前列腺癌PC-3細(xì)胞抗TRAIL誘導(dǎo)凋亡的分子機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2022-01-26 13:23
背景與目的:腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)能夠誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞凋亡而不損傷正常細(xì)胞。部分PC-3細(xì)胞能夠?qū)RAIL產(chǎn)生抵抗作用,但目前對(duì)其發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制尚不完全清楚,相關(guān)機(jī)制有待進(jìn)一步探討闡述。方法:將體外培養(yǎng)的PC-3細(xì)胞分為對(duì)照組(僅加培養(yǎng)基)和實(shí)驗(yàn)組(不同濃度滴度的TRAIL處理),作用時(shí)間2472h。MTT法檢測(cè)細(xì)胞抑制率,篩選出抵抗TRAIL治療的PC-3細(xì)胞,Q-PCR檢測(cè)FLIP、DR4、DR5、FADD和caspase-8基因表達(dá)情況。結(jié)果:1. TRAIL對(duì)PC-3細(xì)胞具有一定增殖抑制作用,細(xì)胞平均存活率隨著TRAIL作用時(shí)間延長(zhǎng)而減少;同時(shí)與TRAIL濃度有關(guān),在200ng/ml的TRAIL時(shí),對(duì)PC-3細(xì)胞的增殖抑制作用較強(qiáng)。2. Q-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示TRAIL作用24h的PC-3細(xì)胞較對(duì)照組的FLIP、DR4、DR5、FADD和caspase-8基因的表達(dá)降低;隨著TRAIL作用時(shí)間延長(zhǎng)至72h,DR4、DR5、FADD和caspase-8基因的表達(dá)下降,而FLIP表達(dá)上升。結(jié)論:1、體外實(shí)驗(yàn)TRAIL對(duì)于PC-3治療具...
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
目錄
第1章 前言
第2章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 細(xì)胞來源
2.1.2 主要儀器
2.1.3 主要試劑及耗材
2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.2 細(xì)胞傳代
2.2.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)
2.2.4 細(xì)胞凍存
2.2.5 細(xì)胞復(fù)蘇
2.2.6 TRAIL 處理
2.2.7 實(shí)驗(yàn)分組
2.2.8 MTT 法測(cè)定細(xì)胞增殖活性
2.2.9 引物序列設(shè)計(jì)
2.2.10 RNA 抽提
2.2.11 反轉(zhuǎn)錄
2.2.12 熒光定量 PCR 檢測(cè)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
3.1 TRAIL 對(duì) PC-3 細(xì)胞 MTT 實(shí)驗(yàn)
3.2 Q-PCR 檢測(cè)內(nèi)參及目的基因的 mRNA 表達(dá)水平的變化
3.2.1 Q-PCR 測(cè)定內(nèi)參及目的基因的相對(duì)定量結(jié)果
3.2.2 Q-PCR 測(cè)定內(nèi)參及目的基因成員的 mRNA 表達(dá)水平
第4章 討論
4.1 TRAIL 可能成為 AIPC 治療藥物
4.2 PC3-TR 細(xì)胞的建立方法
4.3 FLIP 表達(dá)升高是 PC3-TR 細(xì)胞形成主要機(jī)制
4.4 抵抗 TRAIL 治療的 AIPC 機(jī)制有待進(jìn)一步闡述
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TRAIL對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的殺傷作用[J]. 楊雷,楊聯(lián)萍,李茹冰,孔祥平,龐建新. 中國病理生理雜志. 2007(06)
[2]TRAIL抑制人前列腺癌細(xì)胞PC-3M體外生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳江,陳曉春,曾甫清. 腫瘤防治研究. 2004(07)
本文編號(hào):3610566
【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
目錄
第1章 前言
第2章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 細(xì)胞來源
2.1.2 主要儀器
2.1.3 主要試劑及耗材
2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑配制
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2.2 細(xì)胞傳代
2.2.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)
2.2.4 細(xì)胞凍存
2.2.5 細(xì)胞復(fù)蘇
2.2.6 TRAIL 處理
2.2.7 實(shí)驗(yàn)分組
2.2.8 MTT 法測(cè)定細(xì)胞增殖活性
2.2.9 引物序列設(shè)計(jì)
2.2.10 RNA 抽提
2.2.11 反轉(zhuǎn)錄
2.2.12 熒光定量 PCR 檢測(cè)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
3.1 TRAIL 對(duì) PC-3 細(xì)胞 MTT 實(shí)驗(yàn)
3.2 Q-PCR 檢測(cè)內(nèi)參及目的基因的 mRNA 表達(dá)水平的變化
3.2.1 Q-PCR 測(cè)定內(nèi)參及目的基因的相對(duì)定量結(jié)果
3.2.2 Q-PCR 測(cè)定內(nèi)參及目的基因成員的 mRNA 表達(dá)水平
第4章 討論
4.1 TRAIL 可能成為 AIPC 治療藥物
4.2 PC3-TR 細(xì)胞的建立方法
4.3 FLIP 表達(dá)升高是 PC3-TR 細(xì)胞形成主要機(jī)制
4.4 抵抗 TRAIL 治療的 AIPC 機(jī)制有待進(jìn)一步闡述
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TRAIL對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的殺傷作用[J]. 楊雷,楊聯(lián)萍,李茹冰,孔祥平,龐建新. 中國病理生理雜志. 2007(06)
[2]TRAIL抑制人前列腺癌細(xì)胞PC-3M體外生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳江,陳曉春,曾甫清. 腫瘤防治研究. 2004(07)
本文編號(hào):3610566
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