發(fā)布時(shí)間：2021-12-22 22:25

　　目的：探討雄激素受體（AR）對(duì)睪丸支持細(xì)胞中熱休克轉(zhuǎn)錄因子1（Hsf1）基因表達(dá)的影響及其作用的分子機(jī)制。方法：采用PCR、Western blot的方法，比較AR特異性敲除（S-AR-/y）小鼠和野生型（WT）小鼠睪丸組織中的Hsf1表達(dá)差異以及雄激素及雄激素受體結(jié)合對(duì)TM4細(xì)胞系中Hsf1和HSPs表達(dá)水平的影響；采用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)（Luciferase report）、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)（Electrophoretic mobility shiftassay， EMSA）和染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)（Chromatin immunoprecipitationassay，ChIP），探討AR調(diào)控Hsf1基因表達(dá)的分子機(jī)制。結(jié)果：RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果及Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與WT小鼠比較，S-AR-/y小鼠睪丸組織中Hsf1表達(dá)水平顯著升高；雄激素顯著降低經(jīng)過AR轉(zhuǎn)染的TM4細(xì)胞中Hsf1mRNA和HSF1蛋白表達(dá)水平。并且Western Blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：HSF1能夠升高熱休克蛋白105（HSP105）和HSP60水平，但對(duì)HSP27、HSP40、HSP70和H... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 總 RNA 提取及熒光定量 PCR
        2.3.2 Western blot 實(shí)驗(yàn)
        2.3.3 質(zhì)粒構(gòu)建及細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.3.4 Luciferase 實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)(EMSA)
        2.3.6 染色體免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)(CHIP)
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 Hsf1 基因在 S-AR-/y小鼠睪丸中的表達(dá)
    3.2 Hsf1 基因在 TM4 細(xì)胞中的表達(dá)
    3.3 HSF1 蛋白在 TM4 細(xì)胞中的表達(dá)差異
    3.4 AR 基因是否與 Hsf1 基因的啟動(dòng)子直接結(jié)合
    3.5 AR 基因通過結(jié)合 Hsf1 上游啟動(dòng)子抑制其表達(dá)
    3.6 探討熱休克蛋白在 TM4 細(xì)胞中的表達(dá)水平
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表文章情況
個(gè)人簡(jiǎn)歷
附錄
    附表 1：縮略語(yǔ)表
    附表 2：主要試劑
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]精子發(fā)生過程中基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控[J]. 張秀軍,劉美玲,賈孟春.  遺傳. 2011(12)
[2]睪丸支持細(xì)胞的生物學(xué)特性及研究進(jìn)展[J]. 余曉暉,胡云飛.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(44)
[3]雄激素受體的結(jié)構(gòu)和功能[J]. 黃寶鋒,劉智皓,吳風(fēng)瑞,王德壽.  四川動(dòng)物. 2008(02)
[4]雄激素對(duì)精子發(fā)生的影響[J]. 鄭新民,鄭航,張林.  醫(yī)學(xué)新知雜志. 2008(01)
[5]精子功能檢測(cè)與男性不育診治的新進(jìn)展[J]. 劉德一,H.W.Gordon Baker.  中華男科學(xué)雜志. 2007(02)
[6]雄激素缺乏與勃起功能障礙[J]. 潘連軍,夏欣一,黃宇烽.  中華男科學(xué)雜志. 2006(11)
[7]烷化劑類藥物對(duì)睪丸生殖功能影響[J]. 何大維,李旭良.  國(guó)外醫(yī)學(xué)（計(jì)劃生育/生殖健康分冊(cè)）. 2006(01)
[8]從基因敲除看生殖激素的作用[J]. 魏鵬,丁乃崢,楊增明.  生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2002(05)
[9]雄激素受體的作用機(jī)制[J]. 解芳,劉峻,張永蓮.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1999(02)
[10]雄激素在皮膚的代謝及抗雄激素的應(yīng)用[J]. 傅爰錕,李娥香.  江西醫(yī)藥. 1982(04)



本文編號(hào)：3547213