達結果
        2.3.4 ELISA 檢測各組細胞上清液 IL-6、MCP-1 的表達變化
    2.4 討論
第3章 結論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]脂多糖對2型糖尿病腎病患者單核細胞TLR4水平及NF-κB,Notch1表達的影響[J]. 楊孟雪,甘華,沈清.  中南大學學報(醫(yī)學版). 2012(06)



本文編號：3704898