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趨化因子受體7(CCR7)通過(guò)Notch1信號(hào)傳導(dǎo)促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2022-09-28 13:32
  目的:探究CCR7通過(guò)調(diào)控Notch1信號(hào)對(duì)前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的影響和相關(guān)分子機(jī)制方法:將前列腺癌細(xì)胞PC3分別轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-CCR7重組質(zhì)粒、空載質(zhì)粒、CCR7 si-RNA、CCR7 si-RNA陰性對(duì)照,轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)48小時(shí),Western blot檢測(cè)Notch1、EMT相關(guān)蛋白(E-cadherin、Snail和N-cadherin)及MMP-9的表達(dá),用Transwell檢測(cè)前列腺癌PC3細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力;將Notch 1抑制劑(RO4929097)加入分別轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-CCR7重組質(zhì)粒、空載質(zhì)粒、CCR7 si-RNA、CCR7 si-RNA陰性對(duì)照的PC3細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí),用Western blot檢測(cè)EMT蛋白及MMP-9蛋白的表達(dá),同時(shí)檢測(cè)ERK、P38、JNK、NF-κB蛋白及其磷酸化蛋白表達(dá),再通過(guò)Transwell檢測(cè)PC3細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲能力的變化;前列腺癌細(xì)胞PC-3分別轉(zhuǎn)染CCR7重組質(zhì)粒和siRNA后,檢測(cè)ERK、P38、JNK、NF-κB蛋白及其磷酸化蛋白表達(dá);同樣,將ERK抑制劑(PD98059)、P38抑制劑(SB203580)、JNK抑... 

【文章頁(yè)數(shù)】:42 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料
    1.1 主要儀器與設(shè)備
    1.2 主要試劑的配制
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、復(fù)蘇、凍存與傳代
    2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    2.3 檢測(cè) PC-3 細(xì)胞蛋白表達(dá)
    2.4 Transwell 檢測(cè) PC-3 侵襲和轉(zhuǎn)移能力
    2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 CCR7 上調(diào)前列腺癌 PC-3 細(xì)胞中 Notch1 的表達(dá)
    3.2 Notch-1 信號(hào)傳導(dǎo)的激活促進(jìn)了前列腺癌 PC-3 細(xì)胞的侵入和遷移能力
    3.3 CCR7 通過(guò) Notch1 激活 MAPK 和 NF-κB 信號(hào)通路
    3.4 Notch1 誘導(dǎo)的 MAPK 和 NF-κB 信號(hào)對(duì) PC-3 細(xì)胞 EMT 的影響
4 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述:CCR7和Notch1 軸對(duì)腫瘤影響的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3681755

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