目的:探討脂氧素A4（lipoxin A4,LXA4）在人腎臟近曲小管上皮細(xì)胞（HK-2）缺氧/復(fù)氧損傷中的保護(hù)作用及可能機(jī)制。方法:LXA4預(yù)處理HK-2細(xì)胞后進(jìn)行缺氧/復(fù)氧處理,CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活性水平,ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）、氨基葡萄糖苷酶（NAG）和亮氨酸氨基肽酶（LAP）水平,羥胺法檢測(cè)細(xì)胞超氧化物歧化酶（SOD）活性,硫代巴比妥酸法檢測(cè)細(xì)胞丙二醛（MDA）水平,實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot法分別檢測(cè)HK-2細(xì)胞的過氧化物酶體增殖子活化受體γ（PPARγ）和血紅素加氧酶-1（HO-1）的m RNA和蛋白表達(dá)的變化,利用RNA干擾技術(shù)干擾PPARγ表達(dá)后檢測(cè)HO-1和核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）的表達(dá)。結(jié)果:LXA4預(yù)處理的缺氧/復(fù)氧組細(xì)胞活性和SOD活性明顯升高,細(xì)胞中γ-GT、NAG、LAP和MDA水平降低,而加入HO-1抑制劑鋅原卟啉（Zn PP）和轉(zhuǎn)染PPARγ的si RNA后,LXA4對(duì)HK-2細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用被阻斷;此外,LXA4預(yù)處理的缺氧/復(fù)氧組HO-1、PPARγ和Nrf2表達(dá)均明顯升高,并且LX... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1材料和方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1HK-2培養(yǎng)及分組
        1.2.2干擾細(xì)胞株的構(gòu)建
        1.2.3CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活性
        1.2.4ELISA法測(cè)定HK-2細(xì)胞γ-GT、NAG和LAP水平
        1.2.5HK-2細(xì)胞SOD活力和MDA水平測(cè)定
        1.2.6Westernblot檢測(cè)HK-2細(xì)胞HO-1、PPARγ和Nrf2蛋白表達(dá)水平
        1.2.7實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)HK-2細(xì)胞HO-1和PPARγmRNA表達(dá)
    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2結(jié)果
    2.1LXA4預(yù)處理對(duì)HK-2細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷后細(xì)胞活性的影響
    2.2RNA干擾對(duì)HK-2細(xì)胞PPARγ蛋白表達(dá)的影響
    2.3LXA4預(yù)處理對(duì)PPARγmRNA和蛋白表達(dá)的影響
    2.4LXA4預(yù)處理對(duì)HO-1mRNA和蛋白表達(dá)的影響
    2.5LXA4預(yù)處理對(duì)Nrf2蛋白表達(dá)的影響
    2.6LXA4預(yù)處理通過HO-1和PPARγ對(duì)HK-2細(xì)胞γ-GT、NAG、LAP和MDA水平及SOD活性的影響
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]以PPAR為靶點(diǎn)防治腎臟疾病藥物研究進(jìn)展[J]. 張恒艾,杜冠華.  中國藥學(xué)雜志. 2010(07)
[4]脂氧素A4對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 王國華,鐘愛梅,孫宗全,夏家紅,劉金平,柳祎,馮劍鍔.  中華胸心血管外科雜志. 2009 (03)



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