目的:本研究觀察糖尿病腎�。―iabetic nephropathy,DN）患者尿外泌體中白細(xì)胞介素-6（Interleukin 6,IL-6）的表達(dá)情況,前列地爾治療對(duì)DN患者尿蛋白水平、腎功能及尿外泌體中IL-6表達(dá)水平的影響,為進(jìn)一步探索前列地爾（Prostaglandin E1,PGE1）治療DN提供理論依據(jù)及新的分子生物學(xué)機(jī)制理論。方法:收集吉大二院2019年7月至2019年12月符合實(shí)驗(yàn)入選標(biāo)準(zhǔn)的糖尿病腎病患者的臨床及化驗(yàn)指標(biāo),其中使用基礎(chǔ)用藥前提下聯(lián)合前列地爾注射液（10ug/d,1周）的患者作為實(shí)驗(yàn)組,基礎(chǔ)用藥患者作為對(duì)照組,并且用藥1周前后收集其晨起新鮮尿液200ml,通過差速超速離心法,提取外泌體,通過投射電子顯微鏡鑒定外泌體的形態(tài)及免疫蛋白印記（Western blot,WB）法鑒定外泌體的特異性標(biāo)記蛋白,BCA法測(cè)其濃度,通過Western blot法檢測(cè)外泌體中IL-6的表達(dá)水平變化。通過試劑盒法提取尿外泌體上的mRNA,通過實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)外泌體中IL-6的mRNA表達(dá)量變化。明確前列地爾治療對(duì)DN患者臨床化驗(yàn)指標(biāo)及尿外泌體中IL-6表達(dá)水平的... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 綜述
    2.1 DN概述
    2.2 IL-6與DN關(guān)系
    2.3 DN的治療
        2.3.1 DN治療概述
        2.3.2 PGE1 治療DN
    2.4 尿外泌體與DN綜述
        2.4.1 外泌體研究概述
        2.4.2 外泌體的分離與鑒定
        2.4.3 外泌體在DN診斷及治療中的研究進(jìn)展
    2.5 外泌體作為藥物載體參與疾病的治療過程
第3章 材料與方法
    3.1 主要試劑
    3.2 主要器材
    3.3 研究對(duì)象
    3.4 尿外泌體的提取與分離
    3.5 透射電鏡下鑒定外泌體的大小及形態(tài)
    3.6 Western Blot法鑒定尿外泌體上特異性標(biāo)記蛋白及實(shí)驗(yàn)的目的蛋白
        3.6.1 BCA法測(cè)定提取的外泌體標(biāo)本的蛋白濃度
        3.6.2 蛋白變性
        3.6.3 SDS-PAGE凝膠電泳
    3.7 試劑盒法提取尿外泌體mRNA
    3.8 使用Nano Drop2000 檢測(cè)提取的mRNA濃度
    3.9 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
    3.10 Real-time PCR檢測(cè)IL-6的m RNA表達(dá)量
    3.11 Western Blot檢測(cè)目的蛋白IL-6 的表達(dá)
    3.12 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、分析
第4章 結(jié)果
    4.1 患者基本信息分析
    4.2 用藥前兩組患者實(shí)驗(yàn)室檢查比較
    4.3 兩組患者用藥前后實(shí)驗(yàn)室檢查比較
    4.4 DN患者尿外泌體的電鏡鑒定分析
    4.5 DN患者尿外泌體標(biāo)記蛋白的western blot法鑒定
    4.6 PGE1 治療對(duì)DN患者尿外泌體中IL-6 表達(dá)水平的影響
        4.6.1 RT-qPCR結(jié)果分析
        4.6.2 Western Blot結(jié)果分析
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]雷公藤甲素通過上調(diào)miR-224-3p改善高糖誘導(dǎo)的NRK-52E細(xì)胞炎癥反應(yīng)[D]. 胡紹蘭.天津醫(yī)科大學(xué) 2017
[3]人尿源干細(xì)胞來源的外泌體對(duì)1型糖尿病大鼠的腎臟保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D]. 姜珍珍.蘇州大學(xué) 2015
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