目的:探討TRAP1蛋白對(duì)膀胱癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響及機(jī)制。方法:采用Western blot從膀胱癌細(xì)胞株中挑選出高表達(dá)TRAP1的細(xì)胞系BIU-87;使用TRAP1沉默慢病毒（LV3-TRAP1）沉默TRAP1,使用GFP熒光及PCR檢測(cè)LV3-TRAP1沉默效率;Transwell和劃痕實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)沉默TRAP1蛋白表達(dá)后對(duì)膀胱癌細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響;CMH2DCFDA熒光染色細(xì)胞檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞內(nèi)活性氧水平;Western blot檢測(cè)相關(guān)信號(hào)通路TGF/Smad3蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:LV3-TRAP1慢病毒可以有效地抑制TRAP1蛋白的表達(dá);沉默TRAP1蛋白的表達(dá)可以有效抑制膀胱癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力、降低膀胱癌細(xì)胞內(nèi)活性氧水平;同時(shí)TGF/Smad3信號(hào)通路中的TGF、Smad2及Smad3蛋白表達(dá)也相應(yīng)降低。結(jié)論:沉默TRAP1蛋白可以通過(guò)調(diào)控TGF/Smad3信號(hào)通路來(lái)抑制膀胱癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力。 

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞株與主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 慢病毒轉(zhuǎn)染BIU-87細(xì)胞
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        1.2.3 PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染慢病毒TRAP1的沉默效率
        1.2.4 Western blot檢測(cè)TRAP1、TGF-β和Smad3蛋白的表達(dá)
        1.2.5 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TRAP1的表達(dá)對(duì)膀胱癌細(xì)胞侵襲能力的影響
        1.2.6 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TRAP1的表達(dá)對(duì)膀胱癌細(xì)胞遷移能力的影響
        1.2.7 細(xì)胞活性氧 (ROS) 檢測(cè)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 TRAP1在不同膀胱癌細(xì)胞株中的表達(dá)
    2.2 轉(zhuǎn)染慢病毒TRAP1的沉默效率
    2.3 沉默TRAP1后膀胱癌細(xì)胞BIU-87的遷移能力變化
    2.4 沉默TRAP1后膀胱癌細(xì)胞BIU-87的侵襲能力變化
    2.5沉默TRAP1后細(xì)胞活性氧水平檢測(cè)
    2.6 沉默TRAP1后TGF/Smad3信號(hào)通路的蛋白水平變化
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TRAP1 Shows Clinical Significance and Promotes Cellular Migration and Invasion through STAT3/MMP2 Pathway in Human Esophageal Squamous Cell Cancer[J]. Yunwei Ou,Lingyan Liu,Liyan Xue,Wei Zhou,Zitong Zhao,Bainan Xu,Yongmei Song,Qimin Zhan.  Journal of Genetics and Genomics. 2014(10)



本文編號(hào)：3698971